| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 上篇 文献综述 | 第11-30页 |
| 第一章 产酶溶杆菌的研究进展 | 第12-20页 |
| 1 产酶溶杆菌(L.enzymogenes)的分类与鉴定 | 第12-13页 |
| 2 产酶溶杆菌的生物学特性 | 第13-14页 |
| 3 产酶溶杆菌的生防机制 | 第14-18页 |
| 3.1 胞外水解酶 | 第14-15页 |
| 3.2 小分子活性物质 | 第15-18页 |
| 4 Ⅳ型菌毛(typeⅣpili,T4P) | 第18-20页 |
| 第二章 孤立LuxR家族蛋白 | 第20-26页 |
| 1 群体感应系统(Quorum Sensing) | 第20页 |
| 2 依赖于AHLs的群体感应系统 | 第20-21页 |
| 3 孤立LuxR蛋白 | 第21-26页 |
| 3.1 LuxR蛋白家族 | 第21-22页 |
| 3.2 细菌中的孤立LuxR蛋白分类 | 第22-26页 |
| 第三章 TonB依赖性外膜受体(TonB-dependent receptor) | 第26-30页 |
| 1 TonB依赖性外膜受体的结构 | 第26页 |
| 2 TonB依赖性外膜受体的功能 | 第26-27页 |
| 3 TBDRs合成的调控机制 | 第27-30页 |
| 3.1 TBDRs编码基因的构成 | 第27页 |
| 3.2 Fur对铁离子吸收相关TBDRs转录的调控 | 第27-30页 |
| 下篇 研究内容 | 第30-70页 |
| 第一章 产酶溶杆菌中受LesR调控的TBDR蛋白的鉴定与功能研究 | 第32-70页 |
| 1 实验材料 | 第36-41页 |
| 1.1 菌株、质粒和培养条件 | 第36-38页 |
| 1.2 引物设计 | 第38-40页 |
| 1.3 培养基 | 第40-41页 |
| 1.4 酶、抗生素、试剂盒和化学试剂 | 第41页 |
| 2 实验方法 | 第41-54页 |
| 2.1 DNA操作方法和体系 | 第41-43页 |
| 2.2 产酶溶杆菌OH11基因组DNA的提取 | 第43页 |
| 2.3 产酶溶杆菌中基因缺失突变体构建 | 第43-44页 |
| 2.4 产酶溶杆菌OH11基因组DNA的提取 | 第44-45页 |
| 2.5 连接产物转化大肠杆菌DH5α | 第45页 |
| 2.6 质粒的提取与酶切验证 | 第45-46页 |
| 2.7 产酶溶杆菌OH11电转感受态的制备及突变体的筛选 | 第46-47页 |
| 2.8 互补,定点突变,相应突变体空载及lesR过表达菌株的构建 | 第47页 |
| 2.9 HSAF的提取及HPLC检测 | 第47-48页 |
| 2.10 实时荧光定量PCR(qPCR) | 第48-51页 |
| 2.11 逆转录PCR(RT-PCR) | 第51页 |
| 2.12 菌体沉降和聚集观察 | 第51页 |
| 2.13 生长曲线的测定 | 第51页 |
| 2.14 细菌单杂交 | 第51-53页 |
| 2.15 Western Blot | 第53-54页 |
| 2.16 数据处理 | 第54页 |
| 3 结果分析 | 第54-66页 |
| 3.1 产酶溶杆菌LesR蛋白调控9个TBDR | 第54-57页 |
| 3.2 TBDR缺失突变体的构建 | 第57-58页 |
| 3.3 TBDR7互补菌株的构建 | 第58-59页 |
| 3.4 TBDR7定点突变菌株的构建 | 第59-60页 |
| 3.5 6个TBDR突变体lesR过表达菌株的构建 | 第60页 |
| 3.6 TBDR1,TBDR7突变体HSAF产量明显改变 | 第60-62页 |
| 3.7 6个TBDR突变体菌体沉降性不发生变化 | 第62页 |
| 3.8 LesR调控HSAF产量不依赖除TBDR1,7之外其余4个TBDR | 第62-63页 |
| 3.9 TBDR7的TonB box在调控HSAF合成中起到关键作用 | 第63-64页 |
| 3.10 LesR蛋白间接调控TBDR7 | 第64-65页 |
| 3.11 TBDR1介导LesR调控的菌体快速沉降 | 第65-66页 |
| 3.12 LesR蛋白间接调控TBDR1 | 第66页 |
| 4 讨论 | 第66-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
