中文摘要 | 第8-13页 |
英文摘要 | 第13-19页 |
英文缩略词 | 第20-22页 |
第一部分 人食管鳞癌TE-1和TE-1/DDP细胞株IncRNA和mRNA测序分析 | 第22-54页 |
1 前言 | 第22-23页 |
2 实验材料 | 第23-24页 |
2.1 细胞株 | 第23页 |
2.2 实验仪器与试剂 | 第23-24页 |
3 实验方法 | 第24-30页 |
3.1 细胞培养 | 第24-25页 |
3.2 顺铂耐药人食管鳞状细胞癌TE-1/DDP细胞株构建 | 第25-26页 |
3.3 TE-1/DDP细胞活力检测 | 第26页 |
3.4 TE-1/DDP细胞凋亡检测 | 第26页 |
3.5 食管癌细胞总RNA提取 | 第26-27页 |
3.6 cDNA文库构建 | 第27-30页 |
4 结果 | 第30-48页 |
4.1 TE-1/DDP细胞活力检测结果 | 第30页 |
4.2 TE-1/DDP细胞凋亡检测结果 | 第30-32页 |
4.3 食管癌细胞IncRNA和mRNA测序结果分析 | 第32-48页 |
5 讨论 | 第48-51页 |
参考文献 | 第51-54页 |
第二部分 Nrf2基因对人食管鳞癌TE-1/DDP细胞生物学活动的影响及对食管鳞癌患者生存期的影响 | 第54-85页 |
1 前言 | 第54页 |
2 实验材料 | 第54-57页 |
2.1 细胞株 | 第54-55页 |
2.2 实验仪器与试剂 | 第55-56页 |
2.3 载体信息 | 第56页 |
2.4 引物信息 | 第56-57页 |
3 实验方法 | 第57-67页 |
3.1 细胞培养 | 第57页 |
3.2 Nrf2和lncCOPZ2-1荧光定量检测 | 第57-58页 |
3.3 Nrf2过表达载体构建 | 第58-61页 |
3.4 CCK-8法检测细胞活力 | 第61页 |
3.5 细胞凋亡检测 | 第61页 |
3.6 细胞克隆形成实验 | 第61-62页 |
3.7 Transwell实验 | 第62页 |
3.8 TE-1/DDP细胞内活性氧检测 | 第62-63页 |
3.9 Nrf2表达与食管鳞癌患者生存率的关系 | 第63-66页 |
3.10 统计学分析 | 第66-67页 |
4 结果 | 第67-77页 |
4.1 Nrf2和IncCOPZ2-1测序结果验证 | 第67-68页 |
4.2 Nrf2表达与食管鳞癌患者生存率的关系 | 第68-71页 |
4.3 细胞活力检测实验结果 | 第71页 |
4.4 细胞凋亡检测实验结果 | 第71-73页 |
4.5 顺铂压力下食管癌细胞克隆形成能力检测 | 第73-74页 |
4.6 细胞侵袭能力检测结果 | 第74-76页 |
4.7 顺铂压力下食管鳞癌细胞内活性氧检测结果 | 第76-77页 |
5 讨论 | 第77-80页 |
参考文献 | 第80-85页 |
第三部分 IncCOPZ2-1和Nrf2参与人食管鳞癌TE-1/DDP细胞化疗耐药的机制研究 | 第85-104页 |
1 前言 | 第85页 |
2 实验材料 | 第85-88页 |
2.1 细胞株 | 第85-86页 |
2.2 实验仪器与试剂 | 第86-87页 |
2.3 载体信息 | 第87页 |
2.4 引物信息 | 第87-88页 |
3 实验方法 | 第88-93页 |
3.1 细胞培养 | 第88页 |
3.2 lncCOPZ2-1过表达/沉默慢病毒载体构建 | 第88-90页 |
3.3 Western blot检测 | 第90-92页 |
3.4 构建动物模型 | 第92-93页 |
3.5 统计学分析 | 第93页 |
4 结果 | 第93-99页 |
4.1 表达和沉默IncCOPZ2-1对Nrf2的表达水平的影响 | 第93-95页 |
4.2 Nrf2在各组细胞中蛋白水平的表达 | 第95页 |
4.3 过表达IncCOPZ2-1对Nrf2-ARE抗氧化通路相关蛋白表达的影响 | 第95-96页 |
4.4 过表达IncCOPZ2-1对细胞凋亡相关蛋白表达的影响 | 第96-97页 |
4.5 肿瘤生长曲线 | 第97-99页 |
5 讨论 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-104页 |
总结 | 第104-106页 |
综述 | 第106-128页 |
参考文献 | 第119-128页 |
致谢 | 第128-129页 |
附录A 攻读学位期间发表论文 | 第129-130页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第130-131页 |
附录B 外文论文 | 第131-171页 |