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橡胶树HbGRX基因的克隆及其在死皮病发生过程中的功能分析

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 前言第11-21页
    1.1 橡胶树死皮的研究概述第11-13页
        1.1.1 橡胶树的死皮第11页
        1.1.2 我国橡胶树死皮病发生现状第11-12页
        1.1.3 橡胶树死皮形成的假说第12-13页
    1.2 橡胶树死皮植株树皮显微结构的研究第13-14页
        1.2.1 巴西橡胶树树皮结构研究现状第13页
        1.2.2 橡胶树死皮病的病因和解剖学特征第13-14页
    1.3 橡胶树死皮植株胶乳生理学研究第14-15页
        1.3.1 橡胶树胶乳各生理参数的作用第14页
        1.3.2 橡胶树死皮植株胶乳各生理研究第14-15页
    1.4 植物体内的活性氧第15-17页
        1.4.1 植物体内活性氧的产生第15页
        1.4.2 植物体内活性氧的清除第15-16页
        1.4.3 活性氧与橡胶树死皮病的关系第16-17页
    1.5 谷氧还蛋白与橡胶树死皮发生的关系第17-19页
        1.5.1 植物体内的谷氧还蛋白基因第17-18页
        1.5.2 谷氧还蛋白与橡胶树死皮的发生第18-19页
    1.6 研究目的意义及研究内容第19-21页
        1.6.1 本研究的目的意义第19页
        1.6.2 研究内容第19-20页
        1.6.3 本研究的技术路线第20-21页
2 材料与方法第21-36页
    2.1 实验材料与试剂第21-25页
        2.1.1 植物材料第21-22页
        2.1.2 载体与菌株第22页
        2.1.3 生化试剂与仪器设备第22-24页
        2.1.4 培养基的配制第24页
        2.1.5 试剂配制及物品准备第24-25页
    2.2 方法与步骤第25-36页
        2.2.1 橡胶树不同死皮程度植株树皮显微结构分析第25-26页
        2.2.2 橡胶树不同死皮程度植株的胶乳生理分析第26-27页
        2.2.3 橡胶树HbGRX基因的克隆及其在死皮发生过程中的功能分析第27页
        2.2.4 树皮RNA的提取第27页
        2.2.5 其他不同组织RNA的提取第27-28页
        2.2.6 引物设计第28页
        2.2.7 橡胶树cDNA的合成第28-29页
        2.2.8 反转录检测第29-30页
        2.2.9 目的基因的克隆第30-31页
        2.2.10 克隆载体的构建第31页
        2.2.11 目的基因的酶切和连接第31页
        2.2.12 目的基因转化大肠杆菌第31-32页
        2.2.13 提取重组质粒第32页
        2.2.14 HbGRX基因的生物信息学分析第32-33页
        2.2.15 重组质粒的转化及鉴定第33页
        2.2.16 菌体诱导表达条件的筛选第33页
        2.2.17 菌液总蛋白的提取第33页
        2.2.18 SDS-PAGE电泳检测第33-34页
        2.2.19 橡胶树HbGRX基因的亚细胞定位检测第34-35页
        2.2.20 基因的表达模式分析第35-36页
3 结果与分析第36-63页
    3.1 不同死皮程度橡胶树死皮部位割线处树皮显微结构分析第36-41页
        3.1.1 正常排胶橡胶树割线处树皮显微结构特点第36页
        3.1.2 不同死皮程度橡胶树死皮部位割线处树皮显微结构特点第36-38页
        3.1.3 不同死皮程度橡胶树树皮显微结构的统计分析第38-41页
    3.2 橡胶树不同死皮程度植株的胶乳生理分析第41-47页
        3.2.1 不同死皮程度橡胶树植株胶乳产量、干胶含量及胶乳pH值的变化第41页
        3.2.2 不同死皮程度植株胶乳硫醇、蔗糖、无机磷及粗酶液蛋白含量的变化第41-42页
        3.2.3 不同死皮程度植株胶乳黄色体破裂指数及镁离子含量的变化第42-47页
    3.3 橡胶树HbGRX基因的克隆及其在死皮发生过程中的功能分析第47-63页
        3.3.1 橡胶树树皮总RNA的提取与检测第47页
        3.3.2 巴西橡胶树HbGRX基因ORF序列的克隆与生物信息学分析第47-51页
        3.3.3 橡胶树HbGRX基因的同源性及进化树分析第51-52页
        3.3.4 橡胶树HbGRX基因的表达分析第52-60页
        3.3.5 橡胶树HbGRX基因的原核表达分析第60-61页
        3.3.6 橡胶树HbGRX基因的亚细胞定位第61-63页
4 讨论第63-68页
    4.1 不同死皮程度橡胶树死皮部位割线处树皮显微结构分析第63页
    4.2 橡胶树不同死皮程度植株的胶乳生理分析第63-65页
    4.3 橡胶树HbGRX基因的克隆及其在死皮发生过程中的功能分析第65-68页
        4.3.1 橡胶树的HbGRX蛋白是CPYC型谷氧还蛋白第65页
        4.3.2 橡胶树HbGRX基因定位在线粒体第65页
        4.3.3 橡胶树HbGRX基因的表达特性第65-68页
5 结论第68-69页
参考文献第69-77页
附录第77-78页
致谢第78页

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