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黄单胞菌属DNA条形码筛选及其重要致病变种检测技术研究

摘要第6-7页
abstract第7-8页
第一章 引言第14-41页
    1.1 黄单胞菌属概述第14-30页
        1.1.1 黄单胞菌属简介第14-20页
        1.1.2 检疫性黄单胞菌简介第20-24页
        1.1.3 检疫性黄单胞菌检测方法简介第24-30页
    1.2 DNA条形码概述第30-36页
        1.2.1 DNA条形码检测技术简介第30-31页
        1.2.2 细菌DNA条形码检测技术第31-36页
    1.3 数字PCR检测方法概述第36-39页
        1.3.1 数字PCR检测方法简介第36-38页
        1.3.2 数字PCR检测方法的应用第38-39页
    1.4 研究内容及目的意义第39-41页
        1.4.1 研究内容第39页
        1.4.2 目的及意义第39-40页
        1.4.3 技术路线第40-41页
第二章 黄单胞菌属DNA条形码基因的筛选第41-75页
    2.1 实验材料与试剂第41-51页
        2.1.1 实验用菌株材料第41-50页
        2.1.2 主要试剂及仪器第50-51页
    2.2 实验方法第51-54页
        2.2.1 菌株培养及保存第51页
        2.2.2 供试菌株基因组DNA的提取第51-52页
        2.2.3 候选DNA条形码基因的选取第52页
        2.2.4 DNA条形码基因序列的测定第52-53页
        2.2.5 黄单胞菌属DNA条形码基因的评价与分析第53-54页
    2.3 结果与分析第54-72页
        2.3.1 候选DNA条形码基因的确定第54-56页
        2.3.2 候选DNA条形码基因扩增引物的筛选与设计第56-59页
        2.3.3 PCR扩增效率、测序成功率及序列信息第59-61页
        2.3.4 基于系统发育树的分析第61-70页
        2.3.5 基于遗传距离的分析第70-72页
    2.4 小结与讨论第72-75页
第三章 黄单胞菌属DNA条形码方法验证与应用第75-88页
    3.1 实验材料与试剂第75页
        3.1.1 实验用病害材料第75页
        3.1.2 主要试剂及仪器第75页
    3.2 试验方法第75-77页
        3.2.1 病原菌的分离培养第75页
        3.2.2 利用DNA条形码方法进行病原菌鉴定第75-76页
        3.2.3 利用常规方法进行病原菌鉴定第76-77页
    3.3 结果与分析第77-87页
        3.3.1 柑橘上病原菌的鉴定第77-81页
        3.3.2 红掌上病原菌的鉴定第81-84页
        3.3.3 桃上病原菌的鉴定第84-87页
    3.4 小结与讨论第87-88页
第四章 黄单胞菌属重要致病变种数字PCR检测体系的建立及应用第88-107页
    4.1 实验材料与试剂第88-90页
        4.1.1 实验用菌株及种子材料第88-90页
        4.1.2 主要试剂及仪器第90页
    4.2 试验方法第90-93页
        4.2.1 菌株培养及保存第90页
        4.2.2 供试菌株及样品DNA的提取第90-91页
        4.2.3 引物及探针的设计筛选第91-92页
        4.2.4 Bio-Rad数字PCR检测体系的建立第92页
        4.2.5 数字PCR检测方法特异性验证第92页
        4.2.6 数字PCR检测方法灵敏度验证第92页
        4.2.7 数字PCR检测方法重复性试验第92-93页
        4.2.8 种子样品的数字PCR检测第93页
    4.3 结果与分析第93-105页
        4.3.1 数字PCR检测引物及探针的筛选第93-98页
        4.3.2 数字PCR检测体系评价第98-99页
        4.3.3 数字PCR方法特异性检测结果第99-100页
        4.3.4 数字PCR方法灵敏度检测结果第100-102页
        4.3.5 数字PCR方法重复性分析第102-103页
        4.3.6 模拟带菌水稻种子样品的数字PCR检测第103-105页
        4.3.7 自然带菌水稻种子样品的数字PCR检测第105页
    4.4 小结与讨论第105-107页
第五章 全文结论第107-109页
参考文献第109-119页
附录第119-121页
致谢第121-122页
作者简历第122页

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