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弓形虫ERP基因的遗传变异分析及ELISA方法建立与其免疫原性分析

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-17页
    1.1 弓形虫基因分型第12-13页
        1.1.1 弓形虫基因分型常用方法第12-13页
        1.1.2 弓形虫基因分型研究中遗传标记的选择第13页
    1.2 弓形虫病的诊断方法第13-14页
        1.2.1 病原学诊断第13页
        1.2.2 免疫学诊断第13-14页
        1.2.3 分子生物学诊断第14页
    1.3 弓形虫病的疫苗研究第14-15页
    1.4 弓形虫的主要抗原基因第15页
    1.5 葡萄球菌A蛋白第15页
    1.6 弓形虫胚层发育相关蛋白第15-17页
2 材料与方法第17-34页
    2.1 材料第17-22页
        2.1.1 弓形虫虫株第17页
        2.1.2 试验动物第17页
        2.1.3 质粒和菌株第17-18页
        2.1.4 主要试剂第18页
        2.1.5 主要仪器第18-19页
        2.1.6 溶液配制第19-21页
        2.1.7 培养基第21-22页
        2.1.8 引物设计第22页
    2.2 方法第22-34页
        2.2.1 弓形虫ERP基因的遗传变异分析第22-25页
        2.2.2 间接ELISA诊断方法建立及其初步应用第25-31页
        2.2.3 弓形虫ERP免疫原性分析第31-34页
3 结果与分析第34-54页
    3.1 弓形虫ERP基因的遗传变异分析结果第34-38页
        3.1.1 TgERP基因PCR扩增结果第34页
        3.1.2 重组质粒的鉴定结果第34-35页
        3.1.3 不同弓形虫虫株之间TgERP基因序列的变异分析第35-38页
    3.2 间接ELISA诊断方法建立及其初步应用的结果第38-50页
        3.2.1 弓形虫RH株重组表达质粒pET30-ERP的制备第38-40页
        3.2.2 弓形虫RH株TgERP基因的诱导表达与纯化第40-44页
        3.2.3 TgERP的多克隆抗体的制备第44-45页
        3.2.4 间接ELISA方法的建立及初步应用第45-50页
    3.3 弓形虫ERP免疫原性分析结果第50-54页
        3.3.1 实验鼠血清中IgG抗体和IgG1、IgG2a抗体亚类的分布情况第50-51页
        3.3.2 细胞因子IFN-γ、IL2、IL4、IL10和IL12p70的检测第51-52页
        3.3.3 免疫鼠脾淋巴细胞增殖实验(MTS法)第52页
        3.3.4 流式细胞分选仪分析CD3+CD4+CD8-和CD3+CD8+CD4-细胞第52-54页
4 讨论第54-57页
5 结论第57-58页
致谢第58-59页
参考文献第59-67页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第67页

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