摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略语 | 第9-14页 |
第一部分 miR-93在肾癌中高表达并介导DAPK1调控肾癌细胞增殖与凋亡 | 第14-36页 |
1 前言 | 第14-16页 |
2 材料与方法 | 第16-25页 |
2.1 实验材料 | 第16页 |
2.1.1 细胞系 | 第16页 |
2.1.2 病理组织标本 | 第16页 |
2.1.3 实验动物 | 第16页 |
2.1.4 质粒及病毒 | 第16页 |
2.1.5 常用实验试剂 | 第16页 |
2.2 实验仪器 | 第16-17页 |
2.3 实验方法 | 第17-25页 |
2.3.1 生物信息学预测 | 第17页 |
2.3.2 细胞培养 | 第17页 |
2.3.3 RNA提取 | 第17-18页 |
2.3.4 ReverseTranscriptionPCR | 第18页 |
2.3.5 QuantitativeReal-TimePCR | 第18-19页 |
2.3.6 瞬时转染、稳定转染 | 第19页 |
2.3.7 细胞增殖实验 | 第19-20页 |
2.3.8 细胞凋亡检测 | 第20页 |
2.3.9 WesternBlotting | 第20-21页 |
2.3.10 双荧光报告基因检测 | 第21页 |
2.3.11 免疫组化 | 第21-23页 |
2.3.12 Tunel检测凋亡 | 第23-24页 |
2.3.13 统计学分析 | 第24-25页 |
3 实验结果 | 第25-33页 |
3.1 miR-93在肾细胞癌中高表达 | 第25-26页 |
3.2 miR-93影响肾癌细胞增殖与凋亡 | 第26-30页 |
3.3 miR-93介导DAPK1的蛋白表达 | 第30-33页 |
4 讨论 | 第33-35页 |
5 结论 | 第35-36页 |
第二部分 STAT3正向调控miR-93的表达 | 第36-50页 |
1 前言 | 第36页 |
2 材料与方法 | 第36-41页 |
2.1 实验材料 | 第36-37页 |
2.1.1 细胞系 | 第36页 |
2.1.2 试剂 | 第36-37页 |
2.2 实验仪器 | 第37页 |
2.3 实验方法 | 第37-41页 |
2.3.1 生物信息学预测 | 第37页 |
2.3.2 细胞培养 | 第37页 |
2.3.3 RNA提取 | 第37-38页 |
2.3.4 QeverseTranscriptionPCR | 第38页 |
2.3.5 QuantitativeReal-timePCR | 第38页 |
2.3.6 瞬时转染、稳定转染 | 第38-39页 |
2.3.7 WesternBlotting | 第39-40页 |
2.3.8 加药 | 第40页 |
2.3.9 染色质免疫功沉淀(ChIP) | 第40-41页 |
2.3.10 双荧光报告基因检测 | 第41页 |
3 结果 | 第41-48页 |
3.1 内源性调控STAT3活性后miR-93的表达随之变化 | 第41-45页 |
3.2 外源性下调STAT3表达后miR-93表达量下降 | 第45-46页 |
3.3 STAT3活化后入核结合到miR-93上游启动区域发挥转录作用 | 第46-48页 |
4 讨论 | 第48-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
第三部分 DAPK1与STAT3的双向负调控 | 第50-62页 |
1 前言 | 第50页 |
2 材料与方法 | 第50-55页 |
2.1 实验材料 | 第50-51页 |
2.1.1 细胞株 | 第50页 |
2.1.2 试剂 | 第50-51页 |
2.1.3 质粒及病毒 | 第51页 |
2.2 实验仪器 | 第51页 |
2.3 实验方法 | 第51-55页 |
2.3.1 细胞培养 | 第51页 |
2.3.2 RNA提取 | 第51-52页 |
2.3.3 ReverseTranscriptionPCR | 第52页 |
2.3.4 实时定量PCR | 第52页 |
2.3.5 瞬时转染、稳定转染 | 第52-53页 |
2.3.6 WesternBlotting | 第53-54页 |
2.3.7 加药 | 第54页 |
2.3.8 核蛋白提取 | 第54页 |
2.3.9 免疫荧光 | 第54-55页 |
3 实验结果 | 第55-58页 |
3.1 STAT3下调DAPK1核酸及蛋白的表达 | 第55-56页 |
3.2 DAPK1抑制STAT3活化入核 | 第56-58页 |
4 讨论 | 第58-60页 |
5 小结 | 第60-62页 |
本研究创新性的自我评价 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-68页 |
综述 | 第68-79页 |
参考文献 | 第73-79页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第79-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
个人简历 | 第81页 |