| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第11-24页 |
| 1.1 LEA蛋白研究进展 | 第11-21页 |
| 1.1.1 LEA蛋白概述 | 第11-12页 |
| 1.1.2 LEA蛋白分类 | 第12-14页 |
| 1.1.3 LEA蛋白功能及保护作用机制 | 第14-17页 |
| 1.1.4 LEA3家族蛋白研究进展 | 第17-19页 |
| 1.1.5 LEA3家族蛋白核心结构域研究 | 第19-21页 |
| 1.2 立题依据 | 第21-22页 |
| 1.3 研究内容与目的 | 第22-23页 |
| 1.3.1 研究内容 | 第22页 |
| 1.3.2 研究的意义 | 第22-23页 |
| 1.4 技术路线 | 第23-24页 |
| 2 不同核心结构域序列特征比较 | 第24-32页 |
| 2.1 引言 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-26页 |
| 2.2.1 生物信息学分析工具 | 第24-26页 |
| 2.3 结果分析 | 第26-29页 |
| 2.3.1 选取四种蛋白 | 第26页 |
| 2.3.2 不同核心结构域亲疏水性比较 | 第26-27页 |
| 2.3.3 不同核心结构域无序度的比较 | 第27-28页 |
| 2.3.4 不同核心结构域的比较 | 第28-29页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第29-32页 |
| 3 核心结构域蛋白纯化及二级结构解析 | 第32-49页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 实验材料 | 第32-35页 |
| 3.2.1 实验菌株 | 第32-33页 |
| 3.2.2 试剂耗材及仪器 | 第33-34页 |
| 3.2.3 培养基及抗生素 | 第34页 |
| 3.2.4 主要溶液配制 | 第34-35页 |
| 3.3 实验方法 | 第35-42页 |
| 3.3.1 细菌培养 | 第35-36页 |
| 3.3.2 细菌全基因组及质粒提取 | 第36页 |
| 3.3.3 PCR反应 | 第36-37页 |
| 3.3.4 酶切反应 | 第37-38页 |
| 3.3.5 PCR及酶切产物纯化 | 第38页 |
| 3.3.6 连接反应 | 第38页 |
| 3.3.7 大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第38页 |
| 3.3.8 大肠杆菌总RNA提取 | 第38-39页 |
| 3.3.9 RNA样品中的DNA去除及反转录 | 第39页 |
| 3.3.10 实时荧光定量PCR | 第39-40页 |
| 3.3.11 4个核心结构域蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化. | 第40页 |
| 3.3.12 蛋白浓缩及换buffer | 第40-41页 |
| 3.3.13 圆二色谱分析 | 第41-42页 |
| 3.4 结果分析 | 第42-48页 |
| 3.4.1 重组E.coil菌株的构建 | 第42页 |
| 3.4.2 不同核心结构域诱导表达分析 | 第42-44页 |
| 3.4.3 蛋白表达与纯化 | 第44-45页 |
| 3.4.4 不同核心结构域的二级结构分析 | 第45-48页 |
| 3.5 小结与讨论 | 第48-49页 |
| 4 不同核心结构域功能比较 | 第49-57页 |
| 4.1 引言 | 第49页 |
| 4.2 实验材料 | 第49-50页 |
| 4.2.1 实验菌株 | 第49页 |
| 4.2.2 试剂耗材及仪器 | 第49-50页 |
| 4.2.3 培养基及抗生素 | 第50页 |
| 4.2.4 主要溶液配制 | 第50页 |
| 4.3 实验方法 | 第50-52页 |
| 4.3.1 重组大肠杆菌冲击实验 | 第50-51页 |
| 4.3.2 MDH及LDH酶活检测 | 第51-52页 |
| 4.4 结果分析 | 第52-55页 |
| 4.4.1 大肠杆菌冲击实验 | 第52页 |
| 4.4.2 MDH及LDH酶活分析 | 第52-55页 |
| 4.5 结果与讨论 | 第55-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文及研究成果 | 第67页 |