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水稻AOX1基因家族成员逆境下的表达分析及功能鉴定

摘要第1-6页
Abstract第6-15页
第一章 文献综述第15-30页
   ·逆境胁迫对植物的影响第15-18页
     ·逆境条件下植物会发生一系列的生理变化第15-16页
     ·逆境条件对植物ROS代谢的影响第16-17页
       ·ROS与低温伤害第16-17页
       ·ROS与干旱伤害第17页
     ·逆境胁迫与膜脂过氧化第17-18页
   ·植物交替氧化酶第18-28页
     ·植物AOX的结构及其活性第20-22页
     ·植物AOX的基因表达调控第22页
     ·植物AOX的功能第22-26页
       ·开花过程中产热第22-23页
       ·维持代谢平衡第23页
       ·抑制ROS产生第23页
       ·增强植物抗逆能力第23-24页
       ·可能参与抗病信号转导第24-25页
       ·抑制细胞凋亡第25页
       ·AOX对光合作用的影响第25-26页
     ·转基因技术在交替氧化酶研究中的应用第26-27页
     ·植物AOX的研究进展第27-28页
   ·研究目的与意义第28-30页
第二章 水稻AOX1基因家族逆境胁迫下表达差异性研究第30-40页
   ·材料与方法第30-33页
     ·材料第31页
       ·实验材料第31页
       ·培养基与试剂第31页
     ·方法第31-33页
       ·材料的种植及其处理方法第31页
       ·总RNA的提取第31-32页
       ·cDNA反转录第32-33页
       ·Quantitative real-time PCR分析OsAOX1a、OsAOX1b、OsAOX1c表达水平第33页
   ·结果与讨论第33-40页
     ·基因进化与生物信息学分析第33-35页
     ·OsAOXla、OsAOX1b和OsAOX1e基因对各种逆境胁迫的响应第35-38页
     ·OsAOX1a、OsAOXlb基因对不同氧化药物胁迫的响应第38-40页
第三章 水稻AOX1基因克隆、超表达载体构建及转基因植株鉴定第40-55页
   ·材料与方法第40-51页
     ·材料第40-42页
       ·植物材料第40页
       ·菌株及质粒第40页
       ·培养基第40-41页
       ·试剂与药品第41-42页
     ·试验方法第42-51页
       ·总RNA的提取第42页
       ·加ployA及连接T载体第42页
       ·基因克隆第42-44页
       ·转化第44页
       ·质粒小量提取的方法第44-45页
       ·AXYGEN胶回收试剂盒第45页
       ·对克隆载体的酶切鉴定第45-46页
       ·过表达载体构建第46-47页
       ·农杆菌感受态细胞的制备第47页
       ·超表达载体转化根癌农杆菌EHA105第47-48页
       ·水稻遗传转化第48-49页
       ·PCR鉴定转基因植株第49页
       ·叶片总蛋白质的提取和western blot杂交第49-51页
   ·结果与分析第51-55页
     ·基因的克隆第51-52页
     ·超表达载体的构建第52-53页
     ·T_0代转基因植株的PCR鉴定第53-55页
第四章 水稻AOX1逆境下功能的初步鉴定第55-65页
   ·材料与方法第55-57页
     ·材料第55-56页
       ·试验材料第55页
       ·试剂与器材第55-56页
       ·培养基第56页
     ·试验方法第56-57页
       ·材料的种植及处理方法第56页
       ·植株基因组DNA提取第56-57页
   ·结果与讨论第57-65页
     ·转基因植株表达量鉴定第57-58页
     ·T_2代转基因植株的PCR鉴定第58-59页
     ·T_2代转基因植株的western blot鉴定第59-60页
     ·转基因植株在T_2代的功能验证分析第60-65页
       ·抗冷分析第60-63页
       ·抗旱分析第63-65页
第五章 逆境下转基因植株生理指标的测定第65-70页
   ·材料与方法第65-67页
     ·材料第65-66页
       ·实验材料第65页
       ·仪器设备第65页
       ·试剂第65-66页
     ·试验方法第66-67页
       ·电导率测定第66页
       ·丙二醛(MDA)测定第66-67页
   ·结果与讨论第67-70页
     ·转基因植株冷胁迫下的电导率第67-68页
     ·转基因植株冷胁迫下MDA测定第68-70页
全文结论与展望第70-72页
参考文献第72-82页
附录 本研究相关的基因序列第82-85页
图表清单第85-86页
致谢第86-88页
攻读学位期间发表的学术论文目录第88页

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