| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 棉花组织培养研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2 影响棉花体细胞胚胎发生和植株再生的主要因素 | 第11-13页 |
| 1.2.1 基因型 | 第11页 |
| 1.2.2 外源激素 | 第11-12页 |
| 1.2.3 外植体类型和生理状态 | 第12页 |
| 1.2.4 培养基的种类及培养条件 | 第12-13页 |
| 1.3 植物体细胞胚胎发生过程中胚性细胞的起源部位 | 第13-14页 |
| 1.4 植物体细胞胚胎发生相关基因及其功能研究 | 第14-16页 |
| 1.5 棉花体细胞胚胎发生的分子机制 | 第16页 |
| 1.6 Aux/IAA基因的研究进展 | 第16-19页 |
| 1.6.1 Aux/IAA基因结构特点 | 第16-17页 |
| 1.6.2 SCF复合体 | 第17-18页 |
| 1.6.3 Aux/IAA基因功能 | 第18-19页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 陆地棉体细胞胚胎发生 | 第21-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-27页 |
| 2.2.1 棉花组织培养所用基本培养基和培养条件 | 第22页 |
| 2.2.2 无菌苗培养 | 第22页 |
| 2.2.3 研究基因型对愈伤组织诱导的影响 | 第22页 |
| 2.2.4 愈伤组织细胞学压片观察 | 第22-23页 |
| 2.2.5 鲁棉6号再生及体细胞胚胎发生过程研究 | 第23-27页 |
| 2.2.5.1 激素在愈伤组织诱导及胚性愈伤组织中的效应 | 第23-24页 |
| 2.2.5.2 组织学观察 | 第24-25页 |
| 2.2.5.3 陆地棉再生相关基因的表达分析 | 第25-27页 |
| 2.2.5.3.1 实验材料 | 第25页 |
| 2.2.5.3.2 RNA的提取及纯化 | 第25页 |
| 2.2.5.3.3 RNA的反转录 | 第25-26页 |
| 2.2.5.3.4 RT-PCR分析陆地棉再生过程中相关基因的表达 | 第26-27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-38页 |
| 2.3.1 愈伤组织细胞学观察 | 第27-28页 |
| 2.3.2 不同基因型愈伤组织诱导 | 第28页 |
| 2.3.3 降低外源激素浓度及外植体选择 | 第28-30页 |
| 2.3.4 不同激素组合鲁棉6号体细胞胚胎发生 | 第30-38页 |
| 2.3.4.1 不同激素组合对愈伤组织的诱导 | 第30-32页 |
| 2.3.4.2 愈伤组织的增殖及胚胎发生的诱导 | 第32页 |
| 2.3.4.3 体细胞胚的成熟和植株再生 | 第32-34页 |
| 2.3.4.4 IBA处理下体细胞胚胎发生及组织学观察 | 第34-36页 |
| 2.3.4.5 胚胎发生相关基因的RT-PCR验证 | 第36-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-42页 |
| 2.4.1 体细胞胚胎发生过程检测手段的选择 | 第38页 |
| 2.4.2 鲁棉6号体细胞胚胎发生的影响因素 | 第38-39页 |
| 2.4.3 棉花体细胞胚的起源部位 | 第39页 |
| 2.4.4 体胚发生过程中相关基因的差异表达 | 第39-42页 |
| 第三章 GhAUX/IAA4基因的克隆与功能验证 | 第42-60页 |
| 3.1 实验材料 | 第42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-48页 |
| 3.2.1 GhAux/IAA基因的克隆与分离 | 第42页 |
| 3.2.2 GhAux/IAA4基因结构分析 | 第42-43页 |
| 3.2.3 GhAux/IAA4基因表达模式分析 | 第43-44页 |
| 3.2.4 载体构建 | 第44-45页 |
| 3.2.4.1 GhAux/IAA4超量表达载体和GFP融合载体构建 | 第44-45页 |
| 3.2.4.2 GhAux/IAA4RNAi载体构建 | 第45页 |
| 3.2.5 农杆菌的电转化 | 第45-46页 |
| 3.2.6 农杆菌介导的棉花和转基因材料的获得 | 第46-47页 |
| 3.2.6.1 农杆菌介导的棉花下胚轴遗传转化 | 第46页 |
| 3.2.6.2 转基因材料的获得 | 第46页 |
| 3.2.6.3 棉花转基因材料的鉴定 | 第46页 |
| 3.2.6.4 棉花愈伤对生长素响应的鉴定 | 第46-47页 |
| 3.2.7 农杆菌介导的拟南芥的遗传转化和转基因材料的获得 | 第47-48页 |
| 3.2.7.1 农杆菌侵染拟南芥花序的遗传转化 | 第47页 |
| 3.2.7.2 转基因拟南芥材料的获得 | 第47页 |
| 3.2.7.3 转基因拟南芥材料的鉴定 | 第47-48页 |
| 3.2.7.4 转基因拟南芥表型观察 | 第48页 |
| 3.2.7.5 转基因拟南芥根对重力的响应 | 第48页 |
| 3.2.7.6 转基因拟南芥对生长素IAA的响应 | 第48页 |
| 3.3 结果与分析 | 第48-57页 |
| 3.3.1 GhAux/IAA4序列克隆与结构分析 | 第48-50页 |
| 3.3.2 GhAux/IAA4基因在棉花不同组织的表达模式 | 第50-52页 |
| 3.3.3 超表达和干涉载体转化根癌农杆菌后阳性克隆的检测 | 第52页 |
| 3.3.4 转GhAux/IAA4基因棉花胚性愈伤的鉴定与表型观察 | 第52-53页 |
| 3.3.5 转GhAux/IAA4基因棉花胚性愈伤对生长素信号的响应 | 第53-55页 |
| 3.3.6 GhAux/IAA4基因拟南芥超量表达植株鉴定及表型观察 | 第55-57页 |
| 3.3.7 转基因拟南芥在不同IAA浓度处理下主根长度的变化 | 第57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-60页 |
| 3.4.1 GhAux/IAA4是从棉花中分离出来的一个Aux/IAA类基因 | 第57-58页 |
| 3.4.2 GhAux/IAA4超量表达棉花胚性愈伤表型及对生长素信号的响应 | 第58页 |
| 3.4.3 GhAux/IAA4超量表达拟南芥表型及对生长素信号的响应 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 附录 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
