| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 1.文献综述 | 第14-20页 |
| ·体细胞核移植发展简史与现状 | 第14-16页 |
| ·牛体细胞核移植的研究进展 | 第16页 |
| ·胞质内直接注射法研究的进展 | 第16-17页 |
| ·哺乳动物核移植应用的前景 | 第17-19页 |
| ·在基础生物学研究领域的应用 | 第17-18页 |
| ·体细胞核移植在畜牧业及珍稀濒危动物保护中的作用 | 第18页 |
| ·在转基因动物和医学领域的的应用 | 第18-19页 |
| ·体细胞核移植存在的主要问题 | 第19-20页 |
| ·核移植总体效率太低 | 第19-20页 |
| ·流产率高,产仔率低 | 第20页 |
| ·出生动物死亡率高 | 第20页 |
| 2.研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 3.试验材料与方法 | 第21-30页 |
| ·试验设备 | 第21-22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·显微操作用针的制作与储存 | 第23-24页 |
| ·注核/去核针的制备 | 第23页 |
| ·固定针的制备 | 第23页 |
| ·固定针和去/注核针的保存 | 第23-24页 |
| ·操作液 | 第24页 |
| ·供体细胞培养液系列 | 第24页 |
| ·卵母细胞培养液系列 | 第24页 |
| ·胚胎培养液系列 | 第24页 |
| ·受体卵母细胞的制备 | 第24-26页 |
| ·卵巢的收集与保存 | 第24-25页 |
| ·卵母细胞采集 | 第25页 |
| ·卵母细胞的筛选与分级 | 第25页 |
| ·卵母细胞成熟培养 | 第25页 |
| ·共培养细胞单层的制备 | 第25-26页 |
| ·卵母细胞成熟判定 | 第26页 |
| ·供体细胞的制备与处理 | 第26-27页 |
| ·卵丘细胞系的建立 | 第26页 |
| ·卵丘细胞的传代 | 第26页 |
| ·卵丘细胞的冻存 | 第26-27页 |
| ·卵丘细胞的解冻 | 第27页 |
| ·颗粒细胞的建系、传代、冻存与解冻 | 第27页 |
| ·卵母细胞的处理 | 第27-28页 |
| ·卵母细胞的去核 | 第27页 |
| ·去核效率的鉴定 | 第27-28页 |
| ·重构胚的构建 | 第28页 |
| ·重构胚的激活 | 第28页 |
| ·重构胚胎的培养 | 第28页 |
| ·试验方案 | 第28页 |
| ·试验设计 | 第28-29页 |
| ·统计学分析 | 第29-30页 |
| 4.结果与分析 | 第30-35页 |
| ·不同去核方法对牛卵母细胞去核成功率的影响 | 第30页 |
| ·不同的激活剂对牛卵母细胞孤雌激活的影响 | 第30页 |
| ·不同类型供体细胞对SCNT重构胚发育潜能的影响 | 第30页 |
| ·不同处理的供体细胞对牛SCNT重构胚发育潜能的影响 | 第30-31页 |
| ·不同的激活方法对牛重构胚发育能力的影响的研究 | 第31页 |
| ·不同的培养体系对牛重构胚胎体外发育的影响 | 第31页 |
| ·显微操作后卵母细胞的存活率 | 第31页 |
| 表3不同去核方法对牛卵母细胞去核成功率的影响 | 第31-35页 |
| 5.讨论 | 第35-42页 |
| ·不同去核方法对牛卵母细胞去核成功率的影响 | 第35-36页 |
| ·不同的激活剂对牛卵母细胞孤雌激活的影响 | 第36-37页 |
| ·不同类型供体细胞对牛SCNT重构胚的影响 | 第37-38页 |
| ·不同处理的供体细胞对牛SCNT重构胚发育潜能的影响 | 第38页 |
| ·不同的激活方法对牛重构胚发育能力的影响的研究 | 第38-39页 |
| ·不同的培养体系对牛重构胚胎体外发育的影响 | 第39-40页 |
| ·显微操作对卵母细胞存活率的影响 | 第40-42页 |
| 6.结论 | 第42-43页 |
| 7.创新点与特色 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 附图 | 第53-56页 |