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甘蓝型油菜种皮颜色基因的精细定位与种皮转录组分析

摘要第7-9页
Abstract第9-11页
缩略语表第12-13页
1 文献综述第13-34页
    1.1 黄籽油菜的性状特点第13-15页
    1.2 油菜种皮颜色的遗传研究第15-17页
    1.3 油菜种皮颜色基因的定位和克隆第17-21页
        1.3.1 白菜型油菜种皮颜色基因的定位和克隆第18页
        1.3.2 芥菜型油菜种皮颜色基因的定位和克隆第18-19页
        1.3.3 埃塞俄比亚芥种皮颜色基因的定位第19页
        1.3.4 甘蓝型油菜种皮颜色基因的定位第19-20页
        1.3.5 油菜类黄酮途径基因的同源克隆第20-21页
    1.4 油菜黄籽性状的形成机制第21-27页
        1.4.1 拟南芥和甘蓝型油菜种皮结构第21-22页
        1.4.2 拟南芥种皮颜色形成机制第22-25页
        1.4.3 甘蓝型油菜种皮颜色形成机制的初步探讨第25-27页
    1.5 芸薹属植物基因定位的策略第27-33页
        1.5.1 图位克隆第27-29页
        1.5.2 重测序分析第29-31页
        1.5.3 转录组测序分析第31-33页
    1.6 本研究的目的和意义第33-34页
2 材料和方法第34-46页
    2.1 试验材料第34-35页
    2.2 种子含油量的测定第35-36页
        2.2.1 NIRS法测定甘蓝型油菜种子品质第35页
        2.2.2 气相色谱内标法检测种子脂肪酸含量第35-36页
    2.3 分子标记分析第36-41页
        2.3.1 油菜DNA的提取第36页
        2.3.2 AFLP标记分析第36-37页
        2.3.3 SSR标记的开发第37-38页
        2.3.4 IP标记的开发第38页
        2.3.5 基于SNP芯片的SNP引物开发第38-39页
        2.3.6 全基因组重测序分析第39-40页
        2.3.7 连锁图谱构建第40-41页
    2.4 种皮类黄酮含量的检测第41-42页
        2.4.1 原花青素的香草醛和DMACA检测第41页
        2.4.2 种皮中代谢物的粗提取及LC-MS/MS分析第41-42页
        2.4.3 不溶性原花青素含量的检测第42页
    2.5 种皮转录组分析第42-46页
        2.5.1 RNA的提取、cDNA文库的构建和测序第42-43页
        2.5.2 RNA-seq数据的处理第43-45页
        2.5.3 qRT-PCR验证第45-46页
3 结果与分析第46-92页
    3.1 甘蓝型黄籽、黑/褐籽油菜成熟种子的品质特征第46-48页
    3.2 种皮颜色基因D的定位第48-56页
        3.2.1 基于白菜基因组信息开发SSR、IP、SNP标记第48-50页
        3.2.2 基于AFLP标记和甘蓝型油菜基因组信息开发SSR标记第50-51页
        3.2.3 基于重测序数据开发标记第51-54页
        3.2.4 种皮颜色基因D的遗传定位与定位区段的共线性分析第54-56页
    3.3 甘蓝型黄籽、黑/褐籽油菜种子发育过程中种皮的类黄酮含量比较分析第56-63页
        3.3.1 甘蓝型黄籽、黑/褐籽油菜种皮的化学染色第56-58页
        3.3.2 甘蓝型黄籽、黑/褐籽油菜种皮可溶性类黄酮含量的比较第58-62页
        3.3.3 甘蓝型黄籽、黑/褐籽油菜不溶性原花青素含量的比较第62-63页
    3.4 甘蓝型黄籽、褐籽油菜近等基因系种皮的转录组比较分析第63-90页
        3.4.1 RNA-seq数据分析第63-66页
        3.4.2 甘蓝型黄籽、褐籽油菜近等基因系种皮差异表达基因的筛选第66-68页
        3.4.3 黄籽、褐籽种皮差异表达基因的GO和KEGG富集分析第68-72页
        3.4.4 黄籽、褐籽种皮中类黄酮合成相关基因的表达水平比较分析第72-86页
        3.4.5 差异表达的转录因子基因的筛选第86-88页
        3.4.6 qRT-PCR验证第88-90页
    3.5 种皮颜色基因D定位区间的候选基因的筛选第90-92页
4 讨论第92-100页
    4.1 比较基因组与基于WGR的BSA在油菜基因定位中的应用第92-94页
    4.2 甘蓝型油菜种皮颜色基因定位的复杂性第94-95页
    4.3 原花青素的合成和积累是甘蓝型黄籽、褐籽油菜种皮颜色差异的主要原因第95-97页
    4.4 参与类黄酮合成的新转录因子第97-99页
    4.5 下一步研究计划第99-100页
参考文献第100-122页
附录第122-140页
    附录1 LC-ESI-MS/MS检测的431种代谢物第122-133页
    附录2 qPCR所用的基因及引物序列第133-135页
    附录3 不同发育时期的种皮DEGs的GO富集分析结果第135-139页
    附录4 作者简介和研究生阶段发表的文章第139-140页
致谢第140-142页

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