流行性乙型脑炎病毒prM蛋白furin蛋白酶剪切位点突变分析及稳定表达细胞系的构建
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 图目录 | 第11-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-21页 |
| ·JEV 分子生物学特性 | 第13-16页 |
| ·JEV 的物理特性以及基因组结构 | 第13页 |
| ·JEV 结构蛋白的功能与特点 | 第13-14页 |
| ·JEV 病毒粒子的装配和释放 | 第14-15页 |
| ·JEV 致病机理 | 第15页 |
| ·JEV 免疫学特性 | 第15-16页 |
| ·JEV 流行病学及防控 | 第16-19页 |
| ·JEV 流行病学及危害 | 第16-17页 |
| ·JEV 的诊断方法 | 第17-18页 |
| ·JE 治疗和疫苗的研究 | 第18-19页 |
| ·研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 稳定表达细胞系的构建 | 第21-37页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·质粒、细胞及菌种 | 第21页 |
| ·主要试剂、材料 | 第21页 |
| ·主要实验仪器 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-29页 |
| ·prM 蛋白 furin 蛋白酶切位点突变 | 第22-23页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第23页 |
| ·PCR 产物与表达载体的双酶切和连接 | 第23-24页 |
| ·转化 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定与测序验证 | 第25页 |
| ·转染质粒的制备 | 第25页 |
| ·G418 工作浓度的确定 | 第25-26页 |
| ·转染 | 第26页 |
| ·转染细胞的筛选与克隆纯化 | 第26页 |
| ·间接免疫荧光实验(IFA)鉴定 | 第26-27页 |
| ·Western blot 鉴定 | 第27页 |
| ·病毒样颗粒(VLPs)的收集提纯 | 第27页 |
| ·免疫和攻毒 | 第27-28页 |
| ·血清病毒中和抗体效价的测定 | 第28-29页 |
| ·实验结果 | 第29-37页 |
| ·PCR 扩增 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第30页 |
| ·G418 工作浓度的确定 | 第30页 |
| ·细胞转染与 IFA 鉴定检测 | 第30-31页 |
| ·转染细胞的克隆筛选与 IFA 鉴定 | 第31-32页 |
| ·表达蛋白的 Western blot 鉴定 | 第32-33页 |
| ·表达 VLP 的电镜观察 | 第33-34页 |
| ·中和抗体效价及免疫保护力 | 第34-37页 |
| 第三章 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 全文结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 作者简介 | 第47页 |
