摘要 | 第10-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第13-24页 |
1.1 人非小细胞肺癌和A549细胞 | 第13-14页 |
1.2 iPS细胞简介及研究进展 | 第14-17页 |
1.3 外泌体简介 | 第17-20页 |
1.3.1 胞间通讯和外泌体的形成 | 第17页 |
1.3.2 外泌体结构及功能 | 第17-19页 |
1.3.3 干细胞外泌体与肿瘤的关系 | 第19-20页 |
1.4 外泌体的分离鉴定 | 第20-22页 |
1.4.1 外泌体的分离纯化 | 第20-22页 |
1.4.2 外泌体的保存 | 第22页 |
1.4.3 外泌体的鉴定 | 第22页 |
1.5 本论文的主要工作和意义 | 第22-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-39页 |
2.1 实验材料、试剂和仪器 | 第24-26页 |
2.1.1 主要实验材料 | 第24页 |
2.1.2 主要实验试剂 | 第24-26页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-39页 |
2.2.1 人肺腺癌A549细胞的培养 | 第26-28页 |
2.2.1.1 人肺腺癌A549细胞的复苏 | 第26-27页 |
2.2.1.2 人肺腺癌A549细胞的传代培养 | 第27页 |
2.2.1.3 人肺腺癌A549细胞的冻存 | 第27-28页 |
2.2.2 iPS细胞的培养 | 第28-30页 |
2.2.2.1 iPS细胞的复苏 | 第28-29页 |
2.2.2.2 iPS细胞的传代培养 | 第29页 |
2.2.2.3 iPS细胞的冻存 | 第29-30页 |
2.2.2.4 iPS细胞上清液的收集及保存 | 第30页 |
2.2.3 人iPS细胞外泌体的提取鉴定 | 第30-36页 |
2.2.3.1 超速离心法提取外泌体 | 第30-33页 |
2.2.3.2 外泌体透射电镜拍摄 | 第33页 |
2.2.3.3 外泌体蛋白的提取 | 第33页 |
2.2.3.4 外泌体BCA蛋白浓度的测定 | 第33-34页 |
2.2.3.5 外泌体特异性蛋白分析鉴定 | 第34-36页 |
2.2.4 人iPS细胞外泌体对人肺腺癌A549细胞的影响 | 第36-39页 |
2.2.4.1 人肺腺癌A549细胞形态观察 | 第36-37页 |
2.2.4.2 增殖实验 | 第37页 |
2.2.4.3 侵袭实验 | 第37-38页 |
2.2.4.4 迁移实验 | 第38-39页 |
第三章 实验结果 | 第39-50页 |
3.1 人肺腺癌A549细胞的形态特征 | 第39页 |
3.2 人iPS细胞的形态特征 | 第39-40页 |
3.3 人iPS细胞外泌体的电镜结果 | 第40-41页 |
3.4 BCA蛋白浓度测定结果 | 第41页 |
3.5 人iPS细胞源外泌体特征蛋白CD63表达情况 | 第41-42页 |
3.6 人肺腺癌A549细胞用人iPS细胞外泌体培养后的形态变化 | 第42-44页 |
3.7 人肺腺癌A549细胞增殖实验 | 第44-45页 |
3.8 人肺腺癌A549细胞侵袭实验 | 第45-47页 |
3.9 人肺腺癌A549细胞迁移实验 | 第47-50页 |
第四章 讨论 | 第50-56页 |
4.1 人肺腺癌A549细胞培养方法改进 | 第50-51页 |
4.2 iPS细胞的培养条件优化 | 第51-52页 |
4.3 人iPS细胞外泌体分离过程的讨论 | 第52-53页 |
4.4 人iPS细胞外泌体鉴定过程的讨论 | 第53页 |
4.5 人肺腺癌A549细胞形态变化的讨论 | 第53-54页 |
4.6 人肺腺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移能力变化的讨论 | 第54-56页 |
第五章 结论与展望 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-68页 |
致谢 | 第68页 |