摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
目录 | 第8-11页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 概述 | 第12-20页 |
·新城疫病毒简介 | 第12-13页 |
·双链 RNA 激活的蛋白激酶(PKR) | 第13-20页 |
·PKR 的结构 | 第13-14页 |
·PKR 的细胞定位 | 第14页 |
·PKR 的 eIF2α激酶活性 | 第14-15页 |
·PKR 的抗病毒作用 | 第15-17页 |
·病毒调节 PKR 活性 | 第17-20页 |
第二章 NDV 感染对细胞 PKR-eIF2α的作用 | 第20-28页 |
·材料 | 第20页 |
·毒株和细胞 | 第20页 |
·抗体与试剂 | 第20页 |
·主要仪器 | 第20页 |
·试验方法 | 第20-22页 |
·Poly(I:C)处理 | 第20页 |
·病毒紫外灭活 | 第20页 |
·病毒感染 | 第20-21页 |
·细胞样品的收集 | 第21页 |
·蛋白免疫印迹(Western blot) | 第21页 |
·间接免疫荧光(IFA) | 第21-22页 |
·实验结果 | 第22-26页 |
·NDV 感染能激活 PKR-eIF2α通路 | 第22页 |
·NDV 通过复制产生的 dsRNA 激活 PKR-eIF2α通路 | 第22-24页 |
·NDV 剂量依赖性的激活 PKR-eIF2α | 第24-26页 |
·讨论 | 第26-28页 |
第三章 PKR-eIF2α在抗 NDV 感染中的作用 | 第28-41页 |
·材料 | 第28页 |
·病毒和菌株 | 第28页 |
·载体和分子生物学试剂 | 第28页 |
·主要仪器 | 第28页 |
·试验方法 | 第28-31页 |
·PKR 真核表达质粒的构建 | 第28-29页 |
·针对 PKR 及 eIF2α有效 siRNA 的筛选 | 第29-30页 |
·PKR 对 NDV 复制的影响 | 第30-31页 |
·eIF2α对 NDV 复制的影响 | 第31页 |
·结果 | 第31-38页 |
·pkr 基因扩增及真核表达质粒的构建 | 第31-32页 |
·针对 PKR 和 eIF2α的 siRNA 筛选 | 第32页 |
·PKR 过表达对 NDV 复制的影响 | 第32-34页 |
·靶向干扰 PKR 对 NDV 复制的影响 | 第34-36页 |
·靶向干扰 eIF2α对 NDV 复制的影响 | 第36-37页 |
·药物抑制 eIF2α去磷酸化对 NDV 复制的影响 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-41页 |
第四章 PKR 在 NDV 诱导干扰素中的作用 | 第41-47页 |
·材料 | 第41页 |
·病毒和菌株 | 第41页 |
·载体和分子生物学试剂 | 第41页 |
·主要仪器 | 第41页 |
·方法 | 第41-43页 |
·NDV 病毒感染 HeLa 细胞 | 第41页 |
·siRNA 转染 | 第41-42页 |
·Trizol 法提取细胞 RNA 及反转录 | 第42页 |
·Real-time PCR | 第42-43页 |
·结果 | 第43-46页 |
·RNA 干扰效果的检测 | 第43页 |
·Real-time PCR 引物的筛选与优化 | 第43-44页 |
·NDV 感染 HeLa 细胞后 IFN 检测 | 第44-45页 |
·NDV 感染 PKR knockdown HeLa 细胞 IFN-β水平 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
第五章 全文小结 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
作者简历 | 第55页 |