摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第1章 文献综述 | 第12-22页 |
1.1 柑橘果实发育的特征 | 第12页 |
1.2 果实糖酸含量对果实品质的影响 | 第12-14页 |
1.2.1 果实中糖酸种类 | 第13页 |
1.2.2 果实糖酸含量对品质的重要性 | 第13-14页 |
1.3 果实糖酸调控的研究进展 | 第14-22页 |
1.3.1 糖的合成 | 第14-15页 |
1.3.2 果实中糖的积累及含量变化 | 第15-16页 |
1.3.3 果实中有机酸代谢 | 第16-19页 |
1.3.5 PH基因及糖酸比相关基因的研究进展 | 第19-22页 |
第2章 引言 | 第22-24页 |
第3章 材料与方法 | 第24-36页 |
3.1 实验材料 | 第24-25页 |
3.1.1 植物材料 | 第24页 |
3.1.2 菌种及载体 | 第24页 |
3.1.3 主要仪器 | 第24页 |
3.1.4 主要试剂 | 第24-25页 |
3.2 实验方法 | 第25-36页 |
3.2.1 总RNA提取 | 第25-26页 |
3.2.2 cDNA的合成 | 第26-27页 |
3.2.3 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第27页 |
3.2.4 超量表达载体和RNA干扰载体构建 | 第27-28页 |
3.2.5 目的基因的克隆 | 第28页 |
3.2.6 目的片段胶回收 | 第28-29页 |
3.2.7 TA克隆和大肠杆菌转化 | 第29-30页 |
3.2.8 质粒提取 | 第30页 |
3.2.9 表达载体的构建 | 第30-31页 |
3.2.10 冻融法农杆菌EHA105感受态细胞的制备 | 第31页 |
3.2.11 农杆菌冻融转化 | 第31-32页 |
3.2.12 柑橘的遗传转化 | 第32-33页 |
3.2.13 草莓的遗传转化 | 第33-36页 |
第4章 FvPHL基因的表达分析 | 第36-46页 |
4.1 材料与方法 | 第36-37页 |
4.1.1 实验材料 | 第36页 |
4.1.2 草莓FvPHL基因系统进化树分析 | 第36页 |
4.1.3 激素处理 | 第36页 |
4.1.4 总RNA提取 | 第36页 |
4.1.5 cNDA的合成 | 第36页 |
4.1.6 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第36-37页 |
4.1.7 数据处理与分析 | 第37页 |
4.2 结果与分析 | 第37-43页 |
4.2.1 草莓FvPHL基因家族 | 第37-38页 |
4.2.2 FvPHL家族各基因的表达特征分析 | 第38-40页 |
4.2.3 IAA诱导FvPHL基因家族各基因表达 | 第40-41页 |
4.2.4 FvPHL家族各基因对ABA的响应 | 第41-42页 |
4.2.5 草莓果实FvPHL基因对激素的响应 | 第42-43页 |
4.3 讨论 | 第43-44页 |
4.4 小结 | 第44-46页 |
第5章 甜橙和草莓PH基因克隆及遗传转化 | 第46-56页 |
5.1 PH基因在甜橙中的功能验证 | 第46-52页 |
5.1.1 材料与方法 | 第46页 |
5.1.2 CsPHL1基因的表达特征分析 | 第46-47页 |
5.1.3 CsPHL1基因超量表达载体ZZ302的构建 | 第47-48页 |
5.1.4 CsPHL1基因RNA干扰载体ZZ305的构建 | 第48-50页 |
5.1.5 甜橙的遗传转化 | 第50页 |
5.1.6 转基因植株PCR鉴定 | 第50-51页 |
5.1.7 转基因植株qRT-PCR分析 | 第51-52页 |
5.2 PH基因在草莓中的功能验证 | 第52-55页 |
5.2.1 材料与方法 | 第52页 |
5.2.2 FvPHL1基因表达特征分析 | 第52-53页 |
5.2.3 FvPHL1基因RNA干扰载体ZZ312的构建 | 第53-54页 |
5.2.4 根癌农杆菌介导的草莓遗传转化 | 第54-55页 |
5.3 讨论与小结 | 第55-56页 |
第6章 甜橙和草莓AHP5基因的克隆及遗传转化 | 第56-66页 |
6.1 AHP5基因在柑橘中的功能验证 | 第56-60页 |
6.1.1 材料与方法 | 第56-57页 |
6.1.2 CsAHP5基因的表达特征分析 | 第57-58页 |
6.1.3 CsAHP5基因RNA干扰载体ZZ320的构建 | 第58-59页 |
6.1.4 CsAHP5基因超量表达载体ZZ321的构建 | 第59-60页 |
6.1.5 转基因植株PCR鉴定 | 第60页 |
6.2 AHP5基因在草莓中的功能验证 | 第60-64页 |
6.2.1 材料与方法 | 第60-61页 |
6.2.2 FvAHP5基因RNA干扰载体ZZ325的构建 | 第61-62页 |
6.2.3 根癌农杆菌介导的草莓遗传转化及转基因植株鉴定 | 第62-63页 |
6.2.4 FvAHP5基因RNA干扰载体ZZ325改造 | 第63页 |
6.2.5 ZZ325K遗传转化及转基因植株PCR鉴定 | 第63-64页 |
6.3 讨论与小结 | 第64-66页 |
全文结论和展望 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-76页 |
发表论文及参加课题 | 第76-78页 |
致谢 | 第78-80页 |
附录 | 第80页 |