| 1． INTRODUCTION | 第1-17页 |
| 1．1 Protein Cross-Linking Is Involved in Many Biological Processes | 第8-9页 |
| 1．1．1 Blood Coagulation | 第8页 |
| 1．1．2 Apoptosis | 第8-9页 |
| 1．1．3 Formation of hair and nails | 第9页 |
| 1．1．4 Formation of cataracts | 第9页 |
| 1．2 Protein Cross-Linking Is Related to Many diseases | 第9-12页 |
| 1．2．1 Huntington's disease（HD） | 第10页 |
| 1．2．2 Alzheimer's disease（AD） | 第10-11页 |
| 1．2．3 Parkinson's disease（PD） | 第11页 |
| 1．2．4 Prion diseases （Neena et al．, 1997） | 第11-12页 |
| 1．3 Mechanisms of Protein Cross-linking | 第12-13页 |
| 1．3．1 Conformational Changes are responsible for protein cross-linking and oligomerization | 第12页 |
| 1．3．2 Enzyme-mediated Isopeptide Bond Cross-links | 第12-13页 |
| 1．3．3 Three-step Hypothesis | 第13页 |
| 1．4 Protein disulfide isomerase（PDI） | 第13-15页 |
| 1．4．1 General description | 第13页 |
| 1．4．2 Structure and Function | 第13-15页 |
| 1．5 Background of this work | 第15-17页 |
| 2． MATERIALS AND METHODS | 第17-20页 |
| 2．1 Construction of recombinant plasmid pTcH2Cm2S | 第17-19页 |
| 2．2 Expression of recombinant Human PDI | 第19页 |
| 2．3 Purification of recombinant Human PDI | 第19页 |
| 2．4 Thermal unfolding | 第19页 |
| 2．5 SDS-PAGE analysis | 第19-20页 |
| 2．6 Western Blot analysis | 第20页 |
| 2．7 Database query | 第20页 |
| 2．8 Multiple sequence alignment and phylogenetic analysis | 第20页 |
| 3． RESULTS | 第20-24页 |
| 3．1 Restriction analysis of recombinant plasmid pTcP2Cm2S | 第20-21页 |
| 3．2 DNA sequencing | 第21-23页 |
| 3．3 Expression and Purification of Mutant PDI proteins | 第23页 |
| 3．4 SDS-PAGE of cross-linking experiments with purified PDI proteins | 第23-24页 |
| 3．5 Western blotting of cross-linking experiments with purified PDI proteins | 第24页 |
| 4． DISCUSSION | 第24-35页 |
| 4．1 Correlation between interchain cross-link and enzyme activity of PDI | 第24-26页 |
| 4．2 Crystallization of hPDI | 第26-27页 |
| 4．3 Secondary structure prediction of hPDI | 第27-30页 |
| 4．4 Sequence alignment | 第30-34页 |
| 4．5 Phylogenetic analysis | 第34-35页 |
| REFERENCES | 第35-38页 |
| ACKNOWLEDGMENTS | 第38页 |
