摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-10页 |
第一章 猪脑心肌炎病毒的研究进展 | 第10-23页 |
·猪脑心肌炎的分子生物学研究进展 | 第10-17页 |
·病毒粒子 | 第10-11页 |
·病毒基因组结构 | 第11-14页 |
·病毒蛋白的裂解 | 第14-15页 |
·病毒基因组同源性、系统进化及其遗传变异 | 第15-17页 |
·EMCV 理化特性 | 第17页 |
·EMCV 的分离 | 第17-18页 |
·细胞分离 | 第17-18页 |
·组织分离 | 第18页 |
·EMCV 致病性 | 第18-19页 |
·EMCV 感染的临床症状及病理变化 | 第19-20页 |
·EMCV 的流行情况及流行特点 | 第20-21页 |
·疾病诊断 | 第21页 |
·疾病防治 | 第21-23页 |
第二章 EMCV TJ 株2C 基因的克隆与分析 | 第23-45页 |
·材料 | 第23-26页 |
·毒株及细胞 | 第23页 |
·试剂 | 第23页 |
·主要仪器及设备 | 第23-24页 |
·主要用液的配置 | 第24-26页 |
·方法 | 第26-29页 |
·病毒增殖 | 第26页 |
·RT-PCR 鉴定 | 第26-27页 |
·2C 基因的克隆与测序 | 第27-29页 |
·结果 | 第29-42页 |
·细胞增毒鉴定 | 第29页 |
·RT-PCR 鉴定结果 | 第29页 |
·2C 基因的扩增 | 第29-30页 |
·2C 基因TJ 株测序结果及同源性分析 | 第30-41页 |
·EMCV TJ 株2C 蛋白二级结构和抗原表位 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-43页 |
·EMCV 的细胞培养特性 | 第42页 |
·EMCV 的鉴定 | 第42-43页 |
·2C 基因及其编码的蛋白 | 第43页 |
·小结 | 第43-45页 |
第三章 EMCV TJ 株2C 基因的原核表达与纯化 | 第45-59页 |
·材料 | 第45-49页 |
·主要试剂 | 第45页 |
·主要仪器和设备 | 第45-46页 |
·主要试剂的配制 | 第46-49页 |
·方法 | 第49-54页 |
·目的基因2C 的克隆 | 第49-50页 |
·目的基因与表达载体质粒pGEX-6P-1 的酶切 | 第50页 |
·目的基因与载体DNA 的连接与转化 | 第50-51页 |
·质粒DNA 提取-碱裂解法 | 第51-52页 |
·质粒DNA 的鉴定 | 第52页 |
·基因工程重组表达菌的诱导表达 | 第52-53页 |
·2C 重组蛋白的纯化回收 | 第53页 |
·重组蛋白的鉴定 | 第53-54页 |
·结果 | 第54-58页 |
·2C 基因的扩增和表达质粒pGEX-6P-2C 的鉴定 | 第54页 |
·序列测定 | 第54-55页 |
·基因工程重组菌的诱导表达和SDS-PAGE 电泳分析 | 第55-56页 |
·2C 蛋白的洗涤纯化 | 第56-57页 |
·2C 蛋白含量的测定 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58页 |
·小结 | 第58-59页 |
第四章 检测EMCV 抗体的间接ELISA 方法的初步建立及应用 | 第59-70页 |
·材料 | 第59-60页 |
·ELISA 用试剂与溶液的配置 | 第59-60页 |
·主要仪器 | 第60页 |
·方法 | 第60-61页 |
·间接ELISA 最适反应条件的确定 | 第60-61页 |
·重复性试验 | 第61页 |
·天津地区猪场的血清学调查 | 第61页 |
·2C 蛋白与VP1 蛋白EMCV 抗体检测的比较 | 第61页 |
·结果与分析 | 第61-67页 |
·抗原最佳工作浓度的确定 | 第61-62页 |
·酶标二抗最佳稀释度的确定 | 第62-63页 |
·被检血清最佳稀释度的确定 | 第63-64页 |
·阴阳性血清临界值的确定 | 第64-65页 |
·血清的重复性试验 | 第65页 |
·天津地区猪场EMCV 感染情况 | 第65-66页 |
·2C 蛋白与VP1 蛋白ELISA 检测结果的比较 | 第66-67页 |
·讨论 | 第67-69页 |
·EMCV 检测方法分析 | 第67-68页 |
·2C 蛋白与VP1 蛋白检测EMCV 抗体的差异性比较 | 第68页 |
·我国 EMCV 感染情况及公共卫生学意义 | 第68-69页 |
·小结 | 第69-70页 |
结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-77页 |
缩略词 | 第77-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
作者简介 | 第79页 |