| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 第一章 研究背景以及文献综述 | 第14-41页 |
| 第一节 小鼠生殖细胞的发育情况 | 第14-22页 |
| 1.1 生殖细胞 | 第14页 |
| 1.2 原始生殖细胞的特化 | 第14-15页 |
| 1.3 PGCs特化过程中的信号通路 | 第15-16页 |
| 1.4 PGCs发育过程中体细胞发育特性的抑制 | 第16-17页 |
| 1.5 PGCs干性的维持 | 第17页 |
| 1.6 PGCs的迁移 | 第17-18页 |
| 1.7 PGCs的生存和增殖 | 第18-19页 |
| 1.8 PGCs定居到生殖脊 | 第19页 |
| 1.9 生殖细胞形态学的改变 | 第19页 |
| 1.10 生殖细胞中基因表达的改变 | 第19-20页 |
| 1.11 生殖细胞全能性的丢失 | 第20页 |
| 1.12 生殖细胞性别分化 | 第20-22页 |
| 第二节 雄性小鼠的精子发生过程 | 第22-25页 |
| 2.1 精子发生的场所 | 第22-23页 |
| 2.2 精原干细胞 | 第23-24页 |
| 2.3 减数分裂 | 第24-25页 |
| 2.4 精子的发生和变形 | 第25页 |
| 第三节 雄性小鼠生殖细胞发育过程中受到的调节 | 第25-32页 |
| 3.1 激素的调节 | 第25页 |
| 3.2 精子产生过程中重要基因的调节 | 第25-32页 |
| 第四节 表观遗传修饰对生殖细胞发育的重要作用 | 第32-35页 |
| 4.1 生殖细胞中DNA去甲基化和印记基因的擦除 | 第33-34页 |
| 4.2 生殖细胞中DNA的重新甲基化 | 第34-35页 |
| 4.3 雌性生殖细胞中X染色体的重新激活 | 第35页 |
| 第五节 转录因子NRF1对生殖细胞发育的作用 | 第35-37页 |
| 5.1 NRF1对于生殖细胞能量代谢的作用 | 第35-37页 |
| 5.2 NRF1在促进生殖细胞转录方面的作用 | 第37页 |
| 第六节 NRF1和DNA甲基化之间的相互作用 | 第37-38页 |
| 第七节 本研究的背景与意义 | 第38-41页 |
| 第二章 实验方法和材料 | 第41-83页 |
| 第一节 实验试剂和材料 | 第41-46页 |
| 1.1 实验试剂 | 第41-42页 |
| 1.2 实验所用到的仪器 | 第42-43页 |
| 1.3 实验耗材 | 第43-44页 |
| 1.4 实验所用细胞系 | 第44页 |
| 1.5 实验用小鼠品系 | 第44页 |
| 1.6 实验中用到的质粒 | 第44-45页 |
| 1.7 实验中用到的抗体列表 | 第45-46页 |
| 1.8 实验所用引物名称和序列见附录 | 第46页 |
| 第二节 实验方法 | 第46-83页 |
| 2.1 细胞实验相关方法 | 第46-50页 |
| 2.2 荧光素酶报告实验(luciferaseassay) | 第50-52页 |
| 2.3 RNA提取： | 第52-53页 |
| 2.4 逆转录PCR(ReverseTranscriptionPCR,RT-PCR) | 第53页 |
| 2.5 实时荧光定量PCR(Quantitativereal-timePCR,qPCR) | 第53-54页 |
| 2.6 免疫组织化学相关实验 | 第54-59页 |
| 2.7 细胞凋亡检测 | 第59-60页 |
| 2.8 基因组的提取 | 第60-62页 |
| 2.9 染色质免疫共沉淀(chromationimmunoprecipitation,ChIP) | 第62-67页 |
| 2.10 质粒小量提取 | 第67-68页 |
| 2.11 琼脂糖凝胶DNA回收 | 第68页 |
| 2.12 重亚硫酸盐测序法(BisulphiteSequencing) | 第68-70页 |
| 2.13 生殖细胞的分离 | 第70-71页 |
| 2.14 活性氧检测 | 第71-72页 |
| 2.15 免疫印迹(WesternBlotting,WB) | 第72-77页 |
| 2.16 GST融合蛋白纯化 | 第77-78页 |
| 2.17 凝胶迁移实验(EMSA)实验方法 | 第78-81页 |
| 2.18 甲基化敏感性限制性内切酶-PCR(Methylation-sensitive restriction enzyme digestionPCR,MSRE-PCR) | 第81-83页 |
| 第三章 实验结果 | 第83-106页 |
| 1.Asz1的表达受到DNA甲基化的调节 | 第83-84页 |
| 2.NRF1和DNA甲基化协同作用,共同调节Asz1的表达 | 第84-89页 |
| 3.NRF1富集在许多生殖相关基因的启动子区 | 第89-91页 |
| 4.NRF1可以调节许多生殖相关基因的表达 | 第91-93页 |
| 5.NRF1在小鼠生殖细胞里面广泛表达 | 第93-95页 |
| 6.在生殖细胞中条件性敲除NRF1将导致雄性不育 | 第95-97页 |
| 7.NRF1敲除之后生殖细胞的增殖受到影响 | 第97-98页 |
| 8.NRF1的缺失引起生殖相关基因表达的下降 | 第98-101页 |
| 9.NRF1敲除之后,早期生殖细胞中线粒体的功能没有受到影响 | 第101-103页 |
| 10.NRF1敲除之后,下游基因DNA甲基化的水平没有显著上升 | 第103-106页 |
| 第四章 讨论 | 第106-111页 |
| 参考文献 | 第111-121页 |
| 附录Ⅰ缩略词表 | 第121-124页 |
| 附录Ⅱ引物名称和序列 | 第124-133页 |
| 附录Ⅲ攻读博士学位期间发表的文章 | 第133-134页 |
| 致谢 | 第134-136页 |
