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STAT3/miR-93/DAPK1通路调控肾细胞癌增殖与凋亡

摘要第4-7页
Abstract第7-8页
英文缩略语第9-14页
第一部分 miR-93在肾癌中高表达并介导DAPK1调控肾癌细胞增殖与凋亡第14-36页
    1 前言第14-16页
    2 材料与方法第16-25页
        2.1 实验材料第16页
            2.1.1 细胞系第16页
            2.1.2 病理组织标本第16页
            2.1.3 实验动物第16页
            2.1.4 质粒及病毒第16页
            2.1.5 常用实验试剂第16页
        2.2 实验仪器第16-17页
        2.3 实验方法第17-25页
            2.3.1 生物信息学预测第17页
            2.3.2 细胞培养第17页
            2.3.3 RNA提取第17-18页
            2.3.4 ReverseTranscriptionPCR第18页
            2.3.5 QuantitativeReal-TimePCR第18-19页
            2.3.6 瞬时转染、稳定转染第19页
            2.3.7 细胞增殖实验第19-20页
            2.3.8 细胞凋亡检测第20页
            2.3.9 WesternBlotting第20-21页
            2.3.10 双荧光报告基因检测第21页
            2.3.11 免疫组化第21-23页
            2.3.12 Tunel检测凋亡第23-24页
            2.3.13 统计学分析第24-25页
    3 实验结果第25-33页
        3.1 miR-93在肾细胞癌中高表达第25-26页
        3.2 miR-93影响肾癌细胞增殖与凋亡第26-30页
        3.3 miR-93介导DAPK1的蛋白表达第30-33页
    4 讨论第33-35页
    5 结论第35-36页
第二部分 STAT3正向调控miR-93的表达第36-50页
    1 前言第36页
    2 材料与方法第36-41页
        2.1 实验材料第36-37页
            2.1.1 细胞系第36页
            2.1.2 试剂第36-37页
        2.2 实验仪器第37页
        2.3 实验方法第37-41页
            2.3.1 生物信息学预测第37页
            2.3.2 细胞培养第37页
            2.3.3 RNA提取第37-38页
            2.3.4 QeverseTranscriptionPCR第38页
            2.3.5 QuantitativeReal-timePCR第38页
            2.3.6 瞬时转染、稳定转染第38-39页
            2.3.7 WesternBlotting第39-40页
            2.3.8 加药第40页
            2.3.9 染色质免疫功沉淀(ChIP)第40-41页
            2.3.10 双荧光报告基因检测第41页
    3 结果第41-48页
        3.1 内源性调控STAT3活性后miR-93的表达随之变化第41-45页
        3.2 外源性下调STAT3表达后miR-93表达量下降第45-46页
        3.3 STAT3活化后入核结合到miR-93上游启动区域发挥转录作用第46-48页
    4 讨论第48-49页
    5 结论第49-50页
第三部分 DAPK1与STAT3的双向负调控第50-62页
    1 前言第50页
    2 材料与方法第50-55页
        2.1 实验材料第50-51页
            2.1.1 细胞株第50页
            2.1.2 试剂第50-51页
            2.1.3 质粒及病毒第51页
        2.2 实验仪器第51页
        2.3 实验方法第51-55页
            2.3.1 细胞培养第51页
            2.3.2 RNA提取第51-52页
            2.3.3 ReverseTranscriptionPCR第52页
            2.3.4 实时定量PCR第52页
            2.3.5 瞬时转染、稳定转染第52-53页
            2.3.6 WesternBlotting第53-54页
            2.3.7 加药第54页
            2.3.8 核蛋白提取第54页
            2.3.9 免疫荧光第54-55页
    3 实验结果第55-58页
        3.1 STAT3下调DAPK1核酸及蛋白的表达第55-56页
        3.2 DAPK1抑制STAT3活化入核第56-58页
    4 讨论第58-60页
    5 小结第60-62页
本研究创新性的自我评价第62-63页
参考文献第63-68页
综述第68-79页
    参考文献第73-79页
攻读学位期间取得的研究成果第79-80页
致谢第80-81页
个人简历第81页

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