摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-15页 |
前言 | 第15-19页 |
第一章 日本血吸虫(中国大陆株)成虫DNA基因组文库及抑制消减杂交文库构建 | 第19-44页 |
1 材料 | 第19-22页 |
·日本血吸虫成虫的获取 | 第19页 |
·菌株和载体 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19-20页 |
·PCR引物 | 第20-21页 |
·主要仪器 | 第21页 |
·溶液及培养基的配制 | 第21-22页 |
2 方法 | 第22-36页 |
·日本血吸虫基因组 DNA文库的构建 | 第22-25页 |
·抑制性消减杂交文库的构建 | 第25-34页 |
·载体的连接及转化 | 第34-36页 |
3 结果 | 第36-41页 |
·日本血吸虫基因组 DNA文库的构建 | 第36-37页 |
·基因组 DNA的酶切 | 第37-38页 |
·日本血吸虫成虫总 RNA的提取及mRNA的分离 | 第38-39页 |
·抑制消减杂交文库构建及质量检测 | 第39-41页 |
4 讨论 | 第41-43页 |
5 小结 | 第43-44页 |
第二章 斑点杂交筛选雌虫特异基因及克隆测序 | 第44-64页 |
1 材料 | 第44-45页 |
·实验材料 | 第44页 |
·RCR引物 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44页 |
·主要仪器 | 第44页 |
·溶液及培养基配制 | 第44-45页 |
2 方法 | 第45-50页 |
·日本血吸虫基因组 DNA的提取、纯化 | 第45-46页 |
·斑点杂交筛选雌虫特异性表达基因 | 第46-50页 |
·生物信息学分析 | 第50页 |
·目标基因在日本血吸虫体内的表达 | 第50页 |
3 结果 | 第50-61页 |
·标记探针效率的检测 | 第50-52页 |
·斑点杂交及生物信息学分析 | 第52-54页 |
·目标基因在虫体内的表达验证及同源性比对 | 第54-61页 |
4 讨论 | 第61-63页 |
5 小结 | 第63-64页 |
第三章 日本血吸虫排泄-分泌抗原的筛选 | 第64-75页 |
1 材料 | 第64-65页 |
·实验动物 | 第64页 |
·实验材料 | 第64页 |
·主要试剂 | 第64页 |
·溶液及培养基配制 | 第64-65页 |
·主要仪器 | 第65页 |
2 方法 | 第65-68页 |
·日本血吸虫排泄-分泌抗原的收集 | 第65-67页 |
·培养上清的浓缩 | 第67页 |
·浓缩产物的SDS-PAGE | 第67-68页 |
3 结果 | 第68-70页 |
·日本血吸虫成虫和虫卵抗原的收集 | 第68-69页 |
·日本血吸虫 SDS-PAGE结果 | 第69-70页 |
4 讨论 | 第70-73页 |
5 小结 | 第73-75页 |
总结 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-81页 |
缩略词表 | 第81-83页 |
攻读学位期间成果 | 第83-84页 |
综述 | 第84-94页 |
统计学审稿证明 | 第94-95页 |
致谢 | 第95-97页 |