摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-26页 |
1 核移植研究进展 | 第13-15页 |
·哺乳动物胚胎细胞核移植的研究 | 第14页 |
·哺乳动物胚胎干细胞核移植的研究 | 第14-15页 |
·哺乳动物体细胞核移植的研究 | 第15页 |
2 影响核移植效率的因素 | 第15-18页 |
·供体细胞对于体细胞核移植的影响 | 第15-17页 |
·各种类型的供体细胞核移植的影响 | 第15-16页 |
·处于各个细胞周期的供体细胞对核移植的影响 | 第16页 |
·处于不同传代次数的供体细胞对核移植的影响 | 第16页 |
·不同年龄的供体细胞对核移植的影响 | 第16-17页 |
·卵母细胞对于体细胞核移植的影响 | 第17-18页 |
·卵母细胞的停滞期和预先激活 | 第17页 |
·卵母细胞的去核方法 | 第17-18页 |
·重组胚的激活和培养 | 第18页 |
3 体细胞核移植诱导的表观遗传修饰 | 第18-23页 |
·组蛋白乙酰化 | 第19-20页 |
·组蛋白乙酰化和去乙酰化的作用机理 | 第19-20页 |
·DAN甲基化 | 第20-21页 |
·DNA甲基化的作用机理 | 第20-21页 |
·X染色体失活 | 第21页 |
·基因组印记 | 第21-22页 |
·端粒和端粒酶活性 | 第22-23页 |
4 组蛋白乙酰化与体细胞核移植 | 第23-26页 |
·组蛋白乙酰化与体细胞核移植异常 | 第23-24页 |
·组蛋白去乙酰化酶抑制剂的种类 | 第24页 |
·组蛋白去乙酰化酶抑制剂在体细胞核移植上的应用 | 第24-26页 |
第二章 NaBu处理供体细胞对组蛋白乙酰化和核移植的影响 | 第26-33页 |
1 材料和方法 | 第26-29页 |
·主要仪器设备及试剂 | 第26-29页 |
·主要仪器设备 | 第26-27页 |
·主要试剂 | 第27页 |
·奶牛成纤维细胞制备 | 第27页 |
·奶牛卵母细胞的体外成熟 | 第27-28页 |
·牛卵母细胞核移植 | 第28页 |
·重构胚的激活及体外培养 | 第28页 |
·免疫荧光染色 | 第28-29页 |
·试验设计 | 第29页 |
·试验数据统计分析 | 第29页 |
2 结果与分析 | 第29-31页 |
·NaBu不同时间处理对供体细胞组蛋白H3K9、14乙酰化水平的影响 | 第29-30页 |
·供体细胞经NaBu处理对克隆胚胎发育能力的影响 | 第30-31页 |
3 讨论 | 第31-32页 |
4 小结 | 第32-33页 |
第三章 去乙酰化酶抑制剂(NaBu)对供体细胞特性的影响 | 第33-44页 |
1 材料与方法 | 第33-36页 |
·材料 | 第33-34页 |
·主要仪器 | 第33-34页 |
·试剂 | 第34页 |
·方法 | 第34-36页 |
·去乙酰化酶抑制剂(NaBu)处理供体成纤维细胞 | 第34页 |
·去乙酰化酶抑制剂(NaBu)对细胞周期的影响 | 第34-35页 |
·去乙酞化酶抑制剂(NaB)u对细胞凋亡的影响 | 第35页 |
·DNA ladder法检测细胞凋亡 | 第35页 |
·采用Annexin Ⅴ联合PI法检测细胞的凋亡 | 第35页 |
·去乙酰化酶抑制剂(NaBu)对细胞相对数和活力的影响 | 第35-36页 |
2 结果与分析 | 第36-40页 |
·NaBu对成纤维细胞的形态的影响 | 第36页 |
·NaBu对细胞周期的影响 | 第36-38页 |
·NaBu对细胞凋亡的影响 | 第38-40页 |
·NaBu对细胞相对数和细胞活力的影响 | 第40页 |
3 讨论 | 第40-43页 |
·NaBu处理成纤维细胞形态学变化 | 第40-41页 |
·NaBu处理对细胞周期的影响 | 第41页 |
·NaBu对细胞凋亡的影响 | 第41-42页 |
·NaBu对细胞生长的抑制 | 第42-43页 |
4 小结 | 第43页 |
5 本研究创新处 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
致谢 | 第49页 |