| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-10页 |
| 第一章 细胞色素P450(CYP450)研究进展 | 第10-20页 |
| 1 细胞色素P450概述 | 第10-20页 |
| ·细胞色素P450发现和研究简史 | 第10-11页 |
| ·细胞色素P450的系统命名 | 第11页 |
| ·细胞色素P450分布 | 第11-12页 |
| ·细胞色素P450结构与P450酶系特征 | 第12-14页 |
| ·细胞色素P450结构 | 第12-13页 |
| ·细胞色素P450酶系特征 | 第13-14页 |
| ·细胞色素P450作用机理 | 第14-15页 |
| ·CYP450的诱导和抑制 | 第15页 |
| ·诱导 | 第15页 |
| ·抑制 | 第15页 |
| ·细胞色素P450的生物学功能 | 第15-16页 |
| ·参与物质代谢 | 第15页 |
| ·解毒功能 | 第15-16页 |
| ·酶促功能 | 第16页 |
| ·参与免疫 | 第16页 |
| ·CYP450在不同领域的应用研究进展 | 第16-19页 |
| ·CYP450在医药学方面的研究 | 第16-17页 |
| ·CYP450在环境保护方面的应用 | 第17-18页 |
| ·CYP450作为生物学指标评价毒物毒性 | 第18页 |
| ·CYP450与昆虫的抗性 | 第18-19页 |
| ·CYP450在软体动物上的研究 | 第19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 三角帆蚌CYP450基因cDNA全长克隆、组织表达及序列分析 | 第20-46页 |
| 1 材料和方法 | 第20-29页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·实验动物 | 第20页 |
| ·药品与试剂 | 第20页 |
| ·质粒和菌株 | 第20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20-21页 |
| ·实验引物 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-29页 |
| ·动物材料处理 | 第21-22页 |
| ·总RNA的提取 | 第22页 |
| ·mRNA的分离纯化 | 第22-23页 |
| ·SMART cDNA的合成 | 第23-25页 |
| ·三角帆蚌CYP450cDNA片段的获得 | 第25-26页 |
| ·PCR产物的鉴定和胶回收 | 第26页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·目的片断的连接和转化 | 第27页 |
| ·序列分析 | 第27-28页 |
| ·系统发育树的构建 | 第28页 |
| ·CYP450基因的RT-PCR分析 | 第28-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-43页 |
| ·三角帆蚌肝脏总RNA的提取 | 第29页 |
| ·三角帆蚌CYP450基因cDNA全长序列拼接及序列分析 | 第29-42页 |
| ·三角帆蚌CYP450基因cDNA全长的获得 | 第29-33页 |
| ·CYP450基因编码氨基酸序列结构分析及信号肽预测 | 第33-34页 |
| ·三角帆蚌CYP450氨基酸序列的跨膜结构、二级结构和三级结构预测 | 第34-36页 |
| ·三角帆蚌CYP450氨基酸序列与其他物种的同源性比较 | 第36-40页 |
| ·系统发育分析 | 第40-42页 |
| ·三角帆蚌CYP450基因的组织差异表达分析 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-46页 |
| ·RACE扩增三角帆蚌CYP450全长cDNA序列 | 第43页 |
| ·三角帆蚌CYP450基因cDNA序列的基本特征 | 第43-44页 |
| ·三角帆蚌CYP450基因在不同组织中的表达 | 第44-46页 |
| 第三章 三角帆蚌CYP450基因的原核表达 | 第46-56页 |
| 1 材料与方法 | 第46-51页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·主要仪器设备 | 第46页 |
| ·菌种及载体 | 第46页 |
| ·酶制剂及化学试剂 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-51页 |
| ·原核表达载体的构建及质粒重组 | 第47-50页 |
| ·重组质粒的诱导表达及SDS-PAGE鉴定 | 第50-51页 |
| 2 实验结果 | 第51-54页 |
| ·三角帆蚌CYP450基因开放阅读框(Open reading frame,ORF)扩增 | 第51页 |
| ·三角帆蚌CYP450基因重组表达质粒构建和鉴定 | 第51-52页 |
| ·三角帆蚌CYP450基因开放阅读框(Open reading frame,ORF)片段测序鉴定 | 第52-53页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE电泳检测 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-56页 |
| ·表达载体的选择、诱导条件及重组蛋白的表达形式 | 第54页 |
| ·三角帆蚌CYP450原核表达载体构建及融合蛋白表达 | 第54-55页 |
| ·三角帆蚌CYP450原核表达研究展望 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70页 |
