| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11页 |
| 第一章 前言 | 第12-27页 |
| 1.1急性淋巴细胞白血病 | 第12-13页 |
| 1.2 Ph-like急性淋巴细胞白血病 | 第13-14页 |
| 1.3 Ph-like ALL分子遗传学异常 | 第14-18页 |
| 1.3.1 JAK激酶通路基因异常 | 第15-16页 |
| 1.3.2 ABL同源激酶基因异常 | 第16-17页 |
| 1.3.3 淋系发育相关转录因子基因异常 | 第17页 |
| 1.3.4 其他激酶基因异常 | 第17-18页 |
| 1.4 Ph-like ALL的治疗 | 第18-20页 |
| 1.5 Ph-like ALL的诊断 | 第20-22页 |
| 1.5.1 基因表达谱分析 | 第20页 |
| 1.5.2 磷酸化流式细胞术 | 第20-21页 |
| 1.5.3 细胞遗传学技术 | 第21页 |
| 1.5.4 基于NGS的方法 | 第21页 |
| 1.5.5 多重RT-PCR | 第21-22页 |
| 1.6 实时荧光PCR技术 | 第22-26页 |
| 1.6.1 实时PCR通用检测技术 | 第23-24页 |
| 1.6.2 实时PCR的应用 | 第24-26页 |
| 1.7 本论文的研究目的、内容和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 材料和方法 | 第27-46页 |
| 2.1 临床标本和细胞系 | 第27页 |
| 2.2 总RNA提取和逆转录 | 第27页 |
| 2.3 引物和探针设计 | 第27-35页 |
| 2.3.1 ABL1融合基因 | 第29-30页 |
| 2.3.2 ABL2融合基因 | 第30页 |
| 2.3.3 CSF1R融合基因 | 第30-31页 |
| 2.3.4 PDGFRB融合基因 | 第31-32页 |
| 2.3.5 JAK2融合基因 | 第32-33页 |
| 2.3.6 CRLF2融合基因 | 第33-34页 |
| 2.3.7 TSLP、NTRK3、TYK2和IL2RB融合基因 | 第34页 |
| 2.3.8 IKZF1缺失 | 第34-35页 |
| 2.3.9 GUSB | 第35页 |
| 2.4 阳性质粒的构建 | 第35-41页 |
| 2.4.1 重叠延伸法构建融合基因质粒的原理 | 第36页 |
| 2.4.2 TA克隆 | 第36-41页 |
| 2.4.3 阳性质粒拷贝数计算 | 第41页 |
| 2.5 媒介探针多重扩增曲线分析考察 | 第41-42页 |
| 2.5.1 媒介子序列确定 | 第41-42页 |
| 2.5.2 多重扩增曲线分析可行性考察 | 第42页 |
| 2.6 单重实时PCR体系建立 | 第42-43页 |
| 2.7 多重实时PCR体系建立 | 第43-44页 |
| 2.7.1 灵敏度实验 | 第44页 |
| 2.7.2 模拟实验 | 第44页 |
| 2.8 多重实时PCR体系的临床验证 | 第44-45页 |
| 2.9 微小残留病定量体系 | 第45-46页 |
| 第三章 结果与分析 | 第46-63页 |
| 3.1 多重实时PCR体系的设计 | 第46-47页 |
| 3.2 媒介探针体系建立与考察 | 第47-49页 |
| 3.2.1 媒介子序列的确定 | 第47-48页 |
| 3.2.2 媒介探针多重可行性考察 | 第48-49页 |
| 3.3 单重实时PCR体系的建立 | 第49-50页 |
| 3.4 多重实时PCR体系建立 | 第50-57页 |
| 3.4.1 特异性优化 | 第50-53页 |
| 3.4.2 检测灵敏度优化和考察 | 第53-55页 |
| 3.4.3 模拟实验 | 第55-57页 |
| 3.5 临床标本检测 | 第57-61页 |
| 3.6 微小残留病定量考察 | 第61-63页 |
| 第四章 讨论 | 第63-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 英文缩写索引 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |