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PHL和AHP5基因的克隆及其在甜橙和草莓中的功能分析

摘要第7-9页
Abstract第9-11页
第1章 文献综述第12-22页
    1.1 柑橘果实发育的特征第12页
    1.2 果实糖酸含量对果实品质的影响第12-14页
        1.2.1 果实中糖酸种类第13页
        1.2.2 果实糖酸含量对品质的重要性第13-14页
    1.3 果实糖酸调控的研究进展第14-22页
        1.3.1 糖的合成第14-15页
        1.3.2 果实中糖的积累及含量变化第15-16页
        1.3.3 果实中有机酸代谢第16-19页
        1.3.5 PH基因及糖酸比相关基因的研究进展第19-22页
第2章 引言第22-24页
第3章 材料与方法第24-36页
    3.1 实验材料第24-25页
        3.1.1 植物材料第24页
        3.1.2 菌种及载体第24页
        3.1.3 主要仪器第24页
        3.1.4 主要试剂第24-25页
    3.2 实验方法第25-36页
        3.2.1 总RNA提取第25-26页
        3.2.2 cDNA的合成第26-27页
        3.2.3 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第27页
        3.2.4 超量表达载体和RNA干扰载体构建第27-28页
        3.2.5 目的基因的克隆第28页
        3.2.6 目的片段胶回收第28-29页
        3.2.7 TA克隆和大肠杆菌转化第29-30页
        3.2.8 质粒提取第30页
        3.2.9 表达载体的构建第30-31页
        3.2.10 冻融法农杆菌EHA105感受态细胞的制备第31页
        3.2.11 农杆菌冻融转化第31-32页
        3.2.12 柑橘的遗传转化第32-33页
        3.2.13 草莓的遗传转化第33-36页
第4章 FvPHL基因的表达分析第36-46页
    4.1 材料与方法第36-37页
        4.1.1 实验材料第36页
        4.1.2 草莓FvPHL基因系统进化树分析第36页
        4.1.3 激素处理第36页
        4.1.4 总RNA提取第36页
        4.1.5 cNDA的合成第36页
        4.1.6 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第36-37页
        4.1.7 数据处理与分析第37页
    4.2 结果与分析第37-43页
        4.2.1 草莓FvPHL基因家族第37-38页
        4.2.2 FvPHL家族各基因的表达特征分析第38-40页
        4.2.3 IAA诱导FvPHL基因家族各基因表达第40-41页
        4.2.4 FvPHL家族各基因对ABA的响应第41-42页
        4.2.5 草莓果实FvPHL基因对激素的响应第42-43页
    4.3 讨论第43-44页
    4.4 小结第44-46页
第5章 甜橙和草莓PH基因克隆及遗传转化第46-56页
    5.1 PH基因在甜橙中的功能验证第46-52页
        5.1.1 材料与方法第46页
        5.1.2 CsPHL1基因的表达特征分析第46-47页
        5.1.3 CsPHL1基因超量表达载体ZZ302的构建第47-48页
        5.1.4 CsPHL1基因RNA干扰载体ZZ305的构建第48-50页
        5.1.5 甜橙的遗传转化第50页
        5.1.6 转基因植株PCR鉴定第50-51页
        5.1.7 转基因植株qRT-PCR分析第51-52页
    5.2 PH基因在草莓中的功能验证第52-55页
        5.2.1 材料与方法第52页
        5.2.2 FvPHL1基因表达特征分析第52-53页
        5.2.3 FvPHL1基因RNA干扰载体ZZ312的构建第53-54页
        5.2.4 根癌农杆菌介导的草莓遗传转化第54-55页
    5.3 讨论与小结第55-56页
第6章 甜橙和草莓AHP5基因的克隆及遗传转化第56-66页
    6.1 AHP5基因在柑橘中的功能验证第56-60页
        6.1.1 材料与方法第56-57页
        6.1.2 CsAHP5基因的表达特征分析第57-58页
        6.1.3 CsAHP5基因RNA干扰载体ZZ320的构建第58-59页
        6.1.4 CsAHP5基因超量表达载体ZZ321的构建第59-60页
        6.1.5 转基因植株PCR鉴定第60页
    6.2 AHP5基因在草莓中的功能验证第60-64页
        6.2.1 材料与方法第60-61页
        6.2.2 FvAHP5基因RNA干扰载体ZZ325的构建第61-62页
        6.2.3 根癌农杆菌介导的草莓遗传转化及转基因植株鉴定第62-63页
        6.2.4 FvAHP5基因RNA干扰载体ZZ325改造第63页
        6.2.5 ZZ325K遗传转化及转基因植株PCR鉴定第63-64页
    6.3 讨论与小结第64-66页
全文结论和展望第66-68页
参考文献第68-76页
发表论文及参加课题第76-78页
致谢第78-80页
附录第80页

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