摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
缩略词 | 第7-10页 |
引言 | 第10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-21页 |
1 水稻功能基因组学的研究 | 第10-14页 |
·物理化学法 | 第11-12页 |
·基因捕捉技术 | 第12-14页 |
2 水稻转基因技术的研究进展 | 第14-16页 |
·直接转化法 | 第14-16页 |
·农杆菌介导法 | 第16页 |
3 农杆菌介导的水稻稻遗传转化 | 第16-18页 |
·外植体类型 | 第17页 |
·Vir基因的激活 | 第17-18页 |
·农杆菌菌株和载体 | 第18页 |
·其它因素 | 第18页 |
4 T-DNA标签技术在植物基因功能分析中的应用及方法 | 第18-20页 |
·质粒挽救(plasmid rescue)方法 | 第19页 |
·反向PCR(IPCR)法 | 第19页 |
·热不对称性交错PCR(TAIL-PCR)法 | 第19-20页 |
·PCR步行法 | 第20页 |
5.本研究的目的意义 | 第20-21页 |
第二部分 材料和方法 | 第21-37页 |
1 材料 | 第21-25页 |
·植物材料:水稻品种中花11号 | 第21页 |
·质粒 | 第21-22页 |
·试剂和试剂盒 | 第22页 |
·相关培养基 | 第22-25页 |
2 实验方法 | 第25-37页 |
·水稻愈伤组织的诱导及继代 | 第25页 |
·农杆菌的活化 | 第25页 |
·农杆菌转化水稻胚性愈伤组织 | 第25页 |
·转基因植株的检测 | 第25-31页 |
·启动子捕捉系统检测 | 第31-32页 |
·利用PCR步行法和Genome Walking方法T-DNA侧翼序列 | 第32-37页 |
第三部分 结果与分析 | 第37-52页 |
1 水稻再生体系的建立 | 第37-39页 |
2 转基因植株的检测 | 第39-40页 |
·潮霉素上发芽筛选纯合的转基因植株 | 第39页 |
·PCR检测 | 第39页 |
·Southern杂交检测 | 第39-40页 |
3 启动子捕获系统检测 | 第40-42页 |
4 利用PCR步行法和Genome Walking方法扩增T-DNA侧翼序列 | 第42-49页 |
5 突变体的分析 | 第49-52页 |
第四部分 讨论 | 第52-56页 |
1、影响农杆菌介导的水稻再生的因素 | 第52-53页 |
2、水稻启动子捕捉系统 | 第53-54页 |
3、利用PCR步行法和Genome Walking方法扩增T-DNA侧翼序列 | 第54-55页 |
4、突变体的分析 | 第55-56页 |
小结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
致谢 | 第65-66页 |