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T细胞活化连接蛋白LAT分子参与外周T细胞活化和分化的调节机制探讨

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
缩略词第13-14页
绪论第14-18页
1. 特异性针对 LAT 分子的 siRNA 序列筛选及干扰效果鉴定第18-26页
    1.1 材料与方法第18-19页
        1.1.1 siRNA 序列第18-19页
        1.1.2 主要仪器和试剂第19页
    1.2 实验方法和步骤第19-22页
        1.2.1 siRNA 序列的设计第19-20页
        1.2.2 siRNA 转染 Jurkat 细胞株及 Western blot 鉴定干扰效果第20-21页
        1.2.3 siRNA 转染 PBMC 细胞及 Western blot 鉴定干扰效果第21-22页
        1.2.4 Amaxa 电转仪操作程序第22页
    1.3 结果第22-23页
    1.4 讨论第23-26页
2. LAT 分子缺失对 T 细胞增殖和活化的影响第26-34页
    2.1 材料第27页
    2.2 实验方法和步骤第27-29页
        2.2.1 外周血单个核细胞(PBMCS)分离、转染及活化第27-28页
        2.2.2 双抗夹心法检测血清细胞因子含量第28-29页
        2.2.3 3H-TdR 法检测细胞增殖第29页
    2.3 结果第29-31页
    2.4 讨论第31-34页
3.LAT 分子缺失对 TCR 信号转导通路相关蛋白活化的影响第34-40页
    3.1 材料第34-35页
    3.2 实验方法和步骤第35-36页
        3.2.1 Western blot 检测磷酸化表达谱变化第35页
        3.2.2 胞内钙离子内流检测第35-36页
    3.3 结果第36-37页
    3.4 讨论第37-40页
4 LAT 分子缺失对 T 细胞分化的影响第40-45页
    4.1 材料第40-41页
        4.1.1 主要仪器第40-41页
    4.2 实验方法和步骤第41-43页
        4.2.1 RNA 抽提及逆转录第41页
        4.2.2 Realtime PCR 检测 Th2 分化相关基因表达第41-43页
        4.2.3 ELISA 方法检测培养上清中 IFN- 的表达第43页
    4.3 结果第43-44页
    4.4 讨论第44-45页
5. LAT 分子缺失导致 T 细胞活化异常的分子机制探讨第45-55页
    5.1 材料第45-46页
    5.2 实验方法和步骤第46-48页
        5.2.1 脂筏提取鉴定第46页
        5.2.2 人 T 细胞分选试剂盒第46-47页
        5.2.3 Western 检测 CD28 相关信号通路蛋白磷酸化水平第47页
        5.2.4 免疫荧光方法检测胞内脂类小分子 PIP3 水平第47-48页
    5.3 结果第48-52页
    5.4 讨论第52-55页
6.LAT 分子缺失对 T 细胞活化相关转录因子的研究机制探讨第55-69页
    6.1 材料第56-58页
    6.2 实验方法和步骤第58-62页
        6.2.1 质粒转化第58-62页
    6.3 结果第62-66页
    6.4 讨论第66-69页
全文结论第69-70页
LAT 分子参与外周 T 细胞活化和分化的调节机制模式图第70-81页
综述:基因组学时代的免疫学研究第81-98页
致谢第98-99页
攻读博士期间发表的文章第99-100页
参考文献第100-106页

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