| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩写表 | 第8-9页 |
| 目次 | 第9-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-33页 |
| ·引言 | 第13页 |
| ·无细胞蛋白质合成系统的基本介绍 | 第13-17页 |
| ·无细胞蛋白质合成系统的来源及比较 | 第17-20页 |
| ·大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统 | 第18页 |
| ·麦胚无细胞蛋白质合成系统 | 第18-19页 |
| ·兔网织红细胞无细胞蛋白质合成系统 | 第19页 |
| ·昆虫细胞无细胞蛋白质合成系统 | 第19-20页 |
| ·大肠杆菌无细胞抽提物制备方法研究进展 | 第20-23页 |
| ·大肠杆菌培养方法 | 第21页 |
| ·大肠杆菌的基因工程改造 | 第21-22页 |
| ·大肠杆菌无细胞抽提物制备工艺 | 第22-23页 |
| ·大肠杆菌无细胞系统反应体系研究进展 | 第23-28页 |
| ·能量再生系统 | 第23-27页 |
| ·无细胞反应系统的模式 | 第27-28页 |
| ·昆虫细胞无细胞抽提物制备方法研究进展 | 第28页 |
| ·昆虫细胞无细胞系统反应体系研究进展 | 第28-29页 |
| ·无细胞生物学的应用 | 第29-32页 |
| ·结构蛋白质学 | 第29页 |
| ·高通量和功能蛋白质组学 | 第29-30页 |
| ·蛋白质进化 | 第30页 |
| ·非天然氨基酸和体外蛋白质标记 | 第30-31页 |
| ·微型化和蛋白质芯片 | 第31页 |
| ·诊断和治疗 | 第31-32页 |
| ·本工作的拟研究思路及研究内容 | 第32-33页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第33-38页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·质粒 | 第33页 |
| ·菌株 | 第33页 |
| ·家蚕 | 第33页 |
| ·仪器与试剂 | 第33-34页 |
| ·主要实验仪器 | 第33页 |
| ·工具酶和主要试剂 | 第33-34页 |
| ·实验及分析测试方法 | 第34-38页 |
| ·培养基 | 第34-35页 |
| ·分子克隆相关实验 | 第35页 |
| ·pH测定 | 第35页 |
| ·细胞浓度测定 | 第35页 |
| ·SDS-PAGE蛋白质电泳 | 第35页 |
| ·Western Blot分析 | 第35-36页 |
| ·绿色荧光蛋白质荧光活性测定 | 第36页 |
| ·荧光素酶活性测定 | 第36-37页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第37-38页 |
| 第三章 大肠杆菌无细胞抽提物的制备 | 第38-53页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·材料和方法 | 第38-43页 |
| ·实验材料 | 第38-40页 |
| ·无细胞表达质粒pIVEX2.4c-eGFP的构建 | 第40-41页 |
| ·表达模板的制备 | 第41-42页 |
| ·大肠杆菌生长曲线的测定 | 第42页 |
| ·大肠杆菌无细胞抽提物的制备 | 第42页 |
| ·大肠杆菌无细胞抽提物活性验证 | 第42页 |
| ·大肠杆菌无细胞系统构建 | 第42-43页 |
| ·SDS-PAGE检测 | 第43页 |
| ·绿色荧光蛋白质活性测定 | 第43页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-52页 |
| ·pIVEX2.4c-eGFP质粒构建 | 第43-46页 |
| ·大肠杆菌生长曲线测定 | 第46-47页 |
| ·大肠杆菌无细胞抽提物活性验证 | 第47-48页 |
| ·大肠杆菌无细胞系统构建 | 第48-50页 |
| ·绿色荧光蛋白质的活性检测 | 第50-51页 |
| ·本实验的工作与其他国内研究的比较 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第四章 家蚕丝腺无细胞系统的构建 | 第53-69页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·材料和方法 | 第53-58页 |
| ·实验材料 | 第53-55页 |
| ·表达模板的构建 | 第55-56页 |
| ·表达模板的制备 | 第56页 |
| ·家蚕丝腺无细胞抽提物的制备 | 第56-57页 |
| ·家蚕无细胞反应系统构建 | 第57页 |
| ·荧光素酶活性的测定 | 第57页 |
| ·家蚕丝腺无细胞系统反应的时间曲线测定 | 第57页 |
| ·家蚕丝腺无细胞系统反应体系的优化 | 第57-58页 |
| ·家蚕丝腺无细胞系统与商业化无细胞产品的比较 | 第58页 |
| ·SDS-PAGE和Western-Blot分析 | 第58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-68页 |
| ·质粒构建 | 第58页 |
| ·家蚕丝腺无细胞系统反应的时间曲线测定 | 第58-59页 |
| ·家蚕丝腺无细胞系统反应体系的优化 | 第59-64页 |
| ·家蚕丝腺无细胞系统与商业化无细胞产品的比较 | 第64-65页 |
| ·SDS-PAGE和Western-Blot分析 | 第65-66页 |
| ·利用家蚕丝腺蛋白质启动子构建无细胞系统的探索 | 第66-68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 第五章 结论与展望 | 第69-71页 |
| ·结论 | 第69-70页 |
| ·展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 作者简历 | 第80页 |