摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-26页 |
·肌肉发育的分子基础 | 第13页 |
·猪骨骼肌发育的研究进展 | 第13-15页 |
·猪骨骼肌发育的生长过程 | 第13-14页 |
·猪骨骼肌发育的研究现状 | 第14-15页 |
·LNCRNA 的研究进展 | 第15-22页 |
·lncRNA 的概述 | 第15-16页 |
·lncRNA 的生物学功能 | 第16-22页 |
·LNCRNA 在肌肉发育中的研究进展 | 第22-24页 |
·Msx1 antisense RNA (Msx1-AS RNA)与肌细胞分化 | 第22页 |
·Dnm3os 与肌肉发育 | 第22页 |
·SRA RNA 与肌源发生 | 第22页 |
·linc-MD1 与竞争性内源 RNA | 第22-23页 |
·GTL2 与肌肉肥大 | 第23-24页 |
·half(1/2)-sbsRNAs 与 SMD | 第24页 |
·LNCRNA 在猪骨骼肌发育中的研究现状 | 第24-25页 |
·研究的目的与意义 | 第25-26页 |
第二章 猪胚胎骨骼肌中 LINCRNA 的鉴定与分子特征分析 | 第26-43页 |
·前言 | 第26页 |
·试验材料与实验方法 | 第26-30页 |
·试验动物及样本 | 第26页 |
·主要仪器与试剂耗材 | 第26-27页 |
·RNA 提取 | 第27页 |
·DNaseI 处理及 RNA 纯化 | 第27-28页 |
·RNA 反转录 | 第28页 |
·荧光定量 PCR(qPCR) | 第28-29页 |
·DNA 纯化与回收 | 第29页 |
·连接转化 | 第29页 |
·菌液 PCR 鉴定测序 | 第29-30页 |
·LINCRNA 分析流程 | 第30-33页 |
·测序流程简介 | 第30页 |
·转录本组装 | 第30页 |
·lincRNA 过滤流程 | 第30-33页 |
·LINCRNA 的分子特征分析 | 第33-34页 |
·lincRNA 序列的保守性分析 | 第33页 |
·lincRNA 的重复序列分析 | 第33页 |
·lincRNA 两侧蛋白编码基因的 Gene Ontology 分析 | 第33页 |
·lincRNA 在肌肉发育中的表达分析 | 第33-34页 |
·结果与分析 | 第34-40页 |
·lincRNA 的鉴定结果 | 第34-37页 |
·lincRNA 序列的保守性分析 | 第37页 |
·lincRNA 的重复序列分析 | 第37-38页 |
·lincRNA 两侧蛋白编码基因的 Gene Ontology 分析 | 第38-40页 |
·lincRNA 基因在肌肉发育中的表达分析 | 第40页 |
·讨论 | 第40-43页 |
第三章 LINCRNA 在肌肉发育中功能的初步研究 | 第43-67页 |
·前言 | 第43页 |
·试验材料和方法 | 第43-50页 |
·试验材料 | 第43页 |
·主要仪器和试剂耗材 | 第43-44页 |
·细胞培养 | 第44-45页 |
·siRNA 设计 | 第45页 |
·细胞转染 | 第45页 |
·RNA 提取、纯化及反转录 | 第45-46页 |
·荧光定量 PCR(qPCR) | 第46-47页 |
·cDNA3 末端快速扩增(3’RACE) | 第47-48页 |
·细胞核和细胞质 RNA 提取 | 第48页 |
·RNA 免疫共沉淀(RIP) | 第48-50页 |
·结果 | 第50-65页 |
·保守 lincRNA 的结构信息 | 第50-53页 |
·猪 CUFF.8631 基因在肌肉发育中的表达分析 | 第53-54页 |
·小鼠 ENSMUSG00000090086 基因在 C2C12 细胞分化中的表达情况 | 第54-57页 |
·iso1 和 iso4 转录本的 3 末端结构 | 第57-59页 |
·iso1 和 iso4 转录本在肌肉发育中的表达分析 | 第59-60页 |
·RNA 干扰 iso1 和 iso4 对肌细胞分化标记基因的影响 | 第60-62页 |
·iso1 和 iso4 转录本在细胞内的表达分布 | 第62-63页 |
·iso1 和 iso4 转录本与 PRC2 蛋白的关系 | 第63-65页 |
·讨论 | 第65-67页 |
第四章 DNA 甲基化对小鼠 LINCRNA 的表达调控 | 第67-77页 |
·前言 | 第67页 |
·试验材料和方法 | 第67-69页 |
·主要仪器和试剂 | 第67页 |
·c2c12 细胞分化的基因组 | 第67页 |
·小鼠 lincRNA 基因转录上游片段甲基化检测 | 第67-69页 |
·5-Aza-dc 处理 c2c12 细胞 | 第69页 |
·RNA 提取、纯化及反转录 | 第69页 |
·荧光定量 PCR(qPCR) | 第69页 |
·结果 | 第69-75页 |
·c2c12 细胞分化的 DNA 提取 | 第69-70页 |
·iso1 和 iso4 转录上游的 CpG 岛区域 | 第70页 |
·iso1 和 iso4 转录上游的 CpG 岛扩增 | 第70-71页 |
·iso1 和 iso4 转录上游的 CpG 岛甲基化状态 | 第71-74页 |
·5-Aza-dc 处理 c2c12 细胞后 iso1 和 iso4 的表达量变化 | 第74-75页 |
·讨论 | 第75-77页 |
第五章 全文结论 | 第77-78页 |
主要结论 | 第77页 |
主要创新点 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
作者简历 | 第91-92页 |
附录 | 第92-97页 |