| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-27页 |
| ·十字花科黑腐病菌概述 | 第11-12页 |
| ·十字花科黑腐病菌简介 | 第11页 |
| ·十字花科黑腐病菌致病因子及相关基因 | 第11-12页 |
| ·十字花科黑腐病菌致病相关调控基因 | 第12-17页 |
| ·Hrp/T3SS系统调控相关基因 | 第13-14页 |
| ·双组分调控系统与群体感应系统相关基因 | 第14-16页 |
| ·Xcc中其他致病相关调控基因和复杂的调控网络 | 第16-17页 |
| ·GGDEF结构域和XC0831研究进展 | 第17-21页 |
| ·GGDEF结构域蛋白研究进展 | 第17-18页 |
| ·XC0831研究进展 | 第18-19页 |
| ·Reg_prop结构域研究进展 | 第19-21页 |
| ·c-di-GMP生物学功能及其调控 | 第21-25页 |
| ·c-di-GMP代谢与代谢调控 | 第21-23页 |
| ·c-di-GMP下游靶标 | 第23-24页 |
| ·受c-di-GMP调控的细胞功能 | 第24-25页 |
| ·本研究的主要目的、内容和意义 | 第25-27页 |
| 第二章 材料方法 | 第27-43页 |
| ·实验材料 | 第27-33页 |
| ·菌株与质粒 | 第27-29页 |
| ·引物 | 第29-30页 |
| ·抗生素 | 第30-31页 |
| ·菌株培养及保藏 | 第31-32页 |
| ·常用试剂及缓冲液 | 第32-33页 |
| ·DNA分子操作技术 | 第33-39页 |
| ·Xcc总DNA提取 | 第33-34页 |
| ·质粒DNA提取(碱裂解法) | 第34页 |
| ·DNA纯化 | 第34页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第34-35页 |
| ·DNA酶切 | 第35页 |
| ·DNA连接 | 第35-36页 |
| ·PCR反应 | 第36-37页 |
| ·DNA转化 | 第37-38页 |
| ·三亲本结合 | 第38-39页 |
| ·突变体和互补株的生理生化检测 | 第39-41页 |
| ·胞外多糖(EPS)的检测 | 第39页 |
| ·胞外淀粉酶检测 | 第39页 |
| ·胞外纤维素酶检测 | 第39页 |
| ·胞外蛋白酶检测 | 第39-40页 |
| ·菌株运动能力检测 | 第40页 |
| ·生物膜检测实验 | 第40页 |
| ·菌株吸附能力检测 | 第40页 |
| ·絮凝检测实验 | 第40页 |
| ·基本培养基平板检测 | 第40-41页 |
| ·基本培养基中生长曲线测定 | 第41页 |
| ·植株实验 | 第41页 |
| ·致病力检测 | 第41页 |
| ·过敏反应实验 | 第41页 |
| ·β-葡糖苷酸酶(GUS)活性检测 | 第41-43页 |
| ·定性检测 | 第41页 |
| ·定量检测 | 第41-43页 |
| 第三章 XC0831及各功能区域功能研究 | 第43-72页 |
| ·XC0831基因的生物信息学分析 | 第43-47页 |
| ·XC0831基因的基本信息及编码产物的结构域分析 | 第43-44页 |
| ·非极性突变体NK0831的生物信息学分析 | 第44-45页 |
| ·Xcc8004中与XC0831结构域相似基因的结构域分析 | 第45-47页 |
| ·缺失突变体的构建 | 第47-51页 |
| ·重组质粒的构建与验证 | 第47-49页 |
| ·三亲结合实验及缺失突变体的筛选验证 | 第49-51页 |
| ·反式互补菌株及过量表达菌株的构建 | 第51-54页 |
| ·重组质粒的构建 | 第52-54页 |
| ·三亲结合实验及互补株的筛选验证 | 第54页 |
| ·不同结构域互补株的构建 | 第54-58页 |
| ·不同结构域互补重组质粒的构建 | 第54-57页 |
| ·三亲结合实验及结构域互补株的筛选验证 | 第57-58页 |
| ·突变体及互补株的表型检测与分析 | 第58-72页 |
| ·突变体及互补株在基本培养基上的生长情况检测 | 第58-60页 |
| ·突变体及互补株致病力和HR检测 | 第60-61页 |
| ·突变体及互补菌株胞外酶、EPS产量的平板检测 | 第61-65页 |
| ·突变体及互补菌株的运动能力检测 | 第65-67页 |
| ·突变体及互补菌株生物膜形成及吸附能力检测 | 第67-69页 |
| ·突变体及互补菌株絮凝检测 | 第69-72页 |
| 第四章 XC2252与XC0831调控关系研究 | 第72-80页 |
| ·引言 | 第72页 |
| ·XC2252对XC0831负调控作用的GUS报告基因验证 | 第72-75页 |
| ·XC0831 GUS报告子构建与导入 | 第72-74页 |
| ·GUS报告基因表达活性测定与分析 | 第74-75页 |
| ·双缺失突变体的构建及表型检测 | 第75-80页 |
| ·XC0831和XC2252双突变株构建 | 第75-77页 |
| ·双缺失突变菌株表型检测与分析 | 第77-80页 |
| 第五章 结论与讨论 | 第80-86页 |
| ·结论 | 第80-81页 |
| ·讨论 | 第81-84页 |
| ·NK0831与XC0831过量表达菌株表型相似 | 第81-82页 |
| ·XC0831与细胞内c-di-GMP水平关系 | 第82页 |
| ·XC0831不同结构域可能行使不同功能 | 第82-83页 |
| ·XC0831与vemR调控网络 | 第83-84页 |
| ·后续工作 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第97页 |
