| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩写说明 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-29页 |
| 1.1 碳水化合物结合区域(CBMs)的概念的提出 | 第12-13页 |
| 1.2 CBMs家族及分类 | 第13-16页 |
| 1.3 CBMs的命名 | 第16-17页 |
| 1.4 CBMs的空间结构 | 第17-24页 |
| 1.5 CBMs的功能 | 第24-27页 |
| 1.6 展望 | 第27-29页 |
| 第二章 基于Tet-on和Cre-loxP系统的丝状真菌遗传操作平台的构建 | 第29-50页 |
| 2.1 前言 | 第29-31页 |
| 2.2 仪器、材料与方法 | 第31-39页 |
| 2.2.1 仪器 | 第31-32页 |
| 2.2.2 试剂与培养基的制备 | 第32-33页 |
| 2.2.3 本章所用菌株 | 第33-34页 |
| 2.2.4 试验方法 | 第34-39页 |
| 2.2.5 Cre重组酶的表达及ptrA的删除 | 第39页 |
| 2.2.6 β-葡萄糖苷酶酶活的测定 | 第39页 |
| 2.3 结果 | 第39-47页 |
| 2.3.1 质粒的构建 | 第39-40页 |
| 2.3.2 pNPGase标准曲线 | 第40页 |
| 2.3.3 多西环素对草酸青霉生长的影响 | 第40-41页 |
| 2.3.4 Tet-on系统调控的Cre重组酶表达盒转化草酸青霉 | 第41-42页 |
| 2.3.5 用含有loxP位点的ptrA表达盒敲除草酸青霉ligD | 第42-43页 |
| 2.3.6 Cre重组酶的表达及ptrA的删除 | 第43-45页 |
| 2.3.7 ptrA的再利用及bglI的敲除 | 第45-47页 |
| 2.4 讨论 | 第47-48页 |
| 2.5 本章小结 | 第48-50页 |
| 第三章 表面负电荷的增加对纤维素酶CBMs吸附性质的影响分析 | 第50-76页 |
| 3.1 前言 | 第50-52页 |
| 3.2 仪器、试剂、材料与方法 | 第52-62页 |
| 3.2.1 仪器 | 第52-53页 |
| 3.2.2. 试剂与培养基的制备 | 第53-54页 |
| 3.2.3 酸不溶性玉米秸秆木质素的制备与成分分析 | 第54-55页 |
| 3.2.4 质粒的构建 | 第55-59页 |
| 3.2.5 蛋白的表达与纯化 | 第59-61页 |
| 3.2.6 蛋白吸附检测 | 第61页 |
| 3.2.7 糖化分析 | 第61页 |
| 3.2.8 本章所用标准曲线 | 第61-62页 |
| 3.3 结果 | 第62-72页 |
| 3.3.1 AICS-lignin的制备 | 第62页 |
| 3.3.2 GLC及其突变体的构建与表达 | 第62-64页 |
| 3.3.3 点突变构建表达质粒方法的改进 | 第64-65页 |
| 3.3.4 CBM1及其突变体表面电荷的分析 | 第65页 |
| 3.3.5 GLC吸附条件摸索 | 第65-66页 |
| 3.3.6 负电荷的增加对GLC吸附底物的影响 | 第66-67页 |
| 3.3.7 里氏木霉Cel7A中CBM点突变改造 | 第67-69页 |
| 3.3.8 里氏木霉Cel7A及其突变体的获得 | 第69-70页 |
| 3.3.9 Cel7A及其突变体的糖化分析 | 第70-72页 |
| 3.4 讨论 | 第72-75页 |
| 3.5 本章小结 | 第75-76页 |
| 第四章 正电荷化学药品对CBMs吸附性质的影响分析 | 第76-90页 |
| 4.1 前言 | 第76-77页 |
| 4.2 仪器、试剂、材料与方法 | 第77-81页 |
| 4.2.1 仪器 | 第77-78页 |
| 4.2.2.试剂与培养基的制备 | 第78-79页 |
| 4.2.3 蛋白的表达与纯化 | 第79页 |
| 4.2.4 蛋白吸附检测 | 第79页 |
| 4.2.5 糖化分析 | 第79页 |
| 4.2.6 蛋白浓度标准曲线的绘制 | 第79-80页 |
| 4.2.7 葡萄糖标准曲线的制备 | 第80页 |
| 4.2.8 纤维二糖标准曲线的绘制 | 第80-81页 |
| 4.3 结果 | 第81-85页 |
| 4.3.1 标准曲线及电泳结果 | 第81页 |
| 4.3.2 DTAB对GLC吸附率影响的分析 | 第81-82页 |
| 4.3.3 PolyDADMAC对GLC吸附率影响的分析 | 第82-83页 |
| 4.3.4 正电荷化学药品的添加对Cel7A糖化影响的分析 | 第83-84页 |
| 4.3.5 正电荷化学药品的添加对Cel7A突变体糖化影响的分析 | 第84-85页 |
| 4.4 讨论 | 第85-88页 |
| 4.5 本章小结 | 第88-90页 |
| 全文总结与展望 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-119页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第119-120页 |
| 攻读学位期间拟发表的学术论文 | 第120-121页 |
| 攻读学位期间参加学术论坛 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 附件 | 第123页 |
