| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-33页 |
| ·引言 | 第17页 |
| ·家畜转基因研究进展 | 第17-24页 |
| ·转基因技术 | 第17-18页 |
| ·新兴的转基因技术 | 第18-22页 |
| ·转基因家畜的应用研究进展 | 第22-24页 |
| ·PB 转座子在转基因动物研究中的应用 | 第24-28页 |
| ·PB 转座子的结构和改造 | 第24-25页 |
| ·PB 转座子的转座特点及转座机制 | 第25-26页 |
| ·PB 转座子在转基因动物研究中的应用 | 第26-28页 |
| ·绿色荧光蛋白在转基因研究中的应用 | 第28-29页 |
| ·用于寻找启动子、增强子等调控元件 | 第28页 |
| ·提高转基因的效率及产物的利用率 | 第28-29页 |
| ·探索不同物种的有效转基因方法 | 第29页 |
| ·生产特殊用途的 GFP 转基因动物 | 第29页 |
| ·脂肪代谢候选基因功能及研究进展 | 第29-32页 |
| ·FABP3 基因生物学功能及研究进展 | 第29-31页 |
| ·fat1 基因功能及研究进展 | 第31-32页 |
| ·目的及意义 | 第32-33页 |
| 第二章 PB 转座系统在牛耳组织成纤维细胞中的转座 | 第33-46页 |
| ·材料 | 第33-36页 |
| ·动物组织样 | 第33页 |
| ·菌种及质粒 | 第33页 |
| ·试剂及仪器设备 | 第33-35页 |
| ·主要生物学软件及常用网站 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-39页 |
| ·牛耳组织成纤维细胞的分离和培养 | 第36页 |
| ·PB 二元共转染系统的的构建 | 第36-38页 |
| ·细胞转染和药物筛选 | 第38-39页 |
| ·结果 | 第39-44页 |
| ·牛耳组织成纤维细胞的分离、培养 | 第39-40页 |
| ·PB 二元共转染系统的构建 | 第40-41页 |
| ·PB 转座子介导外源基因在牛成纤维细胞中的转座 | 第41-43页 |
| ·PB 转座子在牛基因组中的插入特点 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·PB 转座系统启动子的改造 | 第44页 |
| ·PB 转座子在牛基因组中的高效整合及整合特点分析 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第三章 FABP3 和 BFAT-1 基因的克隆及序列分析 | 第46-69页 |
| ·材料 | 第46-48页 |
| ·试验群体 | 第46页 |
| ·试验牛性状表型 | 第46-47页 |
| ·试剂及仪器设备 | 第47页 |
| ·主要生物学软件及常用网址 | 第47-48页 |
| ·方法 | 第48-53页 |
| ·DNA 的提取与检测 | 第48页 |
| ·FABP3 基因多态性与脂肪沉积相关性状的关联分析 | 第48-50页 |
| ·候选基因的序列分析 | 第50页 |
| ·FABP3 基因的克隆 | 第50-52页 |
| ·Bfat-1 基因的克隆 | 第52-53页 |
| ·结果 | 第53-65页 |
| ·DNA 和 RNA 的提取结果 | 第53页 |
| ·FABP3 基因多态性分析 | 第53-55页 |
| ·FABP3 基因的克隆及序列分析 | 第55-60页 |
| ·Bfat-1 的克隆及序列分析 | 第60-65页 |
| ·讨论 | 第65-68页 |
| ·牛 FABP3 基因的 SNPs 筛查及关联分析 | 第65-66页 |
| ·Bfat-1 基因密码子优化设计 | 第66页 |
| ·生物信息学在核酸序列和蛋白质序列分析中的应用 | 第66-68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 第四章 FABP3 和 BFAT-1 的转基因功能研究 | 第69-87页 |
| ·材料 | 第69-71页 |
| ·试验动物 | 第69页 |
| ·主要试剂 | 第69-71页 |
| ·仪器设备 | 第71页 |
| ·方法 | 第71-76页 |
| ·质粒载体的构建 | 第71页 |
| ·小鼠尾静脉高压注射 | 第71-72页 |
| ·组织样品的采集 | 第72页 |
| ·转基因小鼠的制备 | 第72-73页 |
| ·转基因小鼠核酸水平的鉴定 | 第73页 |
| ·转基因小鼠活体水平的功能分析 | 第73-74页 |
| ·荧光定量 PCR 鉴定基因的表达水平 | 第74-75页 |
| ·Western Blot 检测重组蛋白的含量 | 第75页 |
| ·气相色谱法分析各组织样的脂肪酸含量 | 第75-76页 |
| ·结果 | 第76-85页 |
| ·FABP3、Bfat-1 基因表达载体的构建 | 第76-77页 |
| ·气相色谱条件的优化及标准曲线的绘制 | 第77-79页 |
| ·FABP3 转基因小鼠的生产及鉴定 | 第79-81页 |
| ·FABP3 转基因小鼠的功能分析 | 第81-83页 |
| ·Bfat-1 在小鼠体内的瞬时表达及功能分析 | 第83-85页 |
| ·讨论 | 第85-86页 |
| ·利用转基因鼠研究牛 FABP3 基因的功能 | 第85页 |
| ·小鼠尾静脉高压注射法研究 Bfat-1 基因的功能 | 第85-86页 |
| ·小结 | 第86-87页 |
| 第五章 FABP3 转基因牛细胞系的建立 | 第87-92页 |
| ·材料 | 第87页 |
| ·动物组织样 | 第87页 |
| ·菌种及质粒 | 第87页 |
| ·试剂及仪器设备 | 第87页 |
| ·主要生物学软件及常用网站 | 第87页 |
| ·方法 | 第87-89页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞的分离培养 | 第87页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞的性别鉴定 | 第87-88页 |
| ·FABP3 基因表达载体的构建 | 第88页 |
| ·细胞的转染及筛选 | 第88页 |
| ·阳性细胞的鉴定 | 第88-89页 |
| ·结果 | 第89-91页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞的分离培养及性别鉴定 | 第89页 |
| ·FABP3 基因转基因牛细胞系的鉴定 | 第89-91页 |
| ·讨论 | 第91页 |
| ·小结 | 第91-92页 |
| 第六章 全文结论 | 第92-93页 |
| ·主要结论 | 第92页 |
| ·创新点 | 第92页 |
| ·下一步工作 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-106页 |
| 附录 | 第106-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 作者简历 | 第111页 |
