| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| abstract | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第19-30页 |
| 1.1 番茄果实采后贮藏的生物学基础与保鲜技术应用现状综述 | 第19-21页 |
| 1.1.1 番茄果实采后研究重要意义及其生理生化变化 | 第19-20页 |
| 1.1.2 番茄贮藏过程中的保鲜技术概述 | 第20-21页 |
| 1.2 采后果实后熟衰老与抗氧化系统 | 第21-23页 |
| 1.2.1 植物活性氧的产生及抗氧化系统 | 第21-22页 |
| 1.2.2 果实后熟衰老过程中的活性氧代谢 | 第22-23页 |
| 1.3 硫化氢信号分子研究现状 | 第23-25页 |
| 1.3.1 硫化氢简介及其在植物体内参与的代谢途径 | 第23-24页 |
| 1.3.2 硫化氢调控植物成熟衰老的研究进展 | 第24-25页 |
| 1.4 氰丙氨酸合成酶参与抗氰代谢通路及相关研究进展 | 第25-27页 |
| 1.4.1 氰丙氨酸合成酶的解氰作用及氰化物同化通路 | 第25-26页 |
| 1.4.2 氰丙氨酸合成酶生物功能研究进展 | 第26-27页 |
| 1.5 乙烯的性质以及乙烯、H_2S、CAS三者之间的联系 | 第27-28页 |
| 1.6 课题研究的目的、意义及内容 | 第28-30页 |
| 1.6.1 课题研究的目的和意义 | 第28页 |
| 1.6.2 课题研究的内容 | 第28-30页 |
| 第二章 H_2S对番茄果实抗氧化代谢相关酶和抗氰代谢相关基因CAS表达的影响 | 第30-45页 |
| 2.1 实验材料、试剂及仪器 | 第30页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第30页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-34页 |
| 2.2.1 材料处理及样品制备 | 第30-31页 |
| 2.2.2 ·O~(2-)、H_2O_2和MDA含量的测定 | 第31页 |
| 2.2.3 CAT、APX、POD和SOD活性的测定 | 第31-32页 |
| 2.2.4 PAL、LOX和PPO活性的测定 | 第32-33页 |
| 2.2.5 番茄果肉中总RNA的提取与cDNA的合成 | 第33页 |
| 2.2.6 Real-timePCR引物设计和反应体系 | 第33-34页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第34-43页 |
| 2.3.1 H_2S对番茄贮藏过程中·O~(2-)产生速率、H_2O_2和MDA含量的影响 | 第34-36页 |
| 2.3.2 H_2S对番茄贮藏过程中CAT、APX、POD和SOD酶活性的影响 | 第36-38页 |
| 2.3.3 H_2S对番茄贮藏过程中PAL、LOX和PPO酶活性的影响 | 第38-40页 |
| 2.3.4 H_2S对番茄贮藏过程中抗氧化相关基因表达的影响 | 第40-41页 |
| 2.3.5 H_2S对番茄贮藏过程中CAS氰化物同化通路相关基因表达的影响 | 第41-43页 |
| 2.4 本章小结 | 第43-45页 |
| 第三章 番茄CAS家族基因缺失突变体及过表达体植株的构建及筛选 | 第45-75页 |
| 3.1 实验材料、试剂及仪器 | 第45-46页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第45页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第45页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第45-46页 |
| 3.2 实验方法 | 第46-53页 |
| 3.2.1 氰丙氨酸合成酶的生物信息学分析 | 第46页 |
| 3.2.2 CAS1、CAS2基因Crispr-Cas9敲除载体的构建 | 第46-49页 |
| 3.2.3 CAS1、CAS2基因过表达载体的构建 | 第49-50页 |
| 3.2.4 CAS1、CAS2基因的番茄遗传转化以及缺失体和过表达体植株的筛选 | 第50-52页 |
| 3.2.5 CAS1、CAS2基因GFP载体的构建以及瞬时转化烟草的表达分析 | 第52-53页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第53-74页 |
| 3.3.1 氰丙氨酸合成酶在细胞中的定位及其进化树分析、蛋白质结构域预测和跨膜分析 | 第53-56页 |
| 3.3.2 CAS1、CAS2基因绿色荧光蛋白融合表达载体的构建及烟草亚细胞定位分析 | 第56-60页 |
| 3.3.3 CAS1、CAS2基因Crispr/Cas9敲除载体的构建 | 第60-65页 |
| 3.3.4 CAS1、CAS2基因过表达载体的构建 | 第65-68页 |
| 3.3.5 敲除载体和过表达载体转化农杆菌转化及PCR鉴定 | 第68-69页 |
| 3.3.6 农杆菌介导的CAS1和CAS2基因的番茄转化 | 第69-70页 |
| 3.3.7 CAS基因编辑植株和高表达植株的鉴定 | 第70-74页 |
| 3.4 本章小结 | 第74-75页 |
| 第四章 转基因番茄愈伤组织中CAS1基因在抗干旱及高盐胁迫中的作用 | 第75-83页 |
| 4.1 实验材料、试剂及仪器 | 第75页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第75页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第75页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第75页 |
| 4.2 实验方法 | 第75-77页 |
| 4.2.0 外植体消毒及愈伤组织的诱导 | 第75-76页 |
| 4.2.1 干旱处理 | 第76页 |
| 4.2.2 高盐处理 | 第76页 |
| 4.2.3 含水量测定 | 第76页 |
| 4.2.4 细胞膜渗透率的测定 | 第76-77页 |
| 4.2.5 番茄干旱相关基因表达量检测 | 第77页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第77-82页 |
| 4.3.1 番茄CAS家族基因在野生型愈伤组织中对干旱和高盐的敏感性分析 | 第77-78页 |
| 4.3.2 野生型、CAS1敲除和过表达番茄愈伤组织对干旱胁迫的响应 | 第78-80页 |
| 4.3.3 野生型、CAS1敲除和过表达番茄愈伤组织对高盐胁迫的响应 | 第80-82页 |
| 4.4 本章小结 | 第82-83页 |
| 第五章 讨论与展望 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-92页 |
| 硕士期间参加学术活动和发表论文 | 第92-93页 |
