致谢 | 第7-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
abstract | 第9-10页 |
第一章 绪论 | 第16-26页 |
1.1 拟南芥简介 | 第16页 |
1.2 干旱胁迫对农业发展的影响 | 第16-17页 |
1.2.1 世界范围干旱地区的分布 | 第16页 |
1.2.2 干旱对我国农业发展的影响 | 第16-17页 |
1.3 干旱胁迫对植物的影响 | 第17-20页 |
1.3.1 干旱胁迫对植物根系的影响 | 第17-18页 |
1.3.2 干旱胁迫对植物叶片的影响 | 第18页 |
1.3.3 干旱胁迫对植物生长发育的影响 | 第18-19页 |
1.3.4 干旱对植物增殖细胞的影响 | 第19-20页 |
1.4 植物响应干旱胁迫的机制 | 第20-23页 |
1.4.1 气孔的调节 | 第20-21页 |
1.4.2 渗透调节 | 第21页 |
1.4.3 活性氧的清除 | 第21-22页 |
1.4.4 植物激素的调控 | 第22-23页 |
1.5 铁元素对植物的影响 | 第23-24页 |
1.6 FER铁蛋白基因家族的结构与功能 | 第24-25页 |
1.7 立项依据及研究意义 | 第25-26页 |
第二章 实验材料及方法 | 第26-48页 |
2.1 实验材料 | 第26页 |
2.1.1 植物材料为 | 第26页 |
2.1.2 菌株与质粒载体材料 | 第26页 |
2.2 常用试剂与配制 | 第26-32页 |
2.2.1 常用分子试剂盒 | 第26页 |
2.2.2 常用酶类 | 第26页 |
2.2.3 常用生化试剂 | 第26-27页 |
2.2.4 常用试剂与溶液的配制 | 第27-31页 |
2.2.5 常用试剂与溶液的配制 | 第31-32页 |
2.3 主要仪器与设备 | 第32-33页 |
2.4 实验方法 | 第33-48页 |
2.4.1 消毒与灭菌 | 第33-34页 |
2.4.2 拟南芥的培育 | 第34-35页 |
2.4.3 根长及鲜重的测量 | 第35页 |
2.4.4 拟南芥植株总RNA的提取(Trizol法) | 第35-36页 |
2.4.5 RNA逆转录合成cDNA | 第36-37页 |
2.4.6 拟南芥植株全基因组DNA提取(CTAB法) | 第37-38页 |
2.4.7 琼脂糖凝胶电泳检测核酸 | 第38页 |
2.4.8 琼脂糖凝胶电泳胶回收(试剂盒回收) | 第38-39页 |
2.4.9 制备大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第39页 |
2.4.10 大肠杆菌DH5α感受态细胞的热激转化法 | 第39-40页 |
2.4.11 高纯度提取质粒DNA(Kit) | 第40页 |
2.4.12 制备农杆菌GV3101感受态细胞 | 第40-41页 |
2.4.13 电击转化农杆菌GV3101感受态细胞 | 第41页 |
2.4.14 PCR产物纯化(Kit) | 第41-42页 |
2.4.15 植物表达载体的构建 | 第42-43页 |
2.4.16 转基因植株的获得(浸花法) | 第43-44页 |
2.4.17 转基因植株的筛选鉴定 | 第44页 |
2.4.18 农杆菌侵染烟草体内瞬时表达及亚细胞定位的检测 | 第44-45页 |
2.4.19 基因表达水平的检测(实时荧光定量PCR法) | 第45-46页 |
2.4.20 实验所用引物清单 | 第46-47页 |
2.4.21 数据处理及统计 | 第47-48页 |
第三章 实验结果与分析 | 第48-75页 |
3.1 FER2基因的表达模式 | 第48-52页 |
3.1.1 FER2基因的组织特异性表达 | 第48页 |
3.1.2 FER2基因的亚细胞定位 | 第48-49页 |
3.1.3 FER2基因的进化树及蛋白质序列的同源性分析 | 第49-51页 |
3.1.4 FER2基因的干旱诱导表达 | 第51-52页 |
3.2 fer2功能缺失突变体对干旱胁迫的响应 | 第52-64页 |
3.2.1 fer2突变体的敲除鉴定 | 第52-53页 |
3.2.2 野生型和fer2突变体在正常培养下的生长发育表型 | 第53-54页 |
3.2.3 甘露醇模拟干旱对突变体植株幼苗的影响 | 第54-55页 |
3.2.4 土壤培养干旱胁迫对突变体植株的影响 | 第55-57页 |
3.2.5 Fe胁迫对突变体植株的影响 | 第57-58页 |
3.2.6 ABA胁迫对突变体植株的影响 | 第58-60页 |
3.2.7 过氧化氢胁迫对突变体植株的影响 | 第60-62页 |
3.2.8 Nacl、Kcl胁迫对突变体植株的影响 | 第62-63页 |
3.2.9 其他金属胁迫对突变体植株的影响 | 第63-64页 |
3.3 相关载体的构建 | 第64-73页 |
3.3.1 构建FER2基因过表达载体 | 第64-68页 |
3.3.2 构建FER2基因GUS载体 | 第68-73页 |
3.4 FER2基因在拟南芥干旱胁迫响应中的作用机理 | 第73-75页 |
第四章 讨论与展望 | 第75-77页 |
4.1 结果与讨论 | 第75-76页 |
4.2 后续工作展望 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-84页 |
攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第84-85页 |