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典型海洋环境中浮游细菌多样性及环境适应机制的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-19页
第一部分 综述与论文设计第19-46页
 第一章 前言第20-46页
   ·海洋异养细菌丰富的遗传多样性第20-28页
     ·异养细菌第20-23页
     ·好氧不产氧光合异养细菌(AAPB)第23-25页
     ·含视紫质(Proteorhodopsin,PR)变形细菌第25-26页
     ·浮游古菌(Planktonic Archaea)第26-28页
   ·海洋微型生物多样性研究近二十年的主要进展第28-41页
     ·浮游细菌第28-33页
     ·AAPB第33-34页
     ·含视紫质细菌第34-35页
     ·浮游古菌第35-38页
     ·环境基因组学第38-39页
     ·新的开拓性研究方法第39-41页
   ·本论文的设计与研究意义第41-46页
第二部分 典型浮游细菌类群在中国典型海域的多样性第46-89页
 第二章 浮游Cytophaga-Flavobacteria类群在东海的多样性第48-62页
   ·研究背景第49-50页
   ·材料和方法第50-53页
     ·采样和环境参数的测定第50-51页
     ·16S rRNA基因克隆文库的构建第51-53页
     ·测序和系统发育分析第53页
   ·结果第53-57页
     ·东海CF类群16S rRNA基因序列的总体分析第53-54页
     ·CF亚群在长江口和东海的多样性第54-57页
   ·讨论第57-61页
     ·长江口与东海CF的多样性分布模式第57-59页
     ·CF亚群的来源环境分析第59-61页
   ·小结第61-62页
 第三章 浮游古菌在长江口的多样性第62-76页
   ·研究背景第63页
   ·材料和方法第63-67页
     ·采样和环境参数的测定第64页
     ·DNA提取和克隆文库构建第64页
     ·选择用于PCR-RFLP分析的内切酶第64-66页
     ·克隆文库的PCR-RFLP筛选和数据统计分析第66页
     ·测序与系统发育分析第66-67页
   ·结果第67-73页
     ·采样站位的环境参数第67页
     ·PCR-RFLP筛选克隆文库的限制性内切酶的确定第67-68页
     ·克隆文库的PCR-RFLP筛选和带型的统计分析第68-72页
     ·古菌16S rRNA基因序列的系统发育分析第72页
     ·古菌16S rRNA基因序列的同源性分析第72-73页
   ·讨论第73-76页
 第四章 具有固碳能力的浮游变形细菌在东海的多样性第76-89页
   ·研究背景第77-78页
   ·材料和方法第78-81页
     ·样品采样和站位环境参数第78-79页
     ·引物设计第79-80页
     ·克隆文库构建第80页
     ·DGGE筛选克隆子第80-81页
     ·测序与系统发育分析第81页
   ·结果第81-87页
     ·引物设计和最佳PCR扩增条件的确立第81-82页
     ·Ⅰ型和Ⅱ型rbcL基因克隆文库的构建和分析第82页
     ·rbcL氨基酸序列的系统发育分析第82-86页
     ·rbcL氨基酸序列的保守位点分析第86-87页
   ·讨论第87-89页
     ·引物设计和克隆文库的筛选方法第87页
     ·多样性分析及其与环境因子之间的关系第87-89页
第三部分 典型功能细菌类群AAPB在全球海洋的多样性第89-130页
 第五章 全球表层海洋AAPB多样性的分布模式第89-97页
   ·研究背景第90页
   ·材料和方法第90-92页
   ·结果与讨论第92-96页
   ·小结第96-97页
 第六章 AAPB在大洋表层和弱光层上层水体中的多样性第97-119页
   ·研究背景第98-99页
   ·材料和方法第99-103页
     ·采样站位和环境参数第99页
     ·样品采集和群落DNA提取第99-101页
     ·AAPB多样性分析的目标基因和引物第101页
     ·PCR扩增目标基因片段以及克隆文库分析第101页
     ·测序与系统发育分析第101-102页
     ·统计分析第102-103页
   ·结果第103-107页
     ·采样情况与环境参数第103页
     ·pufM克隆文库分析第103-104页
     ·序列统计分析第104-106页
     ·AAPB多样性模式第106-107页
   ·讨论第107-117页
     ·AAPB多样性的研究方法第110-113页
     ·全球海洋AAPB生物地理分布的新认识第113-116页
     ·弱光层AAPB的适应和进化启示第116-117页
   ·小结第117-119页
 第七章 不产氧光合细菌与环境的协同进化关系研究第119-130页
   ·研究背景第120-121页
   ·材料和方法第121-124页
     ·收集APB菌株的pufM序列和来源环境信息第121-124页
     ·pufM序列的系统发育分析第124页
   ·结果与讨论第124-130页
     ·pufM系统发育树的构建与分析第124-127页
     ·pufM系统发育和来源环境之间的关系分析第127-130页
第四部分 海洋可培养的有色异养细菌的多样性研究第130-149页
 第八章 中国海及邻近大洋海域可培养有色异养细菌的多样性分布和生理特征第131-149页
   ·研究背景第132-133页
   ·材料和方法第133-135页
     ·采样站位第133页
     ·总异养细菌计数第133页
     ·CFU和PHB计数第133页
     ·16S rRNA基因的测序与系统发育分析第133-135页
     ·丙酮-甲醇提取物的色素分析第135页
   ·结果第135-144页
     ·CFU和PHB的空间分布第135-136页
     ·总细菌数、CFU和PHB的垂直剖面第136-138页
     ·16S rRNA基因序列分析第138-144页
     ·色素吸收光谱分析第144页
   ·讨论第144-149页
     ·海洋中PHB的丰度分布第144-145页
     ·PHB的遗传多样性第145-149页
第五部分 方法学研究第149-169页
 第九章 基于pufM序列距离的聚类方法评估不产氧光合细菌的多样性第150-163页
   ·研究背景第151页
   ·材料和方法第151-153页
     ·pufM序列的收集第151-152页
     ·pufM序列的距离聚类方法第152-153页
   ·结果第153-158页
     ·纯培养pufM序列分析及cutoff值的确定第153-158页
     ·直接来源于环境的pufM序列的分析第158页
     ·pufM序列在Culture和EnvClone两种类群间的距离第158页
   ·讨论第158-163页
     ·评估基于序列距离的聚类方法和cutoff值第158-161页
     ·自然界中APB的多样性第161-163页
 第十章 结合脉冲场电泳与PCR扩增的方法估算细菌基因组中16S rRNA基因的拷贝数第163-169页
   ·研究背景第164页
   ·材料和方法第164-165页
   ·结果和讨论第165-167页
   ·小结第167-169页
第六部分 本论文的主要结论和创新点第169-172页
 一、主要结论第170-171页
 二、创新点第171-172页
参考文献第172-194页
附录1 缩写列表第194-195页
附录2 本论文的技术路线示意图第195-196页
附录3 常用分子生物学软件、程序及使用方法第196-205页
附录4 博士期间参予课题和论文发表情况第205-208页
致谢第208页

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