摘要 | 第2-3页 |
ABSTRACT | 第3页 |
引言 | 第6-8页 |
第一章 材料与方法 | 第8-17页 |
1.1 材料 | 第8页 |
1.1.1 主要实验仪器 | 第8页 |
1.1.2 菌株与细胞株 | 第8页 |
1.2 方法 | 第8-17页 |
1.2.1 Jurkat细胞培养 | 第8-9页 |
1.2.2 逆转录病毒感染Jurkat细胞 | 第9-10页 |
1.2.3 pSUPER-siCD59质粒电转Jurkat细胞 | 第10-11页 |
1.2.4 RT-PCR检测mRNACD59表达 | 第11-13页 |
1.2.5 CD59抗体活化Jurkat细胞 | 第13页 |
1.2.6 荧光表达观察 | 第13-14页 |
1.2.7 MTT检测细胞增殖(/cck-8,对细胞数有要求) | 第14页 |
1.2.8 western-blot检测相关蛋白的表达 | 第14-16页 |
1.2.9 统计学分析 | 第16-17页 |
第二章 实验结果 | 第17-23页 |
2.1 JURKAT细胞的培养 | 第17页 |
2.2 荧光显微镜观察荧光表达 | 第17-18页 |
2.3 重组质粒的提取与鉴定 | 第18-19页 |
2.3.1 pSUPER-siCD59质粒的提取检测 | 第18页 |
2.3.2 重组质粒的鉴定 | 第18-19页 |
2.4 PSUPER-SICD59质粒电转JURKAT (GFP)细胞 | 第19页 |
2.5 RT-PCR检测各组细胞CD59 MRNA的表达变化 | 第19-20页 |
2.6 激光共聚焦显微镜下观察CD59和LAT-GFP的分布 | 第20-21页 |
2.6.1 CD59抗体活化前CD59分子和LAT-GFP分子在Jurkat(GFP标记,绿光)细胞上的表达及位置分布 | 第20-21页 |
2.6.2 CD59抗体活化后CD59分子和LAT-GFP分子在Jurkat细胞上的表达及分布 | 第21页 |
2.7 功能检测 | 第21-23页 |
2.7.1 MTT检测细胞增殖 | 第21-22页 |
2.7.2 western-blot检测各组细胞蛋白表达 | 第22-23页 |
第三章 讨论 | 第23-24页 |
结论 | 第24-25页 |
参考文献 | 第25-26页 |
综述 | 第26-40页 |
综述参考文献 | 第33-40页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第40-41页 |
附录1 试剂配制 | 第41-45页 |
附录2 中英文符号对照表 | 第45-46页 |
附录3 BCA蛋白测定试剂盒说明书 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |