| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 缩写词表 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-20页 |
| ·乙型脑炎 | 第10页 |
| ·乙型脑炎病原学及其分子生物学特征 | 第10-15页 |
| ·JEV 的病原学 | 第10-11页 |
| ·JEV 基因组结构 | 第11-12页 |
| ·病毒蛋白种类 | 第12-15页 |
| ·乙型脑炎的危害及其预防 | 第15页 |
| ·乙型脑炎的危害 | 第15页 |
| ·乙型脑炎的预防 | 第15页 |
| ·乙型脑炎病毒的诊断方法研究进展 | 第15-16页 |
| ·病毒的分离鉴定 | 第15页 |
| ·病毒的抗原检测 | 第15-16页 |
| ·血清学诊断方法 | 第16页 |
| ·乙型脑炎疫苗的研究 | 第16-18页 |
| ·减毒活疫苗 | 第16-17页 |
| ·灭活疫苗 | 第17-18页 |
| ·基因工程疫苗 | 第18页 |
| ·本研究的意义 | 第18-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-31页 |
| ·基因、细胞、菌种、质粒载体和血清 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·实验所用溶液及其配制 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第21-24页 |
| ·目的基因的获取、处理和回收 | 第21-22页 |
| ·真核表达载体的处理 | 第22-23页 |
| ·目的基因和真核表达载体的连接﹑转化和挑菌 | 第23页 |
| ·真核表达载体鉴定 | 第23-24页 |
| ·稳定表达N51 蛋白细胞系的建立 | 第24-26页 |
| ·真核表达载体的提取 | 第24页 |
| ·真核表达载体的线性化 | 第24-25页 |
| ·G418 工作浓度的确定 | 第25页 |
| ·细胞转染 | 第25页 |
| ·转染细胞的筛选 | 第25-26页 |
| ·稳定表达N51 蛋白的细胞系的鉴定 | 第26-29页 |
| ·细胞系的RT-PCR 鉴定 | 第26-27页 |
| ·细胞系的western-blot 鉴定 | 第27-28页 |
| ·细胞系的免疫组化鉴定 | 第28页 |
| ·细胞系的IFA 鉴定 | 第28-29页 |
| ·补体介导的细胞毒试验（CDC）在检测猪血清中乙脑抗体方法的建立 | 第29-31页 |
| ·靶细胞的选择 | 第29页 |
| ·CDC 试验反应体系中细胞数量的确定 | 第29页 |
| ·CDC 试验检测方法临界值的确定及灵敏度和特异度分析 | 第29-30页 |
| ·CDC 检测方法的敏感性试验 | 第30页 |
| ·CDC 实验检测方法和ELISA 实验检测方法的比较 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-38页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第31-32页 |
| ·G418 工作浓度的确定 | 第32页 |
| ·细胞系的RT-PCR 鉴定 | 第32-33页 |
| ·细胞系的western-blot 鉴定 | 第33-34页 |
| ·细胞系的免疫组化鉴定 | 第34页 |
| ·细胞系的IFA 鉴定 | 第34页 |
| ·靶细胞的选择 | 第34-35页 |
| ·CDC 试验中靶细胞数量的确定 | 第35-36页 |
| ·CDC 试验检测方法临界值的确定及灵敏度和特异度分析 | 第36页 |
| ·敏感性试验 | 第36-37页 |
| ·CDC 实验检测方法和ELISA 实验检测方法的比较 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| ·原核表达的局限性 | 第38页 |
| ·真核表达载体pCAGneo 的优越性 | 第38页 |
| ·转染方法的选择 | 第38-39页 |
| ·CDC 试验检测抗体方法的意义 | 第39-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 作者简历 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
