| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第14-34页 |
| ·甜瓜白粉病研究概况 | 第15-19页 |
| ·甜瓜白粉病的种类和分布 | 第15-16页 |
| ·甜瓜白粉病菌的鉴别 | 第16-17页 |
| ·甜瓜白粉病传播途径及防治 | 第17-18页 |
| ·甜瓜白粉病菌的抗性相关基因 | 第18-19页 |
| ·抗坏血酸过氧化物酶APX研究进展 | 第19-23页 |
| ·APX的分子和酶学特征 | 第20-21页 |
| ·APX的基因工程 | 第21-22页 |
| ·H_2O_2与植株抗病反应 | 第22-23页 |
| ·Mlo基因研究进展 | 第23-30页 |
| ·Mlo基因及其编码的蛋白结构及细胞定位 | 第25-26页 |
| ·mlo基因突变抗病的细胞学证据 | 第26-28页 |
| ·Mlo基因在白粉病发病过程中可能的机理 | 第28-29页 |
| ·Mlo抗性和非寄主抗性的关系 | 第29-30页 |
| ·本研究的目的、意义及技术路线 | 第30-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-63页 |
| ·实验材料 | 第34-39页 |
| ·甜瓜APX基因的克隆与表达 | 第34-35页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·材料处理 | 第34页 |
| ·菌株及质粒 | 第34页 |
| ·酶及生化试剂 | 第34-35页 |
| ·甜瓜Mlo家族基因的克隆与表达 | 第35-36页 |
| ·植物材料 | 第35页 |
| ·材料处理 | 第35-36页 |
| ·菌株及质粒 | 第36页 |
| ·酶及生化试剂 | 第36页 |
| ·甜瓜CmMlo2基因的细胞定位、ihpRNAi载体的构建及有效性检测 | 第36-38页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·材料处理 | 第37页 |
| ·酶及生化试剂 | 第37页 |
| ·菌株及质粒 | 第37-38页 |
| ·软件工具 | 第38页 |
| ·培养基和常用溶液 | 第38页 |
| ·甜瓜CmMlo2基因ihpRNAi的遗传转化及功能分析 | 第38-39页 |
| ·植物材料 | 第39页 |
| ·工程菌及质粒 | 第39页 |
| ·酶及生化试剂 | 第39页 |
| ·试验方法 | 第39-63页 |
| ·甜瓜APX基因的克隆与表达 | 第39-49页 |
| ·利用TRIZOL法提取RNA | 第39-40页 |
| ·利用CTAB法提取植物基因组DNA | 第40页 |
| ·大肠杆菌操作 | 第40-41页 |
| ·重组子的鉴定 | 第41-43页 |
| ·序列测定及分析 | 第43页 |
| ·反转录cDNA第一条链的合成 | 第43-44页 |
| ·甜瓜APX基因中间片段克隆 | 第44页 |
| ·甜瓜APX基因3'5'RACE | 第44-45页 |
| ·甜瓜基因组DNA序列的获得 | 第45-46页 |
| ·APX酶活性测定 | 第46页 |
| ·构建原核表达载体 | 第46-47页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第47页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第47-48页 |
| ·APX半定量表达分析 | 第48-49页 |
| ·甜瓜Mlo家族基因的克隆与表达 | 第49-52页 |
| ·利用TRIZOL法提取RNA | 第49页 |
| ·反转录第一链的合成 | 第49页 |
| ·中间片段的获得 | 第49页 |
| ·Mlo家族基因的cDNA末端快速克隆 | 第49-50页 |
| ·序列分析及全长序列拼接 | 第50页 |
| ·半定量RT-PCR及定量Real-Time PCR分析 | 第50-52页 |
| ·甜瓜CmMlo2基因的细胞定位、ihpRNAi载体的构建及有效性 | 第52-58页 |
| ·CmMlo2的跨膜结构分析及预测 | 第52页 |
| ·CmMlo2-GFP融合蛋白的构建 | 第52-53页 |
| ·农杆菌LBA4404的活化及感受态制备 | 第53-54页 |
| ·农杆菌介导转化洋葱表皮细胞及定位观察 | 第54-55页 |
| ·甜瓜CmMlo2 ihpRNA干扰载体的构建 | 第55-56页 |
| ·pROK-CmMlo2-GFP和pFGC1008-CmMlo2共转化烟草 | 第56-58页 |
| ·甜瓜CmMlo2基因ihpRNAi的遗传转化及功能分析 | 第58-63页 |
| ·甜瓜再生体系建立 | 第58-59页 |
| ·甜瓜遗传转化体系的优化 | 第59-60页 |
| ·RNA干扰载体pFGC1008-CmMlo2对甜瓜的遗传转化流程 | 第60页 |
| ·转基因植株的检测 | 第60-62页 |
| ·转化植株功能的初步鉴定 | 第62-63页 |
| 3 结果分析 | 第63-90页 |
| ·甜瓜APX基因的克隆与表达分析 | 第63-68页 |
| ·CmAPX基因的克隆 | 第63页 |
| ·CmAPX基因结构分析 | 第63-64页 |
| ·CmAPX基因序列分析 | 第64-66页 |
| ·CmAPX基因的原核表达 | 第66-67页 |
| ·抗坏血酸过氧化物酶在白粉病菌诱导条件下酶活性的变化 | 第67页 |
| ·CmAPX基因的表达分析 | 第67-68页 |
| ·甜瓜Mlo家族基因的克隆与表达分析 | 第68-75页 |
| ·Mlo家族基因的克隆 | 第68-69页 |
| ·Mlo家族基因的序列分析 | 第69-72页 |
| ·Mlo家族基因的RT-PCR分析 | 第72-73页 |
| ·Mlo家族基因的定量分析 | 第73-75页 |
| ·甜瓜CmMlo2基因的细胞定位、ihpRNAi载体的构建及有效性检测 | 第75-79页 |
| ·跨膜结构预测 | 第75-76页 |
| ·CmMlo2基因编码产物的亚细胞定位 | 第76-77页 |
| ·ihpRNA干扰载体构建及干扰效率检测 | 第77-79页 |
| ·甜瓜CmMlo2基因ihpRNAi的遗传转化及功能的初步分析 | 第79-90页 |
| ·甜瓜再生体系 | 第79-81页 |
| ·转化方法研究 | 第81-84页 |
| ·转化植株T0代的获得及PCR、Real-Time PCR鉴定 | 第84-86页 |
| ·转基因植株外源基因拷贝数的确定 | 第86-88页 |
| ·转化To植株接种白粉病病菌的鉴定 | 第88页 |
| ·转化植株T0代的表型观察 | 第88-90页 |
| 4 讨论 | 第90-96页 |
| ·关于甜瓜APX基因的克隆与表达 | 第90-91页 |
| ·关于甜瓜Mlo家族基因的克隆与表达 | 第91-92页 |
| ·关于甜瓜CmMlo2基因的细胞定位、ihpRNAi载体的构建及有效性 | 第92-94页 |
| ·关于甜瓜CmMlo2基因ihpRNAi的遗传转化及功能 | 第94-96页 |
| 5 结论 | 第96-98页 |
| 6 参考文献 | 第98-109页 |
| 7 附录 | 第109-111页 |
| 8 致谢 | 第111-112页 |
| 9 攻读博士学位期间写作与发表的论文 | 第112页 |
