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多种细胞因子对树鼩感染流感病毒免疫反应的研究

摘要第6-8页
Abstract第8-10页
第一章 绪论第16-27页
    1.1 病原学第16-18页
        1.1.1 遗传学特征第16-17页
        1.1.2 病毒的宿主受体与感染第17-18页
    1.2 流行病学第18-20页
        1.2.1 传染源及传播方式第18页
        1.2.2 病毒的抗原易变性第18-19页
        1.2.3 流感大流行第19页
        1.2.4 临床表现第19页
        1.2.5 实验室检查第19-20页
        1.2.6 病原学检查第20页
        1.2.7 影像学检查第20页
    1.3 致病机制第20-21页
    1.4 细胞因子在流感病毒感染中的免疫调节作用第21-22页
    1.5 现有的常用流感动物模型及其现状第22-23页
        1.5.1 雪貂第22-23页
        1.5.2 小鼠第23页
        1.5.3 非人灵长类第23页
    1.6 树鼩的研究现状及应用前景第23-25页
    1.7 本课题的研究思路第25-27页
第二章 树鼩外周血单核细胞(PBMC)感染流感病毒后细胞因子的定量检测第27-42页
    2.1 引言第27页
    2.2 实验材料与试剂第27-30页
        2.2.1 研究对象第27-28页
        2.2.2 毒株第28页
        2.2.3 主要试剂第28-29页
        2.2.4 主要仪器第29-30页
        2.2.5 主要溶液配制第30页
    2.3 方法与步骤第30-37页
        2.3.1 树鼩外周血单核细胞(PBMC)分离第30-31页
        2.3.2 PBMC的培养第31-32页
        2.3.3 流感病毒感染树鼩PBMC第32页
        2.3.4 RNA的提取及cDNA的合成第32-34页
        2.3.5 引物设计与合成第34-35页
        2.3.6 SYBR-Green荧光定量PCR检测第35-36页
        2.3.7 统计分析第36-37页
    2.4 实验结果第37-39页
        2.4.1 树鼩PBMC成功分离第37页
        2.4.2 树鼩PBMC的培养第37-38页
        2.4.3 流感病毒感染树鼩PBMC后炎症因子的变化第38-39页
    2.5 讨论第39-41页
    2.6 本章小结第41-42页
第三章 流感病毒体内感染树鼩实验第42-67页
    3.1 引言第42页
    3.2 实验材料与试剂第42-45页
        3.2.1 实验对象第42-43页
        3.2.2 毒株第43页
        3.2.3 细胞第43页
        3.2.4 鸡胚第43页
        3.2.5 主要试剂第43-44页
        3.2.6 主要材料及设备第44-45页
    3.3 主要溶液配制第45-46页
    3.4 实验方法与操作步骤第46-56页
        3.4.1 MDCK细胞的复苏和传代第46-47页
        3.4.2 流感病毒的扩增第47页
        3.4.3 流感病毒TCID50的测定第47-48页
        3.4.4 流感病毒H9N2体内感染树鼩第48-50页
        3.4.5 组织匀浆检测病毒滴度第50页
        3.4.6 组织匀浆提取RNA,逆转录第50-52页
        3.4.7 SYBR-Green荧光定量PCR检测第52-53页
        3.4.8 组织病理学(HE染色)第53-55页
        3.4.9 ELISA检测树鼩IL-8、IP-10抗原与人IL-8、IP-10抗体的免疫交叉反应第55-56页
    3.5 实验结果第56-61页
        3.5.1 流感病毒在体内感染树鼩后呼吸道病毒滴度第56-57页
        3.5.2 H9N2流感病毒感染树鼩后炎症因子的变化第57-60页
        3.5.3 组织病理学观察第60页
        3.5.4 人IL-8、IP-10抗体与树鼩IL-8、IP-10抗原免疫交叉反应第60-61页
    3.6 讨论第61-65页
    3.7 小结第65-67页
第四章 总结与展望第67-68页
    4.1 总结第67-68页
    4.2 展望第68页

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