摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
中英文缩略词表 | 第8-9页 |
第1章 前言 | 第9-12页 |
第2章 材料与方法 | 第12-32页 |
2.1 菌种 | 第12页 |
2.2 质粒 | 第12页 |
2.3 细胞株 | 第12页 |
2.4 常用软件 | 第12页 |
2.5 主要仪器 | 第12-13页 |
2.6 主要试剂 | 第13-15页 |
2.6.1 质粒构建及鉴定主要试剂 | 第13-14页 |
2.6.2 细胞培养及转染主要试剂 | 第14页 |
2.6.3 RT-PCR实验主要试剂 | 第14页 |
2.6.4 MTT实验主要试剂 | 第14-15页 |
2.7 主要试剂的配制 | 第15-16页 |
2.7.1 细胞培养主要试剂的配制 | 第15页 |
2.7.2 RT-PCR实验主要试剂配制 | 第15页 |
2.7.3 MTT主要试剂配置 | 第15页 |
2.7.4 大肠杆菌培养主要试剂配置 | 第15-16页 |
2.8 TALEN质粒的构建与测序 | 第16-22页 |
2.8.1 TALEN质粒的设计与合成 | 第16-19页 |
2.8.2 TALEN质粒的转化 | 第19页 |
2.8.3 TALEN质粒单克隆的挑取和培养 | 第19-20页 |
2.8.4 TALEN载体鉴定 | 第20-21页 |
2.8.5 TALEN表达载体的测序验证 | 第21-22页 |
2.9 TALEN质粒的编辑效应检测 | 第22-31页 |
2.9.1 TALEN质粒转染Hela细胞及药物筛选 | 第22-27页 |
2.9.2 RT-PCR检测jmjd3 mRNA表达水平 | 第27-30页 |
2.9.3 MTT检测细胞体外增殖情况 | 第30-31页 |
2.10 统计学处理 | 第31-32页 |
第3章 结果 | 第32-43页 |
3.1 编辑人JMJD3 TALEN质粒的构建 | 第32-33页 |
3.2 编辑人JMJD3 TALEN质粒酶切鉴定 | 第33-34页 |
3.3 编辑人JMJD3 TALEN质粒测序 | 第34-35页 |
3.4 编辑人JMJD3 TALEN质粒BLAST比对分析 | 第35-39页 |
3.5 编辑人JMJD3 TALEN质粒电泳鉴定 | 第39页 |
3.6 质粒转染效率检测 | 第39-40页 |
3.7 药物筛选后细胞数对比 | 第40页 |
3.8 HELA细胞总RNA电泳结果 | 第40-41页 |
3.9 编辑JMJD3 后HELA细胞MRNA表达情况 | 第41页 |
3.10 编辑JMJD3 后HELA细胞增殖情况分析 | 第41-43页 |
第4章 讨论 | 第43-46页 |
第5章 结论与展望 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-51页 |
附图 | 第51-52页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第52-53页 |
综述 | 第53-64页 |
参考文献 | 第60-64页 |