| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 文献综述 | 第10-42页 |
| 第一章 猪瘟病毒研究进展 | 第10-22页 |
| ·猪瘟病毒概述 | 第10-12页 |
| ·CSFV 的形态 | 第10-11页 |
| ·CSFV 的理化特征 | 第11页 |
| ·CSFV 的抗原性、毒力和分型 | 第11-12页 |
| ·CSFV 的培养细胞 | 第12页 |
| ·CSFV 的分子生物学研究 | 第12-18页 |
| ·CSFV 的基因组结构 | 第12-13页 |
| ·非翻译区 | 第13-18页 |
| ·猪瘟病毒与细胞相互作用研究 | 第18-22页 |
| ·猪瘟病毒的细胞受体与入胞 | 第18页 |
| ·CSFV 对细胞溶解性感染的调节 | 第18页 |
| ·CSFV 引起树突状细胞无应答 | 第18-19页 |
| ·CSFV 诱导淋巴细胞凋亡 | 第19页 |
| ·CSFV 抑制I 型干扰素的产生 | 第19-20页 |
| ·宿主天然免疫系统对猪瘟病毒的识别 | 第20-22页 |
| 第二章 microRNA 研究进展 | 第22-42页 |
| ·microRNA 概述 | 第22-25页 |
| ·microRNA 的发现 | 第22-23页 |
| ·非编码RNA | 第23-25页 |
| ·microRNA 基因结构与生物加工 | 第25-27页 |
| ·microRNA 的基因结构 | 第25页 |
| ·microRNA 的生物成熟 | 第25-27页 |
| ·翻译起始抑制和起始后抑制模型 | 第27页 |
| ·microRNA 发现方法 | 第27-28页 |
| ·cDNA 文库克隆法 | 第27-28页 |
| ·生物信息学方法 | 第28页 |
| ·microRNA 的功能 | 第28-36页 |
| ·microRNA 与发育 | 第28页 |
| ·microRNA 与信号转导 | 第28-30页 |
| ·microRNA 与干细胞分化 | 第30-31页 |
| ·microRNA 与癌症 | 第31-32页 |
| ·microRNA 与神经退行性疾病 | 第32页 |
| ·microRNA 与DNA 甲基化 | 第32-33页 |
| ·microRNA 与激素分泌 | 第33页 |
| ·microRNA 与免疫细胞发育 | 第33-34页 |
| ·microRNA 与感染免疫 | 第34-36页 |
| ·病毒编码的microRNA | 第36-39页 |
| ·疱疹病毒科病毒编码的microRNA | 第36-38页 |
| ·腺病毒相关的microRNA | 第38-39页 |
| ·SV40 编码的microRNA | 第39页 |
| ·细胞microRNA 对病毒的调节 | 第39-40页 |
| ·miR-122a 对HCV 的调节 | 第39页 |
| ·miR-32 对PFV-1 的调节 | 第39-40页 |
| ·miRNA 对HIV 的调节 | 第40页 |
| ·miRNA、siRNA 和RNAa | 第40-42页 |
| 试验研究 | 第42-68页 |
| 第三章 融合猪瘟病毒石门株3’非编码区绿色荧光蛋白报告基因载体的构建与纯化 | 第42-58页 |
| ·材料 | 第42-45页 |
| ·质粒与菌株 | 第42页 |
| ·工具酶和主要试剂 | 第42-44页 |
| ·主要仪器与设备 | 第44-45页 |
| ·方法与步骤 | 第45-51页 |
| ·病毒材料的准备 | 第45页 |
| ·免疫荧光检测猪瘟病毒 | 第45页 |
| ·3’UTR 片段的扩增与回收 | 第45-48页 |
| ·目的基因的克隆 | 第48-49页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第49-50页 |
| ·重组报告基因载体的构建与鉴定 | 第50-51页 |
| ·阳性重组报告基因质粒及pEGFP-C1 质粒的纯化 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-56页 |
| ·病毒增殖结果 | 第51-53页 |
| ·提取RNA 质量的鉴定 | 第53页 |
| ·RT-PCR 产物的电泳结果 | 第53页 |
| ·目的片段的克隆与鉴定 | 第53-55页 |
| ·重组报告基因质粒的鉴定与纯化结果 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| ·CSFV 在SUVEC 上的增殖 | 第56页 |
| ·小片段DNA 的回收和pEGFP-3’UTR 的构建 | 第56-57页 |
| ·质粒纯化 | 第57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 第四章 表达miR-150 shRNA 细胞株的建立 | 第58-68页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·质粒、毒株、菌株与细胞 | 第58页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第58页 |
| ·仪器与设备 | 第58页 |
| ·方法与步骤 | 第58-61页 |
| ·靶向CSFV RNA 基因组microRNA 的预测 | 第58-59页 |
| ·表达miR-150 shRNA 的设计 | 第59页 |
| ·重组干扰质粒的构建与鉴定 | 第59-60页 |
| ·G418 最佳筛选浓度的确定 | 第60页 |
| ·pGene-miR-150 质粒转染 PK-15 细胞 | 第60页 |
| ·G418 筛选及阳性细胞的获得 | 第60-61页 |
| ·重组干扰质粒的纯化 | 第61页 |
| ·稳定表达miR-150 PK-15 细胞株的获得 | 第61页 |
| ·结果 | 第61-65页 |
| ·已知猪microRNA 对CSFV 的预测结果 | 第61-62页 |
| ·miR-150 对CSFV 作用位点的预测 | 第62-63页 |
| ·重组干扰质粒的鉴定 | 第63-64页 |
| ·重组干扰质粒的纯化 | 第64页 |
| ·重组干扰质粒转染结果 | 第64页 |
| ·G418 筛选及阳性细胞的获得 | 第64-65页 |
| ·表达miR-150 shRNA 细胞株的获得 | 第65页 |
| ·讨论 | 第65-66页 |
| ·miR-150 靶标的预测 | 第65-66页 |
| ·用shRNA 载体来表达microRNA | 第66页 |
| ·小结 | 第66-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简介 | 第79页 |
