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早期胚胎发生中细胞命运决定及胚柄细胞胚胎发生潜能的探究

本论文的创新点及意义第5-9页
中文摘要第9-11页
ABSTRACT第11-12页
第一章、文献综述第14-49页
    1.1 植物胚胎发生过程中的重要事件第14-24页
        1.1.1 母本控制向合子基因组控制的转变第14-15页
        1.1.2 合子的极性与胚胎极性的建立第15-17页
        1.1.3 顶基细胞的分化第17-21页
        1.1.4 胚胎模式建成第21-24页
    1.2 小孢子胚胎发生第24-37页
        1.2.1 小孢子胚胎发生是研究植物胚胎发生的重要系统第25-28页
        1.2.2 小孢子从配子体发育向孢子体发育途径转化第28-35页
        1.2.3 烟草和油菜的小孢子胚胎发生系统第35-37页
    1.3 胚柄的简介以及胚体、胚柄相互作用第37-46页
        1.3.1 胚柄的简介第37-41页
        1.3.2 胚柄细胞的发育潜能以及与胚体间相互作用第41-46页
    1.4 激光显微切割技术第46-47页
    1.5 本论文研究的基础、目的和意义第47-49页
第二章、NtDRP是一个配子体向孢子体转变的标记基因第49-62页
    前言第49页
    2.1 材料方法第49-51页
        2.1.1 供试材料第49页
        2.1.2 合子的分离第49-50页
        2.1.3 烟草人工授粉第50页
        2.1.4 烟草小孢子胚胎发生第50页
        2.1.5 统计小孢子胚胎过程中的荧光出现时间和比率第50-51页
        2.1.6 微培养烟草小孢子第51页
        2.1.7 观察与摄影第51页
        2.1.8 数据分析第51页
    2.2 实验结果第51-58页
        2.2.1 NtDRP卵细胞中不表达,孢子体发育时期表达第51-53页
        2.2.2 NtDRP在雄配子体发育过程中不表达第53页
        2.2.3 NtDRP∷GFP在授粉后56个小时合子未表达,72小时开始表达第53-54页
        2.2.4 培养72小时小孢子NtDRP开始表达并随之产生特征性形态变化第54-55页
        2.2.5 小孢子胚胎发生的过程中NtDRP∷GFP荧光出现的时间以及比率统计第55-56页
        2.2.6 在小孢子胚胎发育过程中NtDRP基因的表达第56-57页
        2.2.7 培养9天时表达NtDRP基因的小孢子成胚率比尚未表达的高很多第57-58页
        2.2.8 工作计划第58页
    2.4 结果讨论第58-62页
        2.4.1 NtDRP可以作为从配子体发育向孢子体发育途径转化的标记基因第58-61页
        2.4.2 NtDRP在小孢子胚与合子胚中的表达模式有差异第61-62页
第三章、裂外壁诱导油菜小孢子极性导致了子细胞的不同命运第62-77页
    前言第62页
    3.1 材料方法第62-66页
        3.1.1 供试材料第62-63页
        3.1.2 普通油菜小孢子胚胎发生第63页
        3.1.3 裂外壁油菜小孢子的培养第63页
        3.1.4 RNA提取及扩增第63-65页
        3.1.5 实时定量PCR第65-66页
        3.1.6 RT-PCR第66页
        3.1.7 PIN蛋白的免疫荧光染色第66页
    3.2 实验结果第66-73页
        3.2.1 裂外壁小孢子分裂前具有极性,两个子细胞具不同的发育命运第66-68页
        3.2.2 小孢子分裂后两个细胞中PIN蛋白分布不同第68-70页
        3.2.3 合子胚BnWOX2、BnWOX8及BnWOX9的表达模式与拟南芥类似第70-72页
        3.2.4 BnWOX8基因可以作为一个胚柄细胞分化的标志第72-73页
    3.3 结果讨论第73-77页
        3.3.1 裂外壁小孢子是研究早期胚胎发生的方便且独特系统第73-74页
        3.3.2 外壁的开裂能够诱导小孢子产生极性,最终导致的子细胞的不同发育命运第74-75页
        3.3.3 BnWOX家族基因可以作为一个鉴定胚柄、胚体细胞发育命运的标记基因第75-77页
第四章、胚柄胚胎发生潜能与胚柄一胚体相互作用第77-81页
    前言第77页
    4.1 材料方法第77-79页
        4.1.1 供试材料第77页
        4.1.2 激光切割拟南芥胚珠第77-78页
        4.1.3 拟南芥胚珠培养第78页
        4.1.4 拟南芥胚珠透明第78-79页
        4.1.5 观察照相第79页
    4.2 实验结果第79-80页
        4.2.1 授粉两天以后胚珠中胚柄细胞核内的GFP荧光信号第79页
        4.2.2 小球形胚切断胚柄-胚体的联系后胚柄细胞有发育成胚体的潜能第79-80页
    4.3 结果讨论:胚柄-胚体间相互作用第80-81页
第五章、总讨论第81-83页
参考文献第83-98页
致谢第98页

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