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二穗短柄草的遗传转化及INDETERMINATE1基因的克隆

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-13页
1 引言第13-31页
   ·植物开花的分子调控机理研究第14-18页
     ·春化作用途径第14-15页
     ·光周期途径第15-17页
     ·自主开花途径第17-18页
     ·赤霉素途径第18页
   ·玉米 ID1 定义的 ID-domain 基因家族第18-23页
     ·玉米 ID1 定义的 ID-domain 包含转录因子基因家族第18-19页
     ·ID-domain 的结构特点第19-21页
     ·ID-domain 之外的保守区第21-22页
     ·ID-domain 基因家族的起源第22-23页
   ·植物 ID1 和 IDD 基因的分离鉴定第23-24页
     ·水稻和高粱中假定的 ID1 和 IDD 基因的分离第23-24页
     ·拟南芥中 IDD 基因的分离第24页
   ·植物 IDD 基因的功能第24-25页
   ·二穗短柄草作为禾本科模式植物的依据第25-30页
     ·二穗短柄草与其他禾本科之间的亲缘关系较近第25-26页
     ·二穗短柄草具有禾本科植物最小的基因组第26-27页
     ·可以作为温带禾本科植物功能基因组分析的重要工具第27页
     ·易遗传转化第27-28页
     ·丰富的遗传变异材料第28-29页
     ·理想的形态与生长特性第29-30页
   ·本研究的目的及意义第30-31页
2 材料和方法第31-47页
   ·实验材料第31-32页
     ·植物材料第31页
     ·植物材料培养第31页
     ·菌株和质粒第31页
     ·酶及生化试剂第31-32页
     ·PCR 引物第32页
     ·培养基第32页
   ·实验方法第32-47页
     ·RNA 提取第32-33页
     ·cDNA 第一条链的合成第33页
     ·cDNA 的回收纯化第33-34页
     ·cDNA 的5’加尾反应第34页
     ·cDNA 全长序列的获得第34-37页
     ·BdID1 全长基因组序列的获得第37-38页
     ·电泳目的片段的回收第38-39页
     ·DNA 片段与克隆载体的连接第39页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备第39-40页
     ·大肠杆菌感受态细胞的转化第40页
     ·质粒 DNA 的提取第40-42页
     ·克隆载体的酶切鉴定第42页
     ·半定量 RT-PCR 分析第42页
     ·植物表达载体的构建第42-44页
     ·植物表达载体的转化第44-46页
     ·EMS 诱变方法第46-47页
3 结果与分析第47-61页
   ·短柄草的生长特性研究第47-48页
   ·短柄草中 INDETERMINATE1 基因的分离第48-51页
     ·短柄草 RNA 的提取及反转录第48页
     ·BdID1 中间片段的分离第48-49页
     ·BdID1 5’片段的分离第49-50页
     ·BdID1 3’片段的分离第50-51页
     ·BdID1 全长cDNA 的分离第51页
   ·BdID1 的序列分析第51-56页
     ·BdID1 的全长cDNA 分析第51-54页
     ·BdID1 编码的氨基酸序列分析第54页
     ·BdID1 基因组序列分析第54-56页
   ·BdID1 基因的表达分析第56-57页
   ·BdID1 基因功能的研究第57-59页
     ·短柄草组培流程第57-58页
     ·表达载体的构建第58页
     ·抗性再生植株的获得第58-59页
   ·突变体的筛选第59-60页
   ·下一步的实验计划第60-61页
4 讨论第61-64页
   ·二穗短柄草作为模式植物的依据第61页
   ·二穗短柄草 Bd21 的生理特性第61-62页
   ·BdID1 的蛋白结构特征第62页
   ·BdID1 的表达分析第62-64页
5 结论第64-65页
参考文献第65-77页
附录第77-82页
致谢第82页

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