摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-30页 |
·逆境胁迫对植物的影响 | 第15-18页 |
·逆境条件下植物会发生一系列的生理变化 | 第15-16页 |
·逆境条件对植物ROS代谢的影响 | 第16-17页 |
·ROS与低温伤害 | 第16-17页 |
·ROS与干旱伤害 | 第17页 |
·逆境胁迫与膜脂过氧化 | 第17-18页 |
·植物交替氧化酶 | 第18-28页 |
·植物AOX的结构及其活性 | 第20-22页 |
·植物AOX的基因表达调控 | 第22页 |
·植物AOX的功能 | 第22-26页 |
·开花过程中产热 | 第22-23页 |
·维持代谢平衡 | 第23页 |
·抑制ROS产生 | 第23页 |
·增强植物抗逆能力 | 第23-24页 |
·可能参与抗病信号转导 | 第24-25页 |
·抑制细胞凋亡 | 第25页 |
·AOX对光合作用的影响 | 第25-26页 |
·转基因技术在交替氧化酶研究中的应用 | 第26-27页 |
·植物AOX的研究进展 | 第27-28页 |
·研究目的与意义 | 第28-30页 |
第二章 水稻AOX1基因家族逆境胁迫下表达差异性研究 | 第30-40页 |
·材料与方法 | 第30-33页 |
·材料 | 第31页 |
·实验材料 | 第31页 |
·培养基与试剂 | 第31页 |
·方法 | 第31-33页 |
·材料的种植及其处理方法 | 第31页 |
·总RNA的提取 | 第31-32页 |
·cDNA反转录 | 第32-33页 |
·Quantitative real-time PCR分析OsAOX1a、OsAOX1b、OsAOX1c表达水平 | 第33页 |
·结果与讨论 | 第33-40页 |
·基因进化与生物信息学分析 | 第33-35页 |
·OsAOXla、OsAOX1b和OsAOX1e基因对各种逆境胁迫的响应 | 第35-38页 |
·OsAOX1a、OsAOXlb基因对不同氧化药物胁迫的响应 | 第38-40页 |
第三章 水稻AOX1基因克隆、超表达载体构建及转基因植株鉴定 | 第40-55页 |
·材料与方法 | 第40-51页 |
·材料 | 第40-42页 |
·植物材料 | 第40页 |
·菌株及质粒 | 第40页 |
·培养基 | 第40-41页 |
·试剂与药品 | 第41-42页 |
·试验方法 | 第42-51页 |
·总RNA的提取 | 第42页 |
·加ployA及连接T载体 | 第42页 |
·基因克隆 | 第42-44页 |
·转化 | 第44页 |
·质粒小量提取的方法 | 第44-45页 |
·AXYGEN胶回收试剂盒 | 第45页 |
·对克隆载体的酶切鉴定 | 第45-46页 |
·过表达载体构建 | 第46-47页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第47页 |
·超表达载体转化根癌农杆菌EHA105 | 第47-48页 |
·水稻遗传转化 | 第48-49页 |
·PCR鉴定转基因植株 | 第49页 |
·叶片总蛋白质的提取和western blot杂交 | 第49-51页 |
·结果与分析 | 第51-55页 |
·基因的克隆 | 第51-52页 |
·超表达载体的构建 | 第52-53页 |
·T_0代转基因植株的PCR鉴定 | 第53-55页 |
第四章 水稻AOX1逆境下功能的初步鉴定 | 第55-65页 |
·材料与方法 | 第55-57页 |
·材料 | 第55-56页 |
·试验材料 | 第55页 |
·试剂与器材 | 第55-56页 |
·培养基 | 第56页 |
·试验方法 | 第56-57页 |
·材料的种植及处理方法 | 第56页 |
·植株基因组DNA提取 | 第56-57页 |
·结果与讨论 | 第57-65页 |
·转基因植株表达量鉴定 | 第57-58页 |
·T_2代转基因植株的PCR鉴定 | 第58-59页 |
·T_2代转基因植株的western blot鉴定 | 第59-60页 |
·转基因植株在T_2代的功能验证分析 | 第60-65页 |
·抗冷分析 | 第60-63页 |
·抗旱分析 | 第63-65页 |
第五章 逆境下转基因植株生理指标的测定 | 第65-70页 |
·材料与方法 | 第65-67页 |
·材料 | 第65-66页 |
·实验材料 | 第65页 |
·仪器设备 | 第65页 |
·试剂 | 第65-66页 |
·试验方法 | 第66-67页 |
·电导率测定 | 第66页 |
·丙二醛(MDA)测定 | 第66-67页 |
·结果与讨论 | 第67-70页 |
·转基因植株冷胁迫下的电导率 | 第67-68页 |
·转基因植株冷胁迫下MDA测定 | 第68-70页 |
全文结论与展望 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-82页 |
附录 本研究相关的基因序列 | 第82-85页 |
图表清单 | 第85-86页 |
致谢 | 第86-88页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第88页 |