摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-17页 |
1.1 弓形虫基因分型 | 第12-13页 |
1.1.1 弓形虫基因分型常用方法 | 第12-13页 |
1.1.2 弓形虫基因分型研究中遗传标记的选择 | 第13页 |
1.2 弓形虫病的诊断方法 | 第13-14页 |
1.2.1 病原学诊断 | 第13页 |
1.2.2 免疫学诊断 | 第13-14页 |
1.2.3 分子生物学诊断 | 第14页 |
1.3 弓形虫病的疫苗研究 | 第14-15页 |
1.4 弓形虫的主要抗原基因 | 第15页 |
1.5 葡萄球菌A蛋白 | 第15页 |
1.6 弓形虫胚层发育相关蛋白 | 第15-17页 |
2 材料与方法 | 第17-34页 |
2.1 材料 | 第17-22页 |
2.1.1 弓形虫虫株 | 第17页 |
2.1.2 试验动物 | 第17页 |
2.1.3 质粒和菌株 | 第17-18页 |
2.1.4 主要试剂 | 第18页 |
2.1.5 主要仪器 | 第18-19页 |
2.1.6 溶液配制 | 第19-21页 |
2.1.7 培养基 | 第21-22页 |
2.1.8 引物设计 | 第22页 |
2.2 方法 | 第22-34页 |
2.2.1 弓形虫ERP基因的遗传变异分析 | 第22-25页 |
2.2.2 间接ELISA诊断方法建立及其初步应用 | 第25-31页 |
2.2.3 弓形虫ERP免疫原性分析 | 第31-34页 |
3 结果与分析 | 第34-54页 |
3.1 弓形虫ERP基因的遗传变异分析结果 | 第34-38页 |
3.1.1 TgERP基因PCR扩增结果 | 第34页 |
3.1.2 重组质粒的鉴定结果 | 第34-35页 |
3.1.3 不同弓形虫虫株之间TgERP基因序列的变异分析 | 第35-38页 |
3.2 间接ELISA诊断方法建立及其初步应用的结果 | 第38-50页 |
3.2.1 弓形虫RH株重组表达质粒pET30-ERP的制备 | 第38-40页 |
3.2.2 弓形虫RH株TgERP基因的诱导表达与纯化 | 第40-44页 |
3.2.3 TgERP的多克隆抗体的制备 | 第44-45页 |
3.2.4 间接ELISA方法的建立及初步应用 | 第45-50页 |
3.3 弓形虫ERP免疫原性分析结果 | 第50-54页 |
3.3.1 实验鼠血清中IgG抗体和IgG1、IgG2a抗体亚类的分布情况 | 第50-51页 |
3.3.2 细胞因子IFN-γ、IL2、IL4、IL10和IL12p70的检测 | 第51-52页 |
3.3.3 免疫鼠脾淋巴细胞增殖实验(MTS法) | 第52页 |
3.3.4 流式细胞分选仪分析CD3+CD4+CD8-和CD3+CD8+CD4-细胞 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-57页 |
5 结论 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第67页 |