| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文缩写词 | 第15-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-27页 |
| 1.1 鲍曼不动杆菌 | 第17-18页 |
| 1.1.1 概述 | 第17页 |
| 1.1.2 流行病学 | 第17页 |
| 1.1.3 致病性 | 第17-18页 |
| 1.2 鲍曼不动杆菌的耐药趋势及其耐药机制 | 第18-21页 |
| 1.2.1 耐药趋势 | 第18-19页 |
| 1.2.2 耐药机制 | 第19-21页 |
| 1.2.2.1 gyrA和parC基因变异 | 第19-20页 |
| 1.2.2.2 外排泵机制 | 第20页 |
| 1.2.2.3 生物被膜的药物屏蔽机制 | 第20页 |
| 1.2.2.4 外模孔蛋白的缺失 | 第20-21页 |
| 1.2.2.5 药物灭活酶 | 第21页 |
| 1.2.2.6 喹诺酮类耐药基因 | 第21页 |
| 1.3 鲍曼不动杆菌的喹诺酮类耐药基因研究进展 | 第21-23页 |
| 1.3.1 喹诺酮类抗生素 | 第21-22页 |
| 1.3.2 喹诺酮类耐药基因qnr | 第22-23页 |
| 1.4 相关技术的发展现状和趋势 | 第23-26页 |
| 1.4.1 传统的细菌鉴定和药敏检测方法 | 第24页 |
| 1.4.2 分子生物学技术在细菌种属鉴定中的应用 | 第24-25页 |
| 1.4.3 分子生物学技术在细菌耐药性检测中的应用 | 第25-26页 |
| 1.5 研究的目的及其意义 | 第26-27页 |
| 第二章 鲍曼不动杆菌鉴定体系的建立 | 第27-45页 |
| 2.1 材料与方法 | 第27-29页 |
| 2.1.1 菌株 | 第27-28页 |
| 2.1.2 试剂 | 第28页 |
| 2.1.3 仪器 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-35页 |
| 2.2.1 菌种培养及基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.2.2 特异基因的筛选 | 第30-31页 |
| 2.2.3 引物设计及合成 | 第31页 |
| 2.2.4 PCR及LAMP技术反应体系的建立 | 第31-32页 |
| 2.2.5 PCR和LAMP鉴定体系的特异性评估 | 第32页 |
| 2.2.6 PCR和LAMP鉴定体系灵敏度评估 | 第32-35页 |
| 2.2.6.1 阳性质粒的构建 | 第32-34页 |
| 2.2.6.2 菌液模板的制作 | 第34页 |
| 2.2.6.3 PCR及LAMP法对鉴定体系的灵敏度评估 | 第34-35页 |
| 2.2.7 LAMP法可视化实验 | 第35页 |
| 2.2.7.1 SYBRGreenI染料可视化实验 | 第35页 |
| 2.2.7.2 Gelstain染料可视化实验 | 第35页 |
| 2.3 特异基因鉴定体系的建立 | 第35-42页 |
| 2.3.1 PCR法鉴定体系的特异性评估 | 第35-36页 |
| 2.3.2 LAMP法鉴定体系的特异性评估 | 第36-37页 |
| 2.3.3 PCR法鉴定体系的灵敏度评估 | 第37-39页 |
| 2.3.4 LAMP法鉴定体系的灵敏度评估 | 第39-41页 |
| 2.3.5 LAMP产物可视化 | 第41-42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-45页 |
| 第三章 鲍曼不动杆菌喹诺酮类耐药基因qnr的PCR鉴定 | 第45-55页 |
| 3.1 材料与方法 | 第45-47页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第45-47页 |
| 3.1.1.1 菌株 | 第45-46页 |
| 3.1.1.2 试剂 | 第46页 |
| 3.1.1.3 仪器 | 第46-47页 |
| 3.2 实验方法 | 第47-49页 |
| 3.2.1 鲍曼不动杆菌基因组DNA的提取 | 第47页 |
| 3.2.2 耐药基因及耐药信息查找 | 第47页 |
| 3.2.3 耐药基因引物设计及PCR反应体系建立 | 第47-48页 |
| 3.2.4 耐药基因qnr阳性质粒的构建 | 第48页 |
| 3.2.5 耐药基因检测体系的建立 | 第48页 |
| 3.2.6 耐药基因检测体系的灵敏度评估 | 第48-49页 |
| 3.3 实验结果 | 第49-53页 |
| 3.3.1 qnr耐药基因检测体系的建立 | 第49-51页 |
| 3.3.1.1 qnrA耐药基因检测体系的建立 | 第49页 |
| 3.3.1.2 qnrB耐药基因检测体系的建立 | 第49-50页 |
| 3.3.1.3 qnrS耐药基因检测体系的建立 | 第50-51页 |
| 3.3.2 耐药基因检测体系的灵敏度评估 | 第51-53页 |
| 3.3.2.1 qnrA耐药基因检测体系的灵敏度评估 | 第51页 |
| 3.3.2.2 qnrB耐药基因检测体系的灵敏度评估 | 第51-52页 |
| 3.3.2.3 qnrS耐药基因检测体系的灵敏度评估 | 第52-53页 |
| 3.4 讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 多重PCR技术在鉴定菌种及其耐药基因中的应用 | 第55-70页 |
| 4.1 材料与方法 | 第56-57页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第56-57页 |
| 4.1.1.1 菌株 | 第56页 |
| 4.1.1.2 试剂 | 第56页 |
| 4.1.1.3 仪器 | 第56-57页 |
| 4.2 实验方法 | 第57-59页 |
| 4.2.1 特异基因引物的再设计及PCR反应体系的建立 | 第57-58页 |
| 4.2.2 多重PCR体系的建立 | 第58页 |
| 4.2.3 多重PCR灵敏度的评估 | 第58-59页 |
| 4.3 实验结果 | 第59-67页 |
| 4.3.1 特异基因鉴定体系的建立 | 第59-60页 |
| 4.3.2 多重PCR体系的建立 | 第60-66页 |
| 4.3.3 多重PCR灵敏度的评估 | 第66-67页 |
| 4.4 讨论 | 第67-70页 |
| 第五章 全文总结及展望 | 第70-72页 |
| 5.1 全文总结 | 第70-71页 |
| 5.2 展望 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 主要参考文献 | 第74-82页 |
| 附录 A: 攻读硕士期间发表论文及申请专利目录 | 第82页 |
