| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-33页 |
| ·聚酮合酶 | 第17-18页 |
| ·聚酮合酶的分类 | 第18-19页 |
| ·I 型聚酮合酶 | 第18页 |
| ·II 型聚酮合酶 | 第18-19页 |
| ·Ⅲ 型聚酮合酶 | 第19页 |
| ·Ⅲ 型聚酮合酶反应机理 | 第19-21页 |
| ·细菌 Ⅲ 型聚酮合酶 | 第21-29页 |
| ·1,3,6,8-四羟基萘合成酶 | 第21-22页 |
| ·2, 4-二乙酰基间苯三酚合成酶 | 第22-23页 |
| ·(S)-3, 5-二羟基苯甘氨酸合成酶 | 第23-24页 |
| ·烷基间苯二酚合成酶 | 第24-26页 |
| ·烷基吡喃酮合成酶 | 第26-29页 |
| ·耐辐射异常球菌与 Ⅲ 型聚酮合酶 | 第29-31页 |
| ·立题依据及研究目的与意义 | 第31-32页 |
| ·研究路线 | 第32-33页 |
| 第二章 Δdrpks1 和Δdrpks2 突变株的构建与生理表型分析 | 第33-63页 |
| ·材料与方法 | 第33-47页 |
| ·菌株与质粒 | 第33页 |
| ·酶及试剂盒、培养基、抗生素与其他试剂溶液 | 第33-35页 |
| ·主要实验仪器 | 第35页 |
| ·细菌基因组 DNA 提取 | 第35-36页 |
| ·细菌质粒 DNA 提取 | 第36页 |
| ·DNA 的回收、纯化、酶切和连接反应 | 第36-38页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第38页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的热激转化 | 第38页 |
| ·耐辐射异常球菌的线性热激转化 | 第38-39页 |
| ·PCR 反应 | 第39-41页 |
| ·耐辐射异常球菌 RNA 的提取 | 第41页 |
| ·总 RNA 的 DNA 酶消化与反转录 | 第41-42页 |
| ·荧光实时定量 PCR 反应 | 第42-43页 |
| ·基因表达分析 | 第43页 |
| ·蛋白质氨基酸序列生物信息学分析 | 第43页 |
| ·30℃生长曲线的测定 | 第43-44页 |
| ·UV 辐照后菌株生存状况测定 | 第44页 |
| ·盐冲击后菌株生存状况测定 | 第44-45页 |
| ·山梨醇冲击后菌株生存状况测定 | 第45页 |
| ·过氧化氢冲击后菌株生存状况测定 | 第45页 |
| ·乙醇冲击后菌株生存状况测定 | 第45-46页 |
| ·次级代谢产物的变化测定 | 第46-47页 |
| ·实验结果分析 | 第47-58页 |
| ·生物信息学分析 | 第47-51页 |
| ·Δdrpks1 和Δdrpks2 突变株及双突变株的构建 | 第51-53页 |
| ·Δdrpks1 和Δdrpks2 单突变株与Δdrpks1-Δdrpks2 双突变株的验证 | 第53-55页 |
| ·基因表达验证 | 第55-56页 |
| ·各突变株生长的差异 | 第56-57页 |
| ·各种逆境胁迫冲击的结果 | 第57页 |
| ·次级代谢产物的变化 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-62页 |
| ·DrPKS1 与 DrPKS2 结构与功能分析 | 第58-61页 |
| ·耐辐射异常球菌 Ⅲ 型聚酮合酶与抗逆的关系 | 第61-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 第三章 DrPKS1 和 DrPKS2 大肠杆菌表达菌株的构建与生理表型分析 | 第63-80页 |
| ·材料和方法 | 第63-70页 |
| ·菌株与质粒 | 第63-64页 |
| ·酶及试剂盒、培养基、抗生素与其他试剂溶液 | 第64-65页 |
| ·主要实验仪器 | 第65页 |
| ·细菌基因组 DNA 的提取 | 第65页 |
| ·质粒 DNA 提取 | 第65页 |
| ·DNA 回收，纯化，连接和酶切反应 | 第65页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第65页 |
| ·大肠杆菌的热激转化 | 第65页 |
| ·PCR 反应 | 第65-66页 |
| ·蛋白表达纯化 | 第66-67页 |
| ·蛋白表达菌株次级代谢产物的测定 | 第67页 |
| ·UV 辐照后蛋白表达菌株的生长状况测定 | 第67-68页 |
| ·盐冲击后蛋白表达菌株的生长状况测定 | 第68页 |
| ·山梨醇冲击后蛋白表达菌株的生长状况测定 | 第68-69页 |
| ·过氧化氢冲击后蛋白表达菌株的生长状况测定 | 第69页 |
| ·乙醇冲击后蛋白表达菌株的生长状况测定 | 第69-70页 |
| ·实验结果分析 | 第70-77页 |
| ·大肠杆菌蛋白表达菌株的构建 | 第70-74页 |
| ·大肠杆菌蛋白表达菌株的验证 | 第74页 |
| ·蛋白的表达与纯化结果 | 第74-75页 |
| ·对 DrPKS1 和 DrPKS2 大肠杆菌表达菌株的 HPLC 分析 | 第75-76页 |
| ·各种冲击试验结果 | 第76-77页 |
| ·讨论 | 第77-78页 |
| ·本章小结 | 第78-80页 |
| 第四章 全文结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 作者简介 | 第91页 |
