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产ESH酶的红球菌M1的分离鉴定、系统发育、产酶条件、细胞固定及其发酵放大研究

中文摘要第1-10页
第一章 文献综述第10-23页
 1 酒石酸研究进展第10-16页
   ·酒石酸的结构和理化特性第10页
   ·酒石酸的用途第10-12页
     ·酒石酸在食品中的应用第10-11页
     ·在环境修复中的应用第11页
     ·酒石酸在工业中的应用第11-12页
     ·在医学中的应用第12页
   ·d-酒石酸生产工艺路线第12-15页
     ·生物发酵法第12-13页
     ·半生物合成法第13页
     ·以酒石为原料制备d-酒石酸第13-14页
     ·以顺式环氧琥珀酸二钠为原料制备L-酒石酸-酶法生产L-酒石酸第14页
     ·酶法生产L-酒石酸的原理第14页
     ·DL-酒石酸化学合成生产工艺路线第14-15页
   ·酒石酸发酵研究的最新进展第15-16页
 2 细胞固定化研究进展第16-23页
   ·固定化细胞技术第16-18页
     ·固定化细胞的依据第16页
     ·固定化细胞的优缺点第16页
     ·固定化细胞的制备方式第16-18页
     ·固定化细胞载体的特性第18页
     ·目前主要采用的载体第18页
   ·卡拉胶的性质第18-19页
   ·卡拉胶在固定化细胞中应用实例第19-21页
   ·细胞固定化方法生产L(+)酒石酸研究进展第21-23页
第二章 产ESH酶的红球菌M1的分离、鉴定第23-29页
   ·材料和方法第23-25页
     ·菌株第23页
     ·培养基和培养条件第23页
     ·试剂第23-24页
     ·菌株M1的分类鉴定第24页
       ·形态学特征第24页
       ·分离菌株的BIOLOG-GP鉴定第24页
     ·分离菌株G+Cmol%含量的测定第24页
     ·分离菌株16S rDNA PCR扩增和序列测定第24页
     ·系统发育树构建第24页
     ·顺式环氧琥珀酸水解酶活性和酒石酸含量测定的测定第24-25页
   ·结果和分析第25-28页
     ·分离菌株的形态第25页
     ·M1菌株的BIOLOG-GP鉴定第25-26页
     ·M1菌株的G+Cmol%含量第26页
     ·M1菌株16S rDNA PCR扩增和序列同源性比较第26-27页
     ·菌株M1的系统发育分析第27-28页
   ·讨论第28-29页
第三章 产ESH酶的红球菌M1的产酶条件优化第29-34页
   ·材料和方法第29-30页
     ·培养基和培养条件第29页
     ·顺式环氧琥珀酸水解酶活性和酒石酸含量测定的测定第29页
     ·顺式环氧琥珀酸水解酶酶活性的测定第29页
     ·菌株M1的发酵产酶条件研究第29-30页
       ·碳源对菌株M1产酶的影响第29页
       ·氮源对菌株M1产酶的影响第29页
       ·不同初始pH值对菌株M1产酶的影响第29-30页
       ·顺式环氧琥珀酸二钠添加量、添加时间、发酵时间对菌株M1产酶的影响第30页
   ·结果和分析第30-33页
     ·碳源和氮源对M1菌株产酶的影响第30-32页
     ·顺式环氧琥珀酸二钠的流加对M1产酶的影响第32-33页
   ·讨论第33-34页
第四章 产ESH酶的红球菌M1的细胞固定化研究第34-42页
   ·材料和方法第34-36页
     ·材料第34页
       ·固定化材料第34页
       ·底物合成第34页
     ·培养基和培养条件第34页
     ·菌株第34页
     ·固定化细胞的制备方法第34-35页
       ·游离细胞的制备第34页
       ·固定化细胞的制备第34-35页
     ·复合配方的确定第35页
       ·胶体不同配方对固定化菌体特性的影响第35页
       ·正交试验第35页
     ·固定化细胞的处理液配方及处理时间确定第35页
     ·固定化细胞反应的稳定性第35页
     ·固定化细胞的活化第35-36页
     ·电镜观察第36页
       ·菌株固定前、后的形态观察第36页
       ·未加细胞的固定化载体剖面结构电镜照片第36页
     ·分析方法第36页
       ·L(+)酒石酸的测定第36页
       ·固定化细胞活力测定第36页
       ·凝胶强度的测定第36页
       ·凝固点的测定第36页
   ·结果和分析第36-41页
     ·不同配方对固定化细胞凝固温度、强度、活性以及菌体泄漏的影响第36-37页
     ·复合配方正交试验分析第37-38页
     ·固定化细胞后处理正交试验分析第38-39页
     ·固定化细胞的活化第39页
     ·反应的稳定性第39-40页
     ·电镜观察结果第40-41页
   ·讨论第41-42页
第五章 菌株M1产ESH酶的工业发酵研究第42-52页
   ·材料和方法第42-43页
     ·所用材料第42页
       ·底物第42页
       ·实验所用设备第42页
     ·培养基和培养条件第42页
     ·顺式环氧琥珀酸水解酶活性测定和酒石酸含量测定的测定第42-43页
     ·菌株M1发酵产酶的逐步放大研究第43页
       ·菌株M1在80L罐中的放大研究第43页
       ·菌株M1在800L罐中的放大研究第43页
       ·菌株M1在5000L罐中的放大研究第43页
   ·结果和分析第43-51页
     ·菌株M1在80L发酵罐中的生长第43-44页
     ·菌株M1进行800L罐的发酵情况第44-47页
       ·800L发酵流程第44页
       ·菌株M1在80L种子罐中的培养情况第44-45页
       ·补加高pH值的诱导剂对800L发酵产生的影响第45页
       ·补加pH值为8.0的诱导剂菌体发酵情况第45-46页
       ·优化后800L罐菌体发酵产酶情况第46-47页
     ·菌株M1进行5000L罐的发酵第47-51页
       ·800L发酵流程第47页
       ·菌株M1在300L种子罐中的培养情况第47-48页
       ·按800L放大的规律进行5000L发酵放大后的情况第48-49页
       ·5000L发酵培养中期再次补加pH 12的诱导剂对产酶的影响第49-50页
       ·优化后5000L发酵罐菌体发酵产酶第50-51页
   ·讨论第51-52页
第六章 产ESH酶的红球菌M1的细胞固定化工业放大研究第52-55页
 1 材料和方法第52-53页
   ·材料第52页
   ·实验所用设备第52页
   ·顺式环氧琥珀酸水解酶活性测定和酒石酸含量测定的测定第52页
   ·游离细胞的制备第52页
   ·固定化配方第52页
   ·混合方法第52-53页
 2 固定化细胞制备第53页
   ·固定化细胞流程第53页
   ·准备工作第53页
   ·细胞固定及其后处理第53页
   ·固定化细胞上柱反应第53页
     ·上柱循环第53页
     ·循环条件第53页
 3 结果与分析第53-54页
 4 讨论第54-55页
研究结论与建议第55-58页
 一、 研究结论第55-56页
  1 、 筛选到一株产ESH酶的红球菌第55页
  2 、 二次补加诱导剂与有机氮源提高了酶活第55页
  3 、 本文采用卡拉胶-魔芋多糖-羧甲基纤维素钠复合体系进行细胞固定化的研究第55-56页
 二、 关于进一步工作的建议第56-58页
  1 、 致力于高酶活菌株的获得第56页
  2 、 继续优化产酶工艺第56页
  3 、 固定化细胞技术的优化第56页
  4 、 开展关于ESH酶性质的研究第56-58页
英文摘要第58-60页
参考文献第60-62页
硕士研究生期间论文发表及获奖情况第62页

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