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日本血吸虫锌指蛋白编码基因SjZFP1的RNA干涉研究

摘要第1-8页
Abstract第8-15页
第一章 引言第15-25页
   ·血吸虫病的概述第15页
   ·日本血吸虫疫苗研究进展第15-17页
     ·副肌球蛋白(paramyosin)第16页
     ·谷胱甘肽S转移酶(glutathione-S-transferase,GST)第16页
     ·钙离子激活蛋白激酶2第16页
     ·磷酸丙糖异构酶(triose-phosphateisomerase,TPI)第16页
     ·膜蛋白第16页
     ·丝氨酸蛋白酶抑制剂第16-17页
     ·线粒体相关蛋白第17页
     ·硫氧还原蛋白第17页
     ·抱雌沟蛋白第17页
   ·锌指蛋白研究进展第17-20页
     ·锌指蛋白概述第17-19页
     ·PHD型ZnF的概述第19-20页
   ·RNA干涉(RNAi)技术在血吸虫中的研究进展第20-22页
     ·RNAi的概念第20-21页
     ·RNAi的作用机制第21页
     ·RNAi应用于血吸虫的理论基础第21页
     ·RNA干涉(RNAi)技术在血吸虫中的应用第21-22页
   ·基因芯片技术第22-23页
     ·基因芯片技术的原理第22页
     ·基因芯片技术的基本步骤第22页
     ·基因芯片技术的应用第22-23页
   ·本研究的目的第23-25页
第二章 SjZFP1基因在日本血吸虫各期虫体中的mRNA表达分析第25-30页
   ·引言第25页
   ·实验材料第25页
     ·生物材料第25页
     ·生化材料第25页
   ·实验方法第25-27页
     ·日本血吸虫虫体及虫卵的收集第25页
     ·各期虫体总RNA的提取第25-26页
     ·反转录第26页
     ·引物的合成第26-27页
     ·标准品的制备第27页
     ·实时定量PCR反应体系第27页
     ·实时定量PCR反应程序第27页
   ·实验结果第27-28页
   ·讨论第28-30页
第三章 日本血吸虫SjZFP1基因的RNA干涉第30-46页
   ·引言第30页
   ·实验材料第30页
     ·生物材料第30页
     ·生化材料第30页
   ·实验方法第30-34页
     ·siRNA分子的设计合成第30-31页
     ·童虫培养基的配制第31页
     ·干涉SjZFP1基因表达的siRNAs的筛选第31-32页
     ·小鼠体内日本血吸虫RNAi第32-34页
     ·基因芯片技术分析体内干扰后虫体的基因表达第34页
   ·结果第34-43页
     ·siRNAs的体外筛选第34-35页
     ·动物体内血吸虫的SjZFP1基因RNA干涉第35-39页
     ·体内RNA干涉后虫体基因表达芯片分析第39-43页
   ·讨论第43-46页
第四章 重组日本血吸虫锌指蛋白rSjZFP1-1的免疫保护性分析第46-56页
   ·引言第46页
   ·实验材料第46-47页
     ·生物材料第46页
     ·生化材料第46-47页
   ·实验方法第47-50页
     ·血吸虫虫体收集第47页
     ·日本血吸虫总RNA的提取第47页
     ·反转录第47页
     ·pcDNA-SjZFP1-1重组质粒的构建第47-48页
     ·pET28-SjZFP1-1原核重组质粒的构建及表达第48-49页
     ·动物实验第49-50页
   ·实验结果第50-54页
     ·PCR扩增编码SjZFP1cDNA序列第50页
     ·重组真核表达质粒pcDNA-SjZFP1-1的双酶切验证第50-51页
     ·重组蛋白rSjZFP1-1/His表达实相的分析第51-52页
     ·重组蛋白的纯化第52页
     ·动物实验第52-54页
   ·讨论第54-56页
第五章 全文总结第56-57页
参考文献第57-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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