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定点编辑人jmjd3基因的TALEN质粒构建及jmjd3基因敲除对人宫颈癌细胞体外效应观察

摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
中英文缩略词表第8-9页
第1章 前言第9-12页
第2章 材料与方法第12-32页
    2.1 菌种第12页
    2.2 质粒第12页
    2.3 细胞株第12页
    2.4 常用软件第12页
    2.5 主要仪器第12-13页
    2.6 主要试剂第13-15页
        2.6.1 质粒构建及鉴定主要试剂第13-14页
        2.6.2 细胞培养及转染主要试剂第14页
        2.6.3 RT-PCR实验主要试剂第14页
        2.6.4 MTT实验主要试剂第14-15页
    2.7 主要试剂的配制第15-16页
        2.7.1 细胞培养主要试剂的配制第15页
        2.7.2 RT-PCR实验主要试剂配制第15页
        2.7.3 MTT主要试剂配置第15页
        2.7.4 大肠杆菌培养主要试剂配置第15-16页
    2.8 TALEN质粒的构建与测序第16-22页
        2.8.1 TALEN质粒的设计与合成第16-19页
        2.8.2 TALEN质粒的转化第19页
        2.8.3 TALEN质粒单克隆的挑取和培养第19-20页
        2.8.4 TALEN载体鉴定第20-21页
        2.8.5 TALEN表达载体的测序验证第21-22页
    2.9 TALEN质粒的编辑效应检测第22-31页
        2.9.1 TALEN质粒转染Hela细胞及药物筛选第22-27页
        2.9.2 RT-PCR检测jmjd3 mRNA表达水平第27-30页
        2.9.3 MTT检测细胞体外增殖情况第30-31页
    2.10 统计学处理第31-32页
第3章 结果第32-43页
    3.1 编辑人JMJD3 TALEN质粒的构建第32-33页
    3.2 编辑人JMJD3 TALEN质粒酶切鉴定第33-34页
    3.3 编辑人JMJD3 TALEN质粒测序第34-35页
    3.4 编辑人JMJD3 TALEN质粒BLAST比对分析第35-39页
    3.5 编辑人JMJD3 TALEN质粒电泳鉴定第39页
    3.6 质粒转染效率检测第39-40页
    3.7 药物筛选后细胞数对比第40页
    3.8 HELA细胞总RNA电泳结果第40-41页
    3.9 编辑JMJD3 后HELA细胞MRNA表达情况第41页
    3.10 编辑JMJD3 后HELA细胞增殖情况分析第41-43页
第4章 讨论第43-46页
第5章 结论与展望第46-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-51页
附图第51-52页
攻读学位期间的研究成果第52-53页
综述第53-64页
    参考文献第60-64页

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