中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
1 引言 | 第13-15页 |
2 材料和方法 | 第15-32页 |
·材料来源 | 第15页 |
·小分子化合物 | 第15页 |
·细胞系来源 | 第15页 |
·主要试剂 | 第15-16页 |
·仪器设备 | 第16-17页 |
·主要试剂配制 | 第17-18页 |
·实验方法 | 第18-32页 |
·MAdCAM-1-Fc蛋白表达稳转株的构建和蛋白纯化 | 第18-22页 |
·药物筛选步骤 | 第22-24页 |
·药物IC50测定 | 第24页 |
·Western blotting | 第24-25页 |
·Flow chamber assay | 第25-27页 |
·原理 | 第25-26页 |
·具体操作步骤 | 第26-27页 |
·Western blotting检测离子霉素对FAK和Paxilin的影响 | 第27-29页 |
·原理 | 第28页 |
·实验操作步骤 | 第28-29页 |
·免疫共沉淀(Co-IP)检测Talin-α 4β7相互作用 | 第29-32页 |
·原理 | 第29页 |
·Talin-α4β7的免疫共沉淀 | 第29-30页 |
·免疫共沉淀结果判断 | 第30-32页 |
3 结果 | 第32-39页 |
·表达MAdCAM-1蛋白的293T稳转株细胞构建和蛋白纯化 | 第32-34页 |
·载体构建 | 第32-33页 |
·蛋白鉴定和纯化 | 第33-34页 |
·药物筛选 | 第34-35页 |
·药物IC50的测定 | 第35页 |
·Flow chamber assay对五种药物作用的验证 | 第35-37页 |
·离子霉素影响FAK和Paxilin的磷酸化 | 第37-38页 |
·免疫共沉淀证明离子霉素可以影响Talin和α4β7的相互作用 | 第38-39页 |
4 讨论 | 第39-43页 |
·离子霉素在细胞黏附实验和Flow Chamber Assay中都表现出抑制作用 | 第39-40页 |
·离子霉素可以影响FAK和Paxillin磷酸化 | 第40-41页 |
·离子霉素通过Talin干扰α4β7与MAdCAM-1的结合 | 第41-43页 |
5 结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-47页 |
综述 | 第47-65页 |
参考文献 | 第59-65页 |
中英文缩略词表 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
个人简历 | 第67页 |