| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 第1章 前言 | 第13-27页 |
| 1 小麦遗传转化研究进展 | 第13-18页 |
| 1.1 小麦遗传转化方法 | 第13-17页 |
| 1.1.1 基因枪法 | 第13-14页 |
| 1.1.2 农杆菌介导法 | 第14-16页 |
| 1.1.3 花粉管通道法 | 第16页 |
| 1.1.4 其他方法 | 第16-17页 |
| 1.2 小麦遗传转化中的筛选标记基因 | 第17-18页 |
| 1.2.1 草丁膦N-乙酰转移酶基因(Bar) | 第17页 |
| 1.2.2 磷酸甘露糖异构酶基因(manA) | 第17-18页 |
| 2 小麦穗发芽研究进展 | 第18-23页 |
| 2.1 穗发芽的危害 | 第19页 |
| 2.2 小麦穗发芽的主要影响因素 | 第19-22页 |
| 2.2.1 胚的休眠性 | 第19-20页 |
| 2.2.2 α-淀粉酶活性 | 第20页 |
| 2.2.3 种皮 | 第20页 |
| 2.2.4 穗部特征 | 第20-21页 |
| 2.2.5 环境因素 | 第21-22页 |
| 2.3 小麦穗发芽的防治对策 | 第22-23页 |
| 2.3.1 使用穗发芽抑制物质 | 第22页 |
| 2.3.2 加强栽培管理 | 第22页 |
| 2.3.3 选育抗穗发芽品种 | 第22-23页 |
| 3 小麦赤霉病研究进展 | 第23-25页 |
| 3.1 小麦赤霉病的危害 | 第23页 |
| 3.2 小麦赤霉病的发病因素 | 第23-24页 |
| 3.2.1 品种抗性及生育期 | 第23页 |
| 3.2.2 气候条件 | 第23-24页 |
| 3.2.3 病菌菌源量 | 第24页 |
| 3.2.4 其他因素 | 第24页 |
| 3.3 小麦赤霉病的防治 | 第24-25页 |
| 4 研究目的及意义 | 第25-27页 |
| 第2章 转化基因的制备 | 第27-31页 |
| 1 材料与方法 | 第27-29页 |
| 1.1 实验材料 | 第27页 |
| 1.1.1 菌株及质粒 | 第27页 |
| 1.1.2 试剂 | 第27页 |
| 1.1.3 培养基 | 第27页 |
| 1.2 实验方法 | 第27-29页 |
| 1.2.1 质粒DNA的提取 | 第27-28页 |
| 1.2.2 DNA片段回收 | 第28-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-30页 |
| 2.1 最小表达框的制备 | 第29-30页 |
| 2.2 用于基因枪转化的基因 | 第30页 |
| 3 讨论 | 第30-31页 |
| 第3章 抗穗发芽基因转化小麦幼胚愈伤 | 第31-39页 |
| 1 材料与方法 | 第31-35页 |
| 1.1 实验材料 | 第31-33页 |
| 1.1.1 转化基因 | 第31页 |
| 1.1.2 小麦材料 | 第31页 |
| 1.1.3 小麦幼胚愈伤转化所用培养基 | 第31-32页 |
| 1.1.4 小麦基因组DNA提取试剂 | 第32页 |
| 1.1.5 引物 | 第32-33页 |
| 1.2 实验方法 | 第33-35页 |
| 1.2.1 幼胚接种和培养 | 第33页 |
| 1.2.2 幼胚愈伤的高渗处理及基因枪轰击 | 第33页 |
| 1.2.3 幼胚愈伤的恢复培养及植株再生 | 第33页 |
| 1.2.4 小麦基因组DNA提取试剂的配制 | 第33-34页 |
| 1.2.5 小麦叶片DNA的提取 | 第34-35页 |
| 1.2.6 抗性植株的PCR鉴定 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-37页 |
| 2.1 小麦遗传转化 | 第35-36页 |
| 2.2 转基因小麦的PCR鉴定 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-39页 |
| 第4章 抗赤霉病基因转化小麦幼胚愈伤 | 第39-44页 |
| 1 材料与方法 | 第39-41页 |
| 1.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 1.1.1 转化基因 | 第39页 |
| 1.1.2 小麦材料 | 第39页 |
| 1.1.3 小麦幼胚愈伤转化所用培养基 | 第39页 |
| 1.1.4 小麦基因组DNA提取试剂 | 第39-40页 |
| 1.1.5 引物 | 第40页 |
| 1.2 实验方法 | 第40-41页 |
| 1.2.1 幼胚接种和培养 | 第40页 |
| 1.2.2 幼胚愈伤的高渗处理及基因枪轰击 | 第40页 |
| 1.2.3 幼胚愈伤的恢复培养及植株再生 | 第40页 |
| 1.2.4 小麦基因组DNA提取试剂的配制 | 第40页 |
| 1.2.5 小麦叶片DNA的提取 | 第40-41页 |
| 1.2.6 抗性植株的PCR鉴定 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-43页 |
| 2.1 小麦遗传转化 | 第41页 |
| 2.2 转基因小麦的PCR鉴定 | 第41-43页 |
| 3 讨论 | 第43-44页 |
| 第5章 抗穗发芽基因和抗赤霉病基因转化小麦幼胚愈伤 | 第44-66页 |
| 1 材料与方法 | 第44-52页 |
| 1.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 1.1.1 转化基因 | 第44页 |
| 1.1.2 小麦材料 | 第44页 |
| 1.1.3 小麦幼胚愈伤转化所用培养基 | 第44页 |
| 1.1.4 小麦基因组DNA提取试剂 | 第44页 |
| 1.1.5 小麦幼胚中RNA提取及RT-PCR试剂 | 第44页 |
| 1.1.6 Southern杂交试剂 | 第44页 |
| 1.1.7 引物 | 第44-45页 |
| 1.2 实验方法 | 第45-52页 |
| 1.2.1 幼胚接种和培养 | 第45页 |
| 1.2.2 幼胚愈伤的高渗处理及基因枪轰击 | 第45页 |
| 1.2.3 幼胚愈伤的恢复培养及植株再生 | 第45-46页 |
| 1.2.4 小麦基因组DNA提取试剂的配制 | 第46页 |
| 1.2.5 Southern杂交相关试剂配制 | 第46页 |
| 1.2.6 小麦叶片DNA的提取 | 第46页 |
| 1.2.7 抗性植株的PCR鉴定 | 第46页 |
| 1.2.8 Southern杂交 | 第46-49页 |
| 1.2.9 幼胚RNA的提取及RT-PCR鉴定 | 第49-50页 |
| 1.2.10 穗发芽抗性鉴定 | 第50-51页 |
| 1.2.11 赤霉病抗性鉴定 | 第51-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-63页 |
| 2.1 转基因小麦的PCR鉴定 | 第52-56页 |
| 2.1.1 转基因小麦T_0代PCR鉴定 | 第52-54页 |
| 2.1.2 转基因小麦后代PCR鉴定 | 第54-56页 |
| 2.2 转基因小麦的RT-PCR鉴定 | 第56-58页 |
| 2.3 转基因小麦的Southern杂交鉴定 | 第58-59页 |
| 2.4 转基因小麦的穗发芽抗性鉴定 | 第59-62页 |
| 2.4.1 转基因小麦T_3代种子发芽抗性鉴定 | 第59-60页 |
| 2.4.2 转基因小麦T_4代穗发芽抗性鉴定 | 第60-62页 |
| 2.5 转基因小麦的赤霉病抗性鉴定 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 致谢 | 第75页 |