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人诱导多能干细胞(iPSc)外泌体的分离鉴定及其刺激人肺腺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移能力的研究

摘要第10-11页
Abstract第11-12页
第一章 引言第13-24页
    1.1 人非小细胞肺癌和A549细胞第13-14页
    1.2 iPS细胞简介及研究进展第14-17页
    1.3 外泌体简介第17-20页
        1.3.1 胞间通讯和外泌体的形成第17页
        1.3.2 外泌体结构及功能第17-19页
        1.3.3 干细胞外泌体与肿瘤的关系第19-20页
    1.4 外泌体的分离鉴定第20-22页
        1.4.1 外泌体的分离纯化第20-22页
        1.4.2 外泌体的保存第22页
        1.4.3 外泌体的鉴定第22页
    1.5 本论文的主要工作和意义第22-24页
第二章 材料与方法第24-39页
    2.1 实验材料、试剂和仪器第24-26页
        2.1.1 主要实验材料第24页
        2.1.2 主要实验试剂第24-26页
        2.1.3 主要实验仪器第26页
    2.2 实验方法第26-39页
        2.2.1 人肺腺癌A549细胞的培养第26-28页
            2.2.1.1 人肺腺癌A549细胞的复苏第26-27页
            2.2.1.2 人肺腺癌A549细胞的传代培养第27页
            2.2.1.3 人肺腺癌A549细胞的冻存第27-28页
        2.2.2 iPS细胞的培养第28-30页
            2.2.2.1 iPS细胞的复苏第28-29页
            2.2.2.2 iPS细胞的传代培养第29页
            2.2.2.3 iPS细胞的冻存第29-30页
            2.2.2.4 iPS细胞上清液的收集及保存第30页
        2.2.3 人iPS细胞外泌体的提取鉴定第30-36页
            2.2.3.1 超速离心法提取外泌体第30-33页
            2.2.3.2 外泌体透射电镜拍摄第33页
            2.2.3.3 外泌体蛋白的提取第33页
            2.2.3.4 外泌体BCA蛋白浓度的测定第33-34页
            2.2.3.5 外泌体特异性蛋白分析鉴定第34-36页
        2.2.4 人iPS细胞外泌体对人肺腺癌A549细胞的影响第36-39页
            2.2.4.1 人肺腺癌A549细胞形态观察第36-37页
            2.2.4.2 增殖实验第37页
            2.2.4.3 侵袭实验第37-38页
            2.2.4.4 迁移实验第38-39页
第三章 实验结果第39-50页
    3.1 人肺腺癌A549细胞的形态特征第39页
    3.2 人iPS细胞的形态特征第39-40页
    3.3 人iPS细胞外泌体的电镜结果第40-41页
    3.4 BCA蛋白浓度测定结果第41页
    3.5 人iPS细胞源外泌体特征蛋白CD63表达情况第41-42页
    3.6 人肺腺癌A549细胞用人iPS细胞外泌体培养后的形态变化第42-44页
    3.7 人肺腺癌A549细胞增殖实验第44-45页
    3.8 人肺腺癌A549细胞侵袭实验第45-47页
    3.9 人肺腺癌A549细胞迁移实验第47-50页
第四章 讨论第50-56页
    4.1 人肺腺癌A549细胞培养方法改进第50-51页
    4.2 iPS细胞的培养条件优化第51-52页
    4.3 人iPS细胞外泌体分离过程的讨论第52-53页
    4.4 人iPS细胞外泌体鉴定过程的讨论第53页
    4.5 人肺腺癌A549细胞形态变化的讨论第53-54页
    4.6 人肺腺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移能力变化的讨论第54-56页
第五章 结论与展望第56-58页
参考文献第58-68页
致谢第68页

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