| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-33页 |
| ·伪狂犬病 | 第12页 |
| ·伪狂犬病毒及其基因组 | 第12-13页 |
| ·伪狂犬病毒的糖蛋白 | 第13-15页 |
| ·伪狂犬病疫苗研究 | 第15-16页 |
| ·伪狂犬病诊断方法研究 | 第16-21页 |
| ·病原学诊断 | 第16-18页 |
| ·血清学抗体检测 | 第18-21页 |
| ·微量血清中和试验(MSN) | 第18页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第18页 |
| ·斑点ELISA | 第18-19页 |
| ·竞争ELISA | 第19页 |
| ·乳胶凝集试验(LAT) | 第19页 |
| ·间接血凝试验(IHA) | 第19页 |
| ·对流免疫电泳(CIE) | 第19页 |
| ·鉴别诊断ELISA | 第19-21页 |
| ·外源蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第21-33页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第22-23页 |
| ·原核表达载体的基本要求及现有类型 | 第23-25页 |
| ·原核表达产物的后处理 | 第25-28页 |
| ·原核表达系统的最新研究 | 第28-33页 |
| 第2章 研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 第3章 材料与方法 | 第34-49页 |
| ·实验材料 | 第34-40页 |
| ·病毒、质粒及菌株 | 第34-37页 |
| ·主要药品及试剂 | 第37-38页 |
| ·血清 | 第38页 |
| ·主要试剂及溶液的配制 | 第38-40页 |
| ·本研究中所用的寡核苷酸引物 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-49页 |
| ·PRV gG基因的扩增 | 第40-41页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第41页 |
| ·gG基因的克隆及测序 | 第41页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第41页 |
| ·连接产物及质粒的转化 | 第41页 |
| ·质粒的制备 | 第41-42页 |
| ·诱导表达 | 第42-43页 |
| ·包涵体提取 | 第43页 |
| ·可溶性表达产物的提取 | 第43页 |
| ·不可溶性表达产物(包涵体)的溶解和复性 | 第43页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第43-44页 |
| ·Western-blot | 第44页 |
| ·PRV gG表达产物的ELISA分析 | 第44页 |
| ·乳胶的预处理 | 第44-45页 |
| ·gG-LAT的建立 | 第45页 |
| ·gG-ELISA的建立 | 第45-46页 |
| ·gE-LAT的建立 | 第46-47页 |
| ·gE-ELISA的建立 | 第47-49页 |
| 第4章 结果与分析 | 第49-66页 |
| ·PRV gG基因的PCR扩增、克隆及序列测定 | 第49-51页 |
| ·gG表达载体的构建与鉴定 | 第51-53页 |
| ·gG表达产物的SDS-PAGE及蛋白质斑点杂交结果 | 第53-55页 |
| ·gG表达产物的浓缩及间接ELISA分析结果 | 第55-56页 |
| ·gG-LAT的建立 | 第56-57页 |
| ·gG-ELISA的建立 | 第57-60页 |
| ·PRV Ea株gE基因主要抗原表位区的表达 | 第60-61页 |
| ·gE-LAT的建立 | 第61-62页 |
| ·gE-ELISA的建立 | 第62-66页 |
| 第5章 讨论 | 第66-73页 |
| ·伪狂犬病 | 第66页 |
| ·伪狂犬病病毒gG基因的克隆表达 | 第66-67页 |
| ·gG表达产物的提取 | 第67-68页 |
| ·细菌裂解 | 第67页 |
| ·硫酸铵沉淀 | 第67-68页 |
| ·gE主要抗原表位区的表达 | 第68页 |
| ·包涵体的提取及溶解复性 | 第68-69页 |
| ·乳胶凝集试验(LAT) | 第69-70页 |
| ·LAT需注意的地方 | 第69-70页 |
| ·LAT方法的优点和缺点 | 第70页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第70-72页 |
| ·试剂的选择 | 第70页 |
| ·酶标板的选择 | 第70-71页 |
| ·ELISA方法的判断标准 | 第71-72页 |
| ·ELISA方法的优点和缺点 | 第72页 |
| ·小结 | 第72-73页 |
| 第6章 猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组序列的测定 | 第73-98页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征文献综述 | 第73-78页 |
| ·研究的目的和意义 | 第78-79页 |
| ·材料与方法 | 第79-83页 |
| ·结果与分析 | 第83-96页 |
| ·讨论 | 第96-97页 |
| ·小结 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-108页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第108-109页 |
| 附录 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110页 |