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黑翅土白蚁体内纤维素酶编码基因的克隆与表达

致谢第1-11页
摘要第11-13页
Abstract第13-15页
1 引言第15-29页
   ·纤维素酶的概述第15-23页
     ·纤维素酶的组成第15页
     ·纤维素酶的作用机理第15-16页
       ·C_1-C_x假说第15页
       ·顺序作用假说第15-16页
       ·协同作用假说第16页
       ·纤维素酶的来源第16-18页
       ·产纤维素酶的微生物第16-17页
       ·产纤维素酶的动物第17-18页
       ·产纤维素酶的植物第18页
     ·纤维素酶的应用第18-23页
       ·食品工业中的应用第18-20页
         ·水果与蔬菜加工第18-19页
         ·酒类生产第19页
         ·酱油酿造第19-20页
       ·饲料工业中的应用第20页
       ·洗涤剂工业中的应用第20-21页
       ·纺织工业中的应用第21页
       ·造纸工业中的应用第21-22页
       ·能源工业中的应用第22页
       ·其他领域中的应用第22-23页
   ·白蚁纤维素酶概况第23-27页
     ·白蚁的分类第23-25页
     ·白蚁纤维素酶的来源第25-27页
       ·白蚁体内的共生鞭毛虫第25-26页
       ·白蚁体内的共生细菌第26页
       ·白蚁体外共生的真菌第26-27页
       ·白蚁自身分泌产生第27页
   ·本论文研究的目的和意义第27-29页
2 纤维素酶基因的克隆第29-52页
   ·材料与方法第29-37页
     ·白蚁第29-30页
     ·工具酶与试剂第30页
     ·仪器第30页
     ·培养基与溶液配制第30页
     ·总RNA提取第30-31页
     ·第一链cDNA的合成第31-32页
     ·引物设计与纤维素酶基因cDNA片段的扩增第32-34页
     ·5'-RACE第34-36页
     ·3'-RACE第36-37页
   ·结果第37-51页
     ·总RNA的提取第37-38页
     ·黑翅土白蚁纤维素酶基因cDNA片段的克隆第38-40页
       ·内切-β-1,4-葡聚糖酶基因cDNA片段的克隆第38-39页
       ·β-葡萄糖苷酶基因cDNA片段的克隆第39-40页
     ·黑翅土白蚁纤维素酶基因cDNA末端克隆第40-42页
       ·内切-β-1,4-葡聚糖酶基因cDNA末端克隆第40-41页
       ·β-葡萄糖苷酶基因cDNA末端克隆第41-42页
     ·黑翅土白蚁纤维素酶基因cDNA序列分析第42-47页
       ·内切-β-1,4-葡聚糖酶基因cDNA序列分析第42-45页
       ·β-葡萄糖苷酶基因cDNA序列分析第45-47页
     ·黑翅土白蚁纤维素酶与其它白蚁纤维素酶的比较分析第47-51页
       ·内切-β-1,4-葡聚糖酶的比较分析第47-49页
       ·β-葡萄糖苷酶的比较分析第49-51页
   ·讨论第51-52页
3 纤维素酶基因在大肠杆菌中的表达第52-64页
   ·材料与方法第52-60页
     ·菌株与载体第52页
     ·工具酶与试剂第52-53页
     ·仪器第53页
     ·培养基和溶液配制第53-54页
     ·原核表达载体的构建第54-56页
     ·诱导表达第56页
     ·SDS-PAGE电泳第56-57页
     ·Western Blot第57-58页
     ·多克隆抗体制备第58-59页
     ·酶活测定第59-60页
   ·结果第60-63页
     ·表达载体构建第60-61页
     ·在大肠杆菌中的表达第61页
     ·SDS-PAGE及Western blot分析第61-63页
   ·讨论第63-64页
4 纤维素酶基因在昆虫细胞中的表达第64-74页
   ·材料与方法第64-69页
     ·菌株与载体第64页
     ·工具酶与试剂第64-65页
     ·仪器第65页
     ·真核表达载体的构建第65-66页
     ·重组病毒的构建第66-67页
     ·昆虫细胞的转染第67-68页
     ·SDS-PAGE电泳第68页
     ·Western blot第68-69页
     ·酶活测定第69页
   ·结果第69-73页
     ·表达载体构建第69-70页
     ·在昆虫细胞中的表达第70-71页
     ·SDS-PAGE及Western blot分析第71-73页
   ·讨论第73-74页
5 黑翅土白蚁体内纤维素酶的性质分析第74-84页
   ·材料与方法第74-76页
     ·白蚁第74页
     ·工具酶与试剂第74页
     ·仪器第74-75页
     ·白蚁体内纤维素酶基因的表达水平第75页
     ·白蚁体内纤维素酶的分布第75-76页
     ·白蚁体内纤维素酶的酶活第76页
   ·结果第76-82页
     ·白蚁体内纤维素酶基因的表达水平第76-78页
     ·白蚁体内纤维素酶的分布第78-80页
     ·白蚁体内纤维素酶的活性第80-82页
   ·讨论第82-84页
6 总结第84-85页
不足之处及今后研究方向第85-86页
参考文献第86-90页
攻读博士学位期间的研究成果第90-91页

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