摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
引言 | 第7-8页 |
缩略语与符号表 | 第8-13页 |
第一章 综述 | 第13-21页 |
1.1 肿瘤标志物 | 第13-14页 |
1.2 CA19-9 概述 | 第14-16页 |
1.2.1 CA19-9 分子结构 | 第14页 |
1.2.2 CA19-9 生物表达特性 | 第14页 |
1.2.3 与CA19-9 相关肿瘤 | 第14-16页 |
1.3 CA19-9 的主要检测方法 | 第16-20页 |
1.3.1 放射免疫测定法 | 第16-17页 |
1.3.2 酶联免疫法 | 第17页 |
1.3.3 化学发光免疫分析法 | 第17-18页 |
1.3.4 电化学发光免疫法 | 第18页 |
1.3.5 荧光免疫分析法 | 第18-19页 |
1.3.6 胶体金免疫层析法 | 第19页 |
1.3.7 时间分辨荧光免疫层析法 | 第19-20页 |
1.4 本研究目的意义 | 第20页 |
1.5 本研究的主要内容 | 第20-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-47页 |
2.1 研究材料 | 第21-32页 |
2.1.1 免疫原 | 第21页 |
2.1.2 实验动物与细胞株 | 第21页 |
2.1.3 临床血清样本 | 第21页 |
2.1.4 主要试剂及材料 | 第21-22页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第22-23页 |
2.1.6 主要溶液配制 | 第23-32页 |
2.2 实验方法 | 第32-47页 |
2.2.1 CA19-9 参考品的制备 | 第32-33页 |
2.2.2 CA19-9 室内参考品稳定性评价 | 第33页 |
2.2.3 CA19-9 单克隆抗体的制备 | 第33-38页 |
2.2.4 CA19-9 荧光免疫层析检测方法的初步建立 | 第38-40页 |
2.2.5 检测试纸条优化 | 第40-45页 |
2.2.6 荧光定量检测试纸条的性能测定 | 第45-47页 |
第三章 结果与分析 | 第47-63页 |
3.1 CA19-9 室内参考品制备 | 第47-48页 |
3.1.1 CA19-9 参考品的制备 | 第47页 |
3.1.2 CA19-9 室内参考品稳定性评价 | 第47-48页 |
3.2 CA19-9 单克隆抗体的制备 | 第48-52页 |
3.2.1 间接ELISA检测方法的建立 | 第48页 |
3.2.2 尾血效价检测结果 | 第48-49页 |
3.2.3 细胞融合及克隆化筛选结果 | 第49页 |
3.2.4 细胞株稳定性检测结果 | 第49-50页 |
3.2.5 腹水效价检测结果 | 第50页 |
3.2.6 单克隆抗体腹水收率检测 | 第50页 |
3.2.7 单克隆抗体纯度鉴定 | 第50-51页 |
3.2.8 单克隆抗体亚型鉴定 | 第51页 |
3.2.9 单克隆抗体特异性鉴定 | 第51-52页 |
3.2.10 ELISA法CA19-9 单克隆抗体配对结果 | 第52页 |
3.3 CA19-9 荧光免疫层析检测试纸条优化结果 | 第52-58页 |
3.3.1 荧光免疫层析法CA19-9 单克隆抗体配对结果 | 第52页 |
3.3.2 最适荧光微球的选择 | 第52-53页 |
3.3.3 NC膜的选择 | 第53页 |
3.3.4 CA19-9 标记抗体量、复溶倍数、包被抗体浓度的筛选 | 第53-55页 |
3.3.5 包被液的筛选 | 第55-56页 |
3.3.6 最适EDC量与活化时间的确定 | 第56页 |
3.3.7 标记缓冲液pH影响 | 第56-57页 |
3.3.8 微球复溶保护液的优化结果 | 第57-58页 |
3.3.9 微球结合垫处理液的优化结果 | 第58页 |
3.3.10 反应时间确定 | 第58页 |
3.4 荧光定量检测试纸条的性能测定 | 第58-63页 |
3.4.1 试纸条标准曲线 | 第58-59页 |
3.4.2 试纸条最低检出限 | 第59-60页 |
3.4.3 试纸条特异性 | 第60页 |
3.4.4 试纸条精密性 | 第60页 |
3.4.5 回收实验 | 第60-61页 |
3.4.6 试纸条稳定性 | 第61页 |
3.4.7 方法学比对 | 第61-63页 |
第四章 讨论 | 第63-65页 |
4.1 CA19-9 配对抗体的筛选 | 第63页 |
4.2 CA19-9 荧光免疫层析检测方法的建立 | 第63-64页 |
4.3 未来工作 | 第64-65页 |
第五章 结论 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
致谢 | 第73-75页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第75-76页 |