摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第16-27页 |
1.1 病原学 | 第16-18页 |
1.1.1 遗传学特征 | 第16-17页 |
1.1.2 病毒的宿主受体与感染 | 第17-18页 |
1.2 流行病学 | 第18-20页 |
1.2.1 传染源及传播方式 | 第18页 |
1.2.2 病毒的抗原易变性 | 第18-19页 |
1.2.3 流感大流行 | 第19页 |
1.2.4 临床表现 | 第19页 |
1.2.5 实验室检查 | 第19-20页 |
1.2.6 病原学检查 | 第20页 |
1.2.7 影像学检查 | 第20页 |
1.3 致病机制 | 第20-21页 |
1.4 细胞因子在流感病毒感染中的免疫调节作用 | 第21-22页 |
1.5 现有的常用流感动物模型及其现状 | 第22-23页 |
1.5.1 雪貂 | 第22-23页 |
1.5.2 小鼠 | 第23页 |
1.5.3 非人灵长类 | 第23页 |
1.6 树鼩的研究现状及应用前景 | 第23-25页 |
1.7 本课题的研究思路 | 第25-27页 |
第二章 树鼩外周血单核细胞(PBMC)感染流感病毒后细胞因子的定量检测 | 第27-42页 |
2.1 引言 | 第27页 |
2.2 实验材料与试剂 | 第27-30页 |
2.2.1 研究对象 | 第27-28页 |
2.2.2 毒株 | 第28页 |
2.2.3 主要试剂 | 第28-29页 |
2.2.4 主要仪器 | 第29-30页 |
2.2.5 主要溶液配制 | 第30页 |
2.3 方法与步骤 | 第30-37页 |
2.3.1 树鼩外周血单核细胞(PBMC)分离 | 第30-31页 |
2.3.2 PBMC的培养 | 第31-32页 |
2.3.3 流感病毒感染树鼩PBMC | 第32页 |
2.3.4 RNA的提取及cDNA的合成 | 第32-34页 |
2.3.5 引物设计与合成 | 第34-35页 |
2.3.6 SYBR-Green荧光定量PCR检测 | 第35-36页 |
2.3.7 统计分析 | 第36-37页 |
2.4 实验结果 | 第37-39页 |
2.4.1 树鼩PBMC成功分离 | 第37页 |
2.4.2 树鼩PBMC的培养 | 第37-38页 |
2.4.3 流感病毒感染树鼩PBMC后炎症因子的变化 | 第38-39页 |
2.5 讨论 | 第39-41页 |
2.6 本章小结 | 第41-42页 |
第三章 流感病毒体内感染树鼩实验 | 第42-67页 |
3.1 引言 | 第42页 |
3.2 实验材料与试剂 | 第42-45页 |
3.2.1 实验对象 | 第42-43页 |
3.2.2 毒株 | 第43页 |
3.2.3 细胞 | 第43页 |
3.2.4 鸡胚 | 第43页 |
3.2.5 主要试剂 | 第43-44页 |
3.2.6 主要材料及设备 | 第44-45页 |
3.3 主要溶液配制 | 第45-46页 |
3.4 实验方法与操作步骤 | 第46-56页 |
3.4.1 MDCK细胞的复苏和传代 | 第46-47页 |
3.4.2 流感病毒的扩增 | 第47页 |
3.4.3 流感病毒TCID50的测定 | 第47-48页 |
3.4.4 流感病毒H9N2体内感染树鼩 | 第48-50页 |
3.4.5 组织匀浆检测病毒滴度 | 第50页 |
3.4.6 组织匀浆提取RNA,逆转录 | 第50-52页 |
3.4.7 SYBR-Green荧光定量PCR检测 | 第52-53页 |
3.4.8 组织病理学(HE染色) | 第53-55页 |
3.4.9 ELISA检测树鼩IL-8、IP-10抗原与人IL-8、IP-10抗体的免疫交叉反应 | 第55-56页 |
3.5 实验结果 | 第56-61页 |
3.5.1 流感病毒在体内感染树鼩后呼吸道病毒滴度 | 第56-57页 |
3.5.2 H9N2流感病毒感染树鼩后炎症因子的变化 | 第57-60页 |
3.5.3 组织病理学观察 | 第60页 |
3.5.4 人IL-8、IP-10抗体与树鼩IL-8、IP-10抗原免疫交叉反应 | 第60-61页 |
3.6 讨论 | 第61-65页 |
3.7 小结 | 第65-67页 |
第四章 总结与展望 | 第67-68页 |
4.1 总结 | 第67-68页 |
4.2 展望 | 第68页 |