| 摘要 | 第12-13页 |
| Abstract | 第13页 |
| 第一章 前言 | 第14-31页 |
| 1.1 FoxO蛋白家族 | 第15-23页 |
| 1.1.1 概述 | 第15页 |
| 1.1.2 FoxO蛋白家族的结构 | 第15-16页 |
| 1.1.3 FoxO蛋白家族表达及翻译后修饰 | 第16-20页 |
| 1.1.3.1 FoxO的转录调控 | 第16-17页 |
| 1.1.3.2 FoxO的磷酸化 | 第17-18页 |
| 1.1.3.3 FoxO的乙酰化 | 第18-20页 |
| 1.1.3.4 FoxO的泛素化与去泛素化 | 第20页 |
| 1.1.3.5 FoxO的甲基化 | 第20页 |
| 1.1.4 FoxO的生物学功能 | 第20-23页 |
| 1.1.4.1 FoxO参与细胞周期调控 | 第21页 |
| 1.1.4.2 FoxO参与细胞增殖与凋亡 | 第21-22页 |
| 1.1.4.3 FoxO参与细胞分化 | 第22页 |
| 1.1.4.4 FoxO参与抗氧化应激反应 | 第22页 |
| 1.1.4.5 FoxO参与细胞代谢 | 第22-23页 |
| 1.1.4.6 FoxO参与细胞自噬 | 第23页 |
| 1.1.4.7 FoxO参与DNA损伤应答 | 第23页 |
| 1.2 表观遗传调控 | 第23-27页 |
| 1.2.1 DNA甲基化 | 第24页 |
| 1.2.2 非编码RNA调控 | 第24页 |
| 1.2.3 组蛋白修饰 | 第24-27页 |
| 1.2.3.1 组蛋白乙酰化修饰 | 第25-26页 |
| 1.2.3.2 组蛋白甲基化修饰 | 第26-27页 |
| 1.3 DNA损伤修复 | 第27-29页 |
| 1.3.1 DNA损伤来源 | 第27页 |
| 1.3.2 DNA损伤修复途径 | 第27-28页 |
| 1.3.3 DNA损伤修复与肿瘤治疗 | 第28-29页 |
| 1.4 立题背景及意义 | 第29-31页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第31-57页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-37页 |
| 2.1.1 胞株 | 第31页 |
| 2.1.2 菌株 | 第31页 |
| 2.1.3 粒载体 | 第31-34页 |
| 2.1.3.1 pLV-H1-EF1α-puromycin/Blasticidin | 第31-32页 |
| 2.1.3.2 pGEX-4T-1 | 第32-33页 |
| 2.1.3.3 pET-21b | 第33页 |
| 2.1.3.4 pGL3 basic | 第33-34页 |
| 2.1.4 要试剂与材料 | 第34-35页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第35-37页 |
| 2.2 分子克隆相关实验方法 | 第37-42页 |
| 2.2.1 大肠杆菌感受态的制备 | 第37-38页 |
| 2.2.2 PCR相关实验 | 第38-39页 |
| 2.2.2.1 普通PCR反应 | 第38页 |
| 2.2.2.2 基因定点突变 | 第38-39页 |
| 2.2.3 DNA的琼脂糖凝胶电泳与回收 | 第39-40页 |
| 2.2.4 目的片段的酶切、连接与转化 | 第40页 |
| 2.2.5 质粒提取 | 第40-41页 |
| 2.2.5.1 质粒小提 | 第40-41页 |
| 2.2.5.2 质粒大提 | 第41页 |
| 2.2.6 基因组DNA的提取 | 第41-42页 |
| 2.3 RNA相关实验方法 | 第42-45页 |
| 2.3.1 RNA的提取 | 第42-43页 |
| 2.3.2 RNA的逆转录 | 第43页 |
| 2.3.3 实时荧光定量PCR (qRT-PCR) | 第43-44页 |
| 2.3.4 RNA干扰载体的构建 | 第44-45页 |
| 2.4 蛋白相关实验方法 | 第45-54页 |
| 2.4.1 全细胞蛋白样品的制备 | 第45页 |
| 2.4.2 蛋白浓度测定(BCA法) | 第45-46页 |
| 2.4.3 蛋白质免疫印迹 | 第46-48页 |
| 2.4.4 荧光素酶活性检测 | 第48-50页 |
| 2.4.5 免疫共沉淀相关实验 | 第50-51页 |
| 2.4.6 蛋白的体外相互作用实验 | 第51-52页 |
| 2.4.6.1 融合蛋白的表达与纯化 | 第51页 |
| 2.4.6.2 GST pull down实验 | 第51-52页 |
| 2.4.7 染色质免疫共沉淀 | 第52-54页 |
| 2.5 细胞相关实验方法 | 第54-56页 |
| 2.5.1 细胞的培养 | 第54-55页 |
| 2.5.2 细胞的传代 | 第55页 |
| 2.5.3 细胞转染以及病毒感染 | 第55-56页 |
| 2.6 数据统计分析和图片处理 | 第56-57页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第57-70页 |
| 3.1 结果 | 第57-67页 |
| 3.1.1 FoxO家族成员参与调控HR-X基因的表达 | 第57-58页 |
| 3.1.2 FoxO转录调控HR-X | 第58-61页 |
| 3.1.3 FoxO家族成员与HMD存在相互作用 | 第61-63页 |
| 3.1.4 FoxO通过DBD结构域与HMD相互作用 | 第63-64页 |
| 3.1.5 组蛋白修饰酶HMD参与调控HR-X基因的表达 | 第64-66页 |
| 3.1.6 下调HR-X让细胞对PARP抑制剂更敏感 | 第66-67页 |
| 3.2 讨论 | 第67-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
