摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-15页 |
第一章 引言 | 第15-25页 |
·血吸虫病的概述 | 第15页 |
·日本血吸虫疫苗研究进展 | 第15-17页 |
·副肌球蛋白(paramyosin) | 第16页 |
·谷胱甘肽S转移酶(glutathione-S-transferase,GST) | 第16页 |
·钙离子激活蛋白激酶2 | 第16页 |
·磷酸丙糖异构酶(triose-phosphateisomerase,TPI) | 第16页 |
·膜蛋白 | 第16页 |
·丝氨酸蛋白酶抑制剂 | 第16-17页 |
·线粒体相关蛋白 | 第17页 |
·硫氧还原蛋白 | 第17页 |
·抱雌沟蛋白 | 第17页 |
·锌指蛋白研究进展 | 第17-20页 |
·锌指蛋白概述 | 第17-19页 |
·PHD型ZnF的概述 | 第19-20页 |
·RNA干涉(RNAi)技术在血吸虫中的研究进展 | 第20-22页 |
·RNAi的概念 | 第20-21页 |
·RNAi的作用机制 | 第21页 |
·RNAi应用于血吸虫的理论基础 | 第21页 |
·RNA干涉(RNAi)技术在血吸虫中的应用 | 第21-22页 |
·基因芯片技术 | 第22-23页 |
·基因芯片技术的原理 | 第22页 |
·基因芯片技术的基本步骤 | 第22页 |
·基因芯片技术的应用 | 第22-23页 |
·本研究的目的 | 第23-25页 |
第二章 SjZFP1基因在日本血吸虫各期虫体中的mRNA表达分析 | 第25-30页 |
·引言 | 第25页 |
·实验材料 | 第25页 |
·生物材料 | 第25页 |
·生化材料 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-27页 |
·日本血吸虫虫体及虫卵的收集 | 第25页 |
·各期虫体总RNA的提取 | 第25-26页 |
·反转录 | 第26页 |
·引物的合成 | 第26-27页 |
·标准品的制备 | 第27页 |
·实时定量PCR反应体系 | 第27页 |
·实时定量PCR反应程序 | 第27页 |
·实验结果 | 第27-28页 |
·讨论 | 第28-30页 |
第三章 日本血吸虫SjZFP1基因的RNA干涉 | 第30-46页 |
·引言 | 第30页 |
·实验材料 | 第30页 |
·生物材料 | 第30页 |
·生化材料 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-34页 |
·siRNA分子的设计合成 | 第30-31页 |
·童虫培养基的配制 | 第31页 |
·干涉SjZFP1基因表达的siRNAs的筛选 | 第31-32页 |
·小鼠体内日本血吸虫RNAi | 第32-34页 |
·基因芯片技术分析体内干扰后虫体的基因表达 | 第34页 |
·结果 | 第34-43页 |
·siRNAs的体外筛选 | 第34-35页 |
·动物体内血吸虫的SjZFP1基因RNA干涉 | 第35-39页 |
·体内RNA干涉后虫体基因表达芯片分析 | 第39-43页 |
·讨论 | 第43-46页 |
第四章 重组日本血吸虫锌指蛋白rSjZFP1-1的免疫保护性分析 | 第46-56页 |
·引言 | 第46页 |
·实验材料 | 第46-47页 |
·生物材料 | 第46页 |
·生化材料 | 第46-47页 |
·实验方法 | 第47-50页 |
·血吸虫虫体收集 | 第47页 |
·日本血吸虫总RNA的提取 | 第47页 |
·反转录 | 第47页 |
·pcDNA-SjZFP1-1重组质粒的构建 | 第47-48页 |
·pET28-SjZFP1-1原核重组质粒的构建及表达 | 第48-49页 |
·动物实验 | 第49-50页 |
·实验结果 | 第50-54页 |
·PCR扩增编码SjZFP1cDNA序列 | 第50页 |
·重组真核表达质粒pcDNA-SjZFP1-1的双酶切验证 | 第50-51页 |
·重组蛋白rSjZFP1-1/His表达实相的分析 | 第51-52页 |
·重组蛋白的纯化 | 第52页 |
·动物实验 | 第52-54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
第五章 全文总结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简介 | 第64页 |